Page 12 - 南京医科大学自然版

第44卷第12期
·1626 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2024年12月

A Mock Ctrl 4⁃HC B

GSH 10 8 *
Relative fluorescence intensity of JC⁃1 6

150 μm 150 μm 150 μm 4

0 2
Mock Ctrl 4⁃HC
DHE

150 μm 150 μm 150 μm
A：Mitochondrial membrane potential decreased in oocytes treated with 1.0 μmol/L 4⁃HC（scale bar=150 μm）. B：Semi⁃quantitative ratios of
*
mitochondrial membrane potential fluorescence levels in oocytes of each group. P < 0.05（n=60）.
图4 1.0 μmol/L 4⁃HC作用下MⅡ期卵母细胞线粒体膜电位
Figure 4 Mitochondrial membrane potential in MⅡoocytes treated with 1.0 μmol/L 4⁃HC

A 2.5 ** B 2.5 ** C 2.5 **
Dnmt3a 2.0 * Dnmt3a 2.0 * Dnmt3a 2.0 **

Relative mRNA level of 1.5 Relative mRNA level of 1.5 Relative mRNA level of 1.5

1.0
1.0
1.0
0.5
0.5
0.5
0
Mock Ctrl 4⁃HC 0 Mock Ctrl 4⁃HC 0 Mock Ctrl 4⁃HC
A-C：TherelativemRNA expression levels of Dnmt3a in cumulus cells（A），2PN（B），and 2⁃cell embryos（C）under the treatment with 1.0 μmol/L 4⁃HC.
* **
P < 0.05 and P < 0.01（n=60）.
图5 1.0 μmol/L 4⁃HC作用下颗粒细胞、2PN期受精卵及2⁃细胞胚胎中Dnmt3a表达水平
Figure 5 Relative mRNA expression levels of Dnmt3a in cumulus cells，2PN，and 2⁃cell embryos under 1.0 μmol/L 4⁃HC
treatment

并检测了 2 个原核（2 pronuclear，2PN）期受精卵及
3 讨 论
二细胞胚胎中 Dnmt3a 表达水平。结果显示，与溶
剂对照组相比，1.0 μmol/L 4⁃HC 作用下 Dnmt3a 的 在卵母细胞中，ROS 的主要来源是线粒体电
mRNA 水平在颗粒细胞、受精卵及二细胞胚胎中均 子呼吸链上的电子泄漏 ［15］ ，正常状态下，卵母细胞
显著表达升高（图 5），这提示 4⁃HC 可能通过上调 的抗氧化体系能够有效抵御自身产生的 ROS，从而
卵母细胞中 DNMT3A 表达引发小鼠早期胚胎发育 维持氧化⁃抗氧化体系的平衡。既往研究发现，
阻滞。 CTX 在代谢过程中，其活性代谢产物通过醇脱氢酶

2.6 MⅡ期卵母细胞中DNMT3A表达情况 （alcoholdehydrogenase，ADH）、醛 脱 氢 酶（aldehyde
通过 DNMT3A 免疫荧光染色的方式对体外培 dehydrogenase，ALDH）和谷胱甘肽 S⁃转移酶（gluta⁃
养至MⅡ期的COC中卵母细胞DNMT3A表达情况进 thione S⁃transferases，GST）等酶的作用，利用 GSH 作
行了检测。结果同样也显示，与溶剂对照组相比， 为辅因子解毒为无活性代谢物。与先前的一些研

1.0 μmol/L 4⁃HC作用下MⅡ期卵母细胞中DNMT3A 究结果相一致 ［16］ ，本研究结果显示，CTX 的活性代
表达上升（图6A）。 谢产物 4⁃HC 可引发卵母细胞内 GSH 含量消耗和