Page 32 - 南京医科大学自然版

第44卷第9期
·1204 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2024年9月

A
LV⁃shCTR
7
6
5
1×10 TU/mL 1×10 TU/mL 1×10 TU/mL
GFP

White light

B C
Heart Liver Spleen Lung Kidney Epi⁃fluorescence
3.5

×10 7
3.0

2.5
Glomeruli
Radiant efficiency
2
æ p/ sec /cm /sr ö
ç ÷
è μW/cm 2 ø
Color scale
Min=2.17e7
Max=3.74e7
A：Rat GMCs were infected with LV⁃shCTR at three different titers for 72 h，and the examination of GMCs under fluorescent microscopy showed
7
that 1×10 TU/mL had the best infection into GMCs，with an infection efficiency of over 90%（×100，scale bar=100 μm）. B：The normal saline（up⁃
per）and LV⁃shCTR（lower）were respectively perfused into rat renal tissues via the renal artery perfusion for 72 h，then imaging of five rat organs con⁃
firmed that the kidney fluorescence intensity of the rats perfused with LV⁃shCTR was significantly higher than that of rats perfused with normal saline. C：
Renal frozen section examination showed GFP fluorescence location in both glomeruli and renal tubules（×400）.
图6 LV⁃shCTR感染GMC和大鼠组织的效率
Figure 6 Efficiency of LV⁃shCTR infection in GMC and rat tissues

ATS，复制大鼠Thy⁃1N。当Thy⁃1N诱导后6 h时，取 作原理是，给大鼠注射含 Thy⁃1 抗体的 ATS，该抗体
各组大鼠的肾组织，提取蛋白质行 WB 检测。结果 能随血循环进入肾小球内，与 GMC 表面的 Thy⁃1 抗
发现，Thy⁃1N 组和 LV⁃shCTR+Thy⁃1N 组，其大鼠肾 原结合，形成免疫复合物，继而激活补体系统，产生
组织中的KLF5和IL⁃23的表达量显著高于NS组，但 C5b⁃9复合物并引起病变。本课题组前期研究已证

敲低 KLF5 表达的 LV⁃shKLF5+Thy⁃1N 组，其 KLF5 实，在Thy⁃1N大鼠发病的早期，不仅可测到GMC表
和 IL⁃23 的表达水平则明显低于 LV⁃shCTR+Thy⁃1N 面有sublytic C5b⁃9的形成以及某些促炎因子（如IL⁃
组（图7）。这一实验表明，敲低大鼠肾组织中KLF5 6、IL⁃17）的表达增多，而且体外用 sublytic C5b⁃9 刺
表达后，其肾内促炎因子 IL⁃23 的表达受到了明显 激大鼠GMC后还能上调促炎因子IL⁃6和IL⁃17的表
抑制，提示 Thy⁃1N 大鼠肾组织中过表达 KLF5 上调 达，其机制涉及转录因子（如 KLF4 或 C/EBPβ）的正
了IL⁃23的表达。 向调控 ［8，21］ 。提示，Thy⁃1N 大鼠早期肾组织的炎症
病变与 sublytic C5b⁃9 形成后诱导 GMC 上调某些转
3 讨 论
录因子和促炎因子的表达明显相关。
Thy⁃1N大鼠是研究人MsPGN的动物模型，其本 基于课题组前期研究及国内外相关文献的报
质上属于一种免疫性肾小球炎症 ［3-4］ 。该模型的制 道 ［22-23］ ，本研究先检测了Thy⁃1N大鼠发病早期的肾