Page 30 - 南京医科大学自然版

第44卷第12期
·1644 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2024年12月

细胞，进行敲降慢病毒的感染，取对数生长期的 发挥作用。
KYSE410细胞，进行过表达慢病毒感染，并通过RT⁃ 2.4 LINC01424体内功能研究
PCR 确 定 各 组 LINC01424 的 表 达 情 况（图 3B）。 为了进一步验证 LINC01424 在 ESCC 的作用，
CCK⁃8、平板克隆、Transwell 实验结果表明，敲降 利用裸鼠移植瘤模型评价LINC01424对在体肿瘤生
LINC01424 能够显著降低 ESCC 细胞增殖、侵袭能 长的影响，结果表明敲降 LINC01424 明显抑制肿瘤
力；而过表达 LINC01424 后，其增殖、侵袭能力显著 的 在 体 生 长（ 图 4A~C）。 RT ⁃ PCR 检 测 发 现
增 强（ 图 3C~E）。 以 上 细 胞 实 验 结 果 提 示 ， LINC01424敲降组中瘤体LINC01424 的表达明显降
LINC01424能够作为致癌基因在ESCC增殖、侵袭中 低（图4D），Ki⁃67 蛋白表达显著下调（图4E）。

A ** B C
8 *** 6 ***
level 6 *** 4 4 3 ● ■ ▲ NC ECA109
KD
Relative LINC01424 4 2 ** Relative expression of LINC01424 2 *** Relative cell vitality 2 ▼ OE KYSE410 ▼ ▲ ▼ ● ***
NC

***

0 0 1 ▼ ● ▲ ■ ● ▲ ■ ■
KYSE150
KYSE410
KYSE30 KYSE70 ECA109 KYSE180 TE⁃1 TE⁃10 HEEC NC KD NC OE 0 ▼ ● ▲
■
KYSE410
ECA109109
ECA
2
1
Time（d） 3 4
D NC KD
ECA109 KYSE410
250 *** 250
ECA109 200 200 ***
Number of colonies 150 Number of colonies 150
NC OE 100 100
KYSE410 50 50

0
NC KD 0 NC OE

E NC KD ECA109 2.5 KYSE410
1.5
ECA109 1.0 *** 2.0 ***

1.5

NC OE Invasion fold change 0.5 Invasion fold change 1.0
KYSE410 0.5

0 0
NC KD NC OE
A：Expression of LINC01424 in HEEC and ESCC cell lines. B：qRT⁃PCR assay to verify the expression of LINC01424. C，D：CCK⁃8 assays（C）
and colony formation assays（D）were performed to determine the cell viability of ESCC cells（×200）. E：Invasion assays were used to detect the invasion
**
***
abilities of ESCC cells（×200）. NC：negative control；KD：knockdown；OE：overexpressin. P < 0.01， P < 0.001（n=3）.
图3 敲低/过表达CT⁃LINC01424可以抑制/促进ESCC增殖和侵袭能力
Figure 3 Knockdown/overexpression of CT⁃LINC01424 inhibited/promoted the proliferation and invasive ability of ESCC

2.5 LINC01424潜在靶基因预测 库，预测了LINC01424的潜在靶基因，相关性评分排
为进一步探索LINC01424对食管癌进展影响的 名前10的基因如图5A所示。随后使用公共数据库
具体机制，试图寻找其下游基因。基于 MEM 数据 GSE53624（119 对 ESCC 样本）分析结果进一步证实