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第44卷第9期 刘 玉，应 帅，罗 灿，等. Sublytic C5b⁃9上调KLF5促进Thy⁃1肾炎大鼠肾小球系膜细胞
2024年9月 生成IL⁃23的作用［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2024，44（9）：1198-1206 ·1199 ·

Alternatively，pGL3⁃IL⁃23⁃FL was co⁃transfected with either pIRES2⁃KLF5 or shKLF5 into GMCs，and changes in IL⁃23 promoter
activity were measured using a luciferase reporter gene assay. ④The LV⁃shKLF5 and LV⁃shCTR lentivirus vectors were respectively
perfused into rat renal tissues via the artery perfusion. After confirming that LV⁃shCTR could enrich in rat kidney through animal
imaging system and frozen section，the Thy⁃1N was reproduced，and the KLF5 and IL⁃23 expression in the renal tissues were measured
by WB. Results：①The expressions of KLF5 and IL⁃23 were significantly increased in the renal tissues of Thy⁃1N rats and in GMCs
stimulated by sublytic C5b⁃9，with KLF5 expression peaking slightly earlier than IL⁃23. ②Overexpression or knockdown of KLF5 in
GMCs led to an increase or decrease in IL ⁃ 23 expression，respectively. ③ Sublytic C5b ⁃ 9 stimulation or KLF5 overexpression
upregulated the activity of IL⁃23 promoter，while KLF5 knockdown markedly reduced the IL⁃23 promoter activity induced by sublytic
C5b⁃9. ④IL⁃23 expression in the renal tissues of the rats treated by knocking down of renal KLF5 gene was significantly downregulated.
Conclusion：In the early stage of Thy⁃1N in rats，sublytic C5b⁃9 stimulates GMCs to promote the transcription and expression of the IL⁃23
gene by upregulating KLF5.
［Key words］ Thy⁃1 nephritis；sublytic C5b⁃9；glomerular mesangial cell；krüppel⁃like factor 5；interleukin⁃23
［J Nanjing Med Univ，2024，44（09）：1198⁃1206］

系膜增生性肾小球肾炎（mesangial proliferative 达显著升高，而当沉默KLF5基因后，由IL⁃1β诱导的
［13］
glomerulonephritis，MsPGN）是一种免疫相关的肾脏 促炎因子IL⁃6和IL⁃8的生成水平则明显降低 。另
疾病（如IgA型肾病），其主要病理特征是：肾组织早 有研究证实，在糖尿病小鼠的血管平滑肌细胞中，
期炎症以及病程中后期的肾小球系膜细胞（glomer⁃ KLF5 是诱导 TNF⁃α和 IL⁃1β表达所必需的因素 ［14］ 。
ular mesangial cell，GMC）增生和细胞外基质（extra⁃ 此外，在大鼠GMC中，敲低KLF5表达可下调由sub⁃
cellular matrix，ECM）积聚，最终可引起肾脏的纤维 lytic C5b⁃9 诱导的 IL⁃36α的表达水平 ［15］ 。由此可
化，导致患者的肾功能衰竭 ［1-3］ 。大鼠 Thy⁃1 肾炎 见，KLF5在某些促炎因子的生成过程中发挥了重要
（Thy⁃1 nephritis，Thy⁃1N）的病理改变与人MsPGN的 的促进效应，加剧了组织的炎症。
病变十分相似，是目前公认的研究MsPGN的动物模 IL⁃23属于IL⁃12 家族的一个成员，其主要功能
［4］
型 。有文献报道，无论是MsPGN患者还是Thy⁃1N 是参与多种组织的炎症反应，诱导炎性肠病、强直
大鼠，其肾组织中不仅可见补体C5b⁃9复合物沉积于 性脊柱炎和狼疮性肾炎 ［16-18］ 。研究报道，伴有间质
GMC表面，而且还可见促炎细胞因子的增多 ［5-8］ 。此 性肾炎的小鼠和人肾小管上皮细胞中IL⁃23表达显著
外，研究证实，Thy⁃1N大鼠的GMC病变具有C5b⁃9依 升高，而IL⁃23高表达既可重塑肾脏固有细胞代谢，
赖性 ［9-10］ 。 又能促进肾组织的炎症 ［18］ 。系统性红斑狼疮（sys⁃
已知补体系统激活后产生的C5b⁃9攻击靶细胞 temic lupus erythematosus，SLE）患者血清中 IL⁃23 的
的方式可分为全溶解型（lytic）和亚溶解型（sublytic） 水平亦显著升高，且其升高程度与狼疮性肾炎的活
两种，前者可直接引起细胞膜穿孔破坏，而后者虽 动程度呈正相关 。此外，在一些自身免疫性疾病
［19］
不直接溶解靶细胞，但能激活胞内多种信号通路， （如类风湿关节炎、多发性硬化症和银屑病）中，IL⁃23
促使细胞产生不同的生物学效应 ［7-8，11］ 。本课题组 能明显加重慢性免疫性炎症，且IL⁃23/IL⁃17轴还可加
以往的研究发现，Thy⁃1N 大鼠发病早期，其 GMC 表 速其炎性病变的进展 。以上研究提示，IL⁃23表达
［20］
面沉积的C5b⁃9多为sublytic C5b⁃9。体外用sublytic 升高起到了重要的促炎作用。
C5b⁃9刺激大鼠GMC后也能活化或上调细胞内某些 由于大鼠 Thy⁃1N 是研究 MsPGN 的动物模型，
信号分子或转录因子，促进多种靶基因的转录和表 其病变具有 sublytic C5b⁃9 依赖性 ［4，8-9］ ，且本课题组
达，最终引起GMC增生或某些促炎细胞因子的合成 前期实验也证实，Thy⁃1N大鼠的肾组织和受sublytic
与释放 ［8-10］ 。 C5b⁃9 刺激的 GMC 中，KLF5 和 IL⁃23 的表达显著上
Krüppel 样因子 5（Krüppel⁃like factor 5，KLF5） 调，且 KLF5 的升高峰值还稍早于 IL⁃23 的表达高
属于KLF家族成员，是一种含有锌指结构的转录因 峰。此外，国内外学者发现，KLF5能调控多种促炎
子 ［12］ ，在机体多种细胞中表达，参与调控组织和细 因子的表达 ［13-15］ ，但其能否促进 IL⁃23 的表达尚不
胞的炎症反应。有研究发现，当人子宫肌层细胞受 清楚。因此，本研究利用Thy⁃1N大鼠模型和体外培
到白介素（interleukin，IL）⁃1β刺激时，其 KLF5 的表 养的大鼠 GMC，探讨 KLF5 上调对 sublytic C5b⁃9 刺