Page 34 - 南京医科大学学报自然科学版
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第42卷第12期
               ·1670 ·                           南 京    医 科 大 学 学         报                        2022年12月


              A                                                           B
                                                                             mRNA相对表达  1.0     mRNA相对表达  1.0
                      DAPI          iNOS          CD206          Merge       1.5     **        1.5      *


                Con                                                          0.5               0.5
                                                                             iNOS  0.0         CD86  0.0
                                                                                 Con组  Lac组     4  Con组  Lac组
                                                                             mRNA相对表达  20       2
                                                                             40
                Lac                                                          30      ***        mRNA相对表达  3  **



                                                                             ARG  10 0          CD163  1 0
                                                                                 Con组  Lac组        Con组  Lac组

              C                         D        Con           Lac       RIG⁃I lys852 Ab  HMGB1 lys88 Ab  HMGB1 lys114 Ab
               Lac浓度
              (mmol/L) 0  5  15  25
                                 —250 kDa
                                 —150 kDa
                                 —100 kDa
                                 —70 kDa   DAPI
                                 —55 kDa
                                 —40 kDa
                                 —25 kDa

                                           iNOS
                                 —15 kDa
                                 —10 kDa

                    1.5      **
                          **
                   相对表达  0.5               CD206
                    1.0



                    0.0
                        0  5  15  25
                        Lac浓度(mmol/L)
                                           Merge





               E                           F       Con组  Lac组        G  40    ***  *          5
                                                                       mRNA相对表达              mRNA相对表达  3
                                             NF⁃κB            —65 kDa   30                    4    **   *

                                             β⁃actin          —42 kDa   20                    2
                                                                       ARG  10 0             CD163  1 0

                                                                                                   Lac+TNF⁃α组
                                                                              Lac+TNF⁃α组
                                                                         Con组  Lac组           Con组  Lac组
                 A:免疫荧光检测巨噬细胞iNOS、CD206的表达(×400);B:qPCR检测iNOS、CD86、ARG、CD163的mRNA转录水平;C:Western blot检测显
              示乳酸化修饰的蛋白翻译水平;D:免疫荧光检测巨噬细胞iNOS、CD206的表达(×400);E:运用分子模拟预测RIG⁃I的乳酸化修饰后下游MAVS的
                                                                                         *
                                                                                                **
                                                                                                       ***
              活化情况;F:Western blot检测NF⁃κB的蛋白的表达;G:qPCR检测ARG、CD163的mRNA转录水平。两组比较,P<0.05,P<0.01, P<0.001
             (n=3)。
                         图4   乳酸通过RIG⁃I   lys852 乳酸化修饰促进巨噬细胞M2极化并降低MAVS及其下游NF⁃κB活化
              Figure 4  Lactate promoted M2 polarization of macrophages and decreased the activation of MAVS and NF⁃κB through
                       RIG⁃I lys852 lactylation
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