Page 20 - 南京医科大学自然版

第44卷第12期
·1634 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2024年12月

（图3B、C，P < 0.01）。因此，4⁃HC使P53在卵巢颗粒 TOMM20 蛋白的共定位明显降低（图 4A、B）。而
细胞中累积，而这一现象与4⁃HC抑制线粒体自噬的 Parkin 蛋白含量增加，提示 Parkin 依赖的线粒体自
关系仍需要进一步探索。 噬通路受到了阻塞，将 P53 蛋白与 Parkin 蛋白免疫
2.4 4⁃HC 可能通过 P53⁃Parkin 通路抑制线粒体 荧光共染色，与 DMSO 相比，4⁃HC 组中 P53 蛋白明
自噬 显增加且在胞质中与 Parkin 蛋白共定位明显，而
4⁃HC体外损伤卵巢颗粒细胞会使细胞中Parkin DMSO组中几乎没有共定位（图4C、D）。因此，在4⁃
蛋白增加，提示 Parkin 依赖的线粒体自噬通路可能 HC 体外损伤卵巢颗粒细胞中，P53 在胞质中累积，
出现异常。免疫荧光检测 TOMM20 与 Parkin 的表 可能竞争性结合胞质 Parkin 蛋白，阻止 Parkin 蛋白
达 ，与 DMSO 组 相 比 ，4 ⁃ HC 组 中 Parkin 蛋 白 与 向受损的线粒体移位，从而抑制了线粒体自噬。

A
DAPI P53 Merge 5 *
Fluorescence intensity of P53 2 1 0

DMSO 4 3

4⁃HC DMSO 4⁃HC

B C
DMSO 4⁃HC DMSO 4⁃HC
Vinculin 124 kDa Vinculin 124 kDa
P53 ** 53 kDa MDM2 ** 55 kDa
Relative intensity of P53 4 3 2 1 Relative intensity of MDM2 1.0
1.1
5
0.9
0.8
0.7

0
0.5
DMSO 4⁃HC 0.6 DMSO 4⁃HC
A：P53 fluorescence signal in SVOG cells. Scale bars=100 μm. B，C：Western blot detection of P53 protein（B）and MDM2 protein（C）. P < 0.05，
*
**
P < 0.01（n=3）.
图3 P53蛋白在4⁃HC损伤的SVOG细胞胞质中累积
Figure 3 The P53 protein accumulated in SVOG cells damaged by 4⁃HC

酰胺损伤卵巢的潜在作用机制对于研制出有效的
3 讨 论
临床治疗应对策略或者预防方法至关重要。本研
在现代社会，年轻人肿瘤的发病率逐渐上升， 究探讨了环磷酰胺的体外活化物 4⁃HC 对人卵巢颗
这导致育龄女性在接受化疗时卵巢功能受到不同 粒细胞系 SVOG 的功能损伤及其可能机制，发现 4⁃
程度的损害。环磷酰胺作为临床常用的化疗药物， HC对SVOG细胞产生显著的损伤作用，并伴随线粒
是损伤女性癌症治疗患者卵巢功能的主要原因之 体自噬通量的抑制，这一结果提示4⁃HC可能通过影
一。目前，在临床中，缺乏减轻环磷酰胺导致女性 响细胞内的自噬途径导致线粒体功能障碍。
生育能力受损的有效治疗方法 ［19］ 。因此研究环磷 本研究发现，4⁃HC在一定浓度范围内对细胞具