Page 10 - 南京医科大学自然版
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第44卷第12期
               ·1624 ·                           南 京    医 科 大 学 学         报                        2024年12月


                      A            Mock              Ctrl         0.3 μmol/L 4⁃HC  1.0 μmol/L 4⁃HC







                                         100 μm           100 μm           100 μm     100 μm
                           2⁃cell  3.0 μmol/L 4⁃HC  10.0 μmol/L 4⁃HC  30.0 μmol/L 4⁃HC  100.0 μmol/L 4⁃HC








                                         100 μm           100 μm           100 μm     100 μm
                                   Mock              Ctrl         0.3 μmol/L 4⁃HC  1.0 μmol/L 4⁃HC








                           Blastocyst  3.0 μmol/L 4⁃HC  10.0 μmol/L 4⁃HC  30.0 μmol/L 4⁃HC  100.0 μmol/L 4⁃HC
                                                                                      100 μm
                                                                           100 μm
                                         100 μm
                                                          100 μm





                                         100 μm           100 μm           100 μm     100 μm
                      B    1.5                                  C    1.5
                          rcell formation  1.0                       1.0




                          2                       *                 Percentage of blastocysts formation  *
                          Percentage of  0.5         ***  ***        0.5                       ***  ***



                             0
                              Mock  Ctrl  0.3  1.0  3.0  10.0  30.0  100.0  0  Mock  Ctrl  0.3  1.0  3.0  10.0  30.0  100.0

                                           4⁃HC(μmol/L)                               4⁃HC(μmol/L)
                 A:Early embryo development of IVM oocytes under different concentrations of 4⁃HC after fertilization(scale bar=100 μm). B:The rates of 2⁃cell
              embryos in IVM oocytes treated with different concentrations of 4⁃HC. C:The blastocyst rate in IVM oocytes treated with different concentrations of 4⁃
                                    *
              HC. Compared with the Ctrl group,P < 0.05 and  *** P < 0.001(n=60).
                                     图1   不同浓度4⁃HC对体外成熟卵母细胞受精及囊胚形成的影响
              Figure 1  Effects of different concentrations of 4⁃HC on the fertilization and subsequent blastocyst formation of IVM oocytes


              COC 中的卵母细胞进行了 JC⁃1 染色,结果显示,与                           既往研究显示,在小鼠早期胚胎中,Dnmt3a的表
              溶剂对照组相比,1.0 μmol/L 4⁃HC 使 MⅡ期卵母细                  达增加将导致其整体5⁃甲基胞嘧啶(5⁃methylcytosine,
              胞线粒体膜电位下降(图 4A、B),这与既往一些相                         5mC)水平升高并进而引发小鼠胚胎发育阻滞                      [14] 。
              关研究结果相一致        [13] ,并进一步说明4⁃HC作用下卵              由于卵母细胞在GV期停止转录,本课题组将从GV
              母细胞质量下降。                                          期培养至 MⅡ期的 COC 中的原代颗粒细胞收集起
              2.5 卵丘细胞、受精卵、二细胞胚胎中Dnmt3a表达情况                     来,并检测了这些颗粒细胞中 Dnmt3a 的表达水平,
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