Page 62 - 南京医科大学自然版

第45卷第12期
·1744 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2025年12月

A B （bp） M 3′⁃RACE C
（bp） M 1 2 3 4 5 6 （bp） M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
5000-
5000- 3000- 5000-
3000- 2000- 3000-
2000- 1500- 2000-
1500- 1500-
1000- 1000-
1000- 750- 750-
750- 500- 500-
500-
250- 250- 250-
100-
100- 100-
A：The uc004coz.1 was detected by agarose gel electrophoresis after PCR（the molecular weight of uc004coz.1 was 231 bp）. B：The results of the
second round PCR of 3′⁃RACE were determined by agarose gel electrophoresis. C：The PCR results of 3′⁃RACE clone were determined by agarose gel
electrophoresis. M：marker.
图7 琼脂糖凝胶电泳检测细胞中目的基因uc004coz.1表达以及3′⁃RACE结果
Figure 7 Expression of uc004coz.1 and results of 3′⁃RACE were detected by agar⁃gel electrophoresis

A B
（bp） M 3′⁃RACE （bp） M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
5000- 5000-
3000- 3000-
2000- 2000-
1500- 1500-
1000- 1000-
750- 750-
500- 500-
250- 250-
100-
100-

A：The results of the second round PCR of 5′⁃RACE were determined by agarose gel electrophoresis. B：PCR results of 5′⁃RACE clone were
determined by agarose gel electrophoresis. M：marker.
图8 琼脂糖凝胶电泳检测5′⁃RACE结果
Figure 8 Results of 5′⁃RACE detected by agarose gel electrophoresis

GAAGCAGATTTGGGTACCACCCAAGTATTGACTC⁃ 末端位置为16 417。
ACCCATCAACAACCGCTATGTATTTCGTACATTAC⁃
3 讨 论
TGCCAGCCACCATGAATATTGTACGGTACCATAA⁃
ATACTTGACCACCTGTAGTACATAAAAACCCAAT⁃ 随着人口老龄化的加剧，心血管疾病成为危害
CCACATCAAAACCCCCTCCCCATGCTTACAAGCAA⁃ 人类健康的主要疾病之一 ［13］ 。CAD 又称缺血性心
GTACAGCAATCAACCCTCAACTATCACACATCAA⁃ 脏病，是一种常见的心血管疾病。在过去的几十年
CTGCAACTCCAAAGCCACCCCTCACCCACTAGGA⁃ 里，CAD一直是世界范围内发病率和死亡率较高的
TACCAACAAACCTACCCACCCTTAACAGTACATA⁃ 疾病之一 ［14］ 。血管内皮功能障碍、炎症、高龄、男
GTACATAAAGCCATTTACCGTACATAGCACATTA⁃ 性、家族史、高血脂、高血压、吸烟、肥胖、痛风、缺乏
［15］
CAGTCAAATCCCTTCTCGTCCCCATGGATGACCCC⁃ 运动等因素是动脉粥样硬化发生的危险因素 。
CCTCAGATAGGGGTC⁃3′,在 16 093、16 172、16 304 lncRNA 是长度>200 个核苷酸且无蛋白质编码
位置上，数据库收录为T，实际测序结果为C。 功能的 RNA，比编码 RNA 保守性更低，在结构特征
2.9 RACE结果分析 和序列组成上与编码RNA 3′非翻译区（3′ untransla⁃
目的基因表达的结果证明uc004coz.1这对目的 tion regions，UTR）相似，具有时空特异性。lncRNA

基因丰度较高，对于 3′⁃RACE 及 5′⁃RACE，在 PCR 通常位于细胞核和细胞质中，在RNA聚合酶的作用
反应中均扩增到明显条带。数据库 RNA 序列和基 下，5′帽和3′poly A 尾经过转录后修饰，最终形成成
因组进行比对，得到对应的染色体为 Homo sapiens 熟分子。进一步研究发现，lncRNA 并不是没有生
［16-17］
mitochondrion，complete genome（ 序 列 编 号 ：NC_ 理活性的“遗传噪音” 。有研究发现并证实了
012920.1）。此染色体中 uc004coz.1 在数据库的位 lncRNA在mRNA转录调控中的作用 ［18］ 。lncRNA通
置为 15 998~16 569。5′⁃RACE 测序结果显示 5′末 常根据其相对于蛋白质编码基因的转录位点进行分

端位置为16 033。3′⁃RACE 测序结果显示3′⁃RACE 类，有增强子 lncRNA、启动子 lncRNA、反义 lncRNA