Page 18 - 南京医科大学自然版

第44卷第12期
·1632 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2024年12月

统计学意义。 细胞皱缩，结构松散，细胞核变大，部分细胞不贴壁
的损伤表型，而 72 h 后细胞老化严重，出现更严重
2 结 果
的皱缩和死亡，只有少量细胞存活（图1A）。CCK⁃8
2.1 建立体外卵巢颗粒细胞4⁃HC损伤模型 法 观 察 各 组 细 胞 活 力 结 果 显 示 ，培 养 24 h 后 ，
为确定 4⁃HC 对卵巢颗粒细胞损伤作用的浓度 0.2 μmol/L组和2.0 μmol/L组与对照组差异无统计学
和暴露时间，本研究检测了不同 4⁃HC 添加浓度 意义，而10.0 μmol/L组细胞无法存活；培养48 h后，
（0.2、2.0、10.0 μmol/L）在不同暴露时间（24、48、72 h） 0.2 μmol/L组与对照组无明显差异，而2.0 μmol/L组
下的细胞形态，分为对照组、溶剂对照（DMSO）组、 与对照组有显著差异；培养 72 h 后 0.2 μmol/L 组与

0.2 μmol/L 4⁃HC组、2.0 μmol/L 4⁃HC组、10.0 μmol/L 对照组无明显差异，2.0 μmol/L 组与对照组有显著
4⁃HC组，并采用 CCK⁃8 法检测细胞活力。显微镜 差异，且存活率下降至 20%（图 1B~D），因此选择
下观察细胞形态，结果显示，对照组、DMSO 组和 2.0 μmol/L的4⁃HC体外作用卵巢颗粒细胞48 h诱导
0.2 μmol/L 组在 24 h、48 h 以及 72 h 的卵巢颗粒细 损伤模型。
胞贴壁生长，表面平滑，边界清晰，并无损伤表型； 2.2 在4⁃HC损伤的卵巢颗粒细胞中线粒体自噬受
10.0 μmol/L 组细胞 24 h 后死亡；2.0 μmol/L 组作用 到抑制
24 h 的卵巢颗粒细胞无损伤表型，但是 48 h 后存在 探索 4⁃HC 损伤卵巢颗粒细胞的机制对于研究

4⁃HC
A Control DMSO 0.2 μmol/L 2.0 μmol/L 10.0 μmol/L

h
24

h
48

h
72

B C D
150 150 150
*** ***
*** h *** h ***
（%） 100 ⁃48 （%） 100 ⁃72 （%） 100
Viability 50 Viability 50 Viability 50

0 0 0
Control DMSO 0.2 2.0 10.0 Control DMSO 0.2 2.0 10.0 Control DMSO 0.2 2.0 10.0
4⁃HC（μmol/L） 4⁃HC（μmol/L） 4⁃HC（μmol/L）
A：Cell morphology at different 4⁃HC concentrations（0.2，2.0，10.0 μmol/L）and various exposure times（24，48，72 h）（scale bars=200 μm）. B-D：
CCK8 assay was used to detect the cell viability of SVOG cells exposed to different concentrations of 4⁃HC（0.2，2.0，10.0 μmol/L）and at various time
***
points（24，48，72 h）. P < 0.001（n=3）.
图1 建立体外SVOG 4⁃HC损伤模型
Figure 1 Establishment of an in vitro model of 4⁃HC⁃induced damage in SVOG cells