Page 89 - 南京医科大学自然版
P. 89
第45卷第12期 石 靓,奚佩雯,吴 靓,等. RBM7在乳腺癌细胞MDA⁃MB⁃231中的表达及其对AKAP12表达
2025年12月 的影响[J]. 南京医科大学学报(自然科学版),2025,45(12):1766-1774 ·1771 ·
(P < 0.05,图 3A~C);干 扰 RBM7 后 ,AKAP12 的 表达。
RNA 和蛋白表达水平明显升高,差异有统计学意 2.5 RBM7直接结合AKAP12的mRNA
义(P < 0.05,图 3D~F)。提示在人源性乳腺癌细胞 基于上述所描述的RBM7与AKAP12表达的相
MDA⁃MB⁃231 中 RBM7 可显著负调节 AKAP12 的 关性,本研究通过RIP实验明确RBM7与AKAP12表
A mRNA 1.5 * B MDA⁃MB⁃231 C protein 1.5 *
Relative expression of AKAP12 1.0 AKAP12 -191 kDa Relative expression of AKAP12 1.0
NC
RBM7
0.5
0.5
β⁃actin
-43 kDa
0 0
NC RBM7 NC RBM7
D * E F
6 4 mRNA * SCR Sh⁃1 Sh⁃2 6 4 protein * *
MDA⁃MB⁃231
Relative expression of AKAP12 2 AKAP12 -191 kDa Relative expression of AKAP12 2
β⁃actin
-43 kDa
0 0
SCR Sh⁃1 Sh⁃2 SCR Sh⁃1 Sh⁃2
A:The overexpression of RBM7 regulated RNA expression of AKAP12 in breast cancer cell MDA⁃MB⁃231 via qRT⁃PCR. B,C:The overexpresion
of RBM7 regulated protein expression of AKAP12 in breast cancer cell MDA⁃MB⁃231 via Western blot. D:The knockdown of RBM7 regulated RNA
expression of AKAP12 in breast cancer cell MDA⁃MB⁃231 via qRT⁃PCR. E,F:The knockdown of RBM7 regulated protein expression of AKAP12 in
*
breast cancer cell MDA⁃MB⁃231 via Western blot. P < 0.05(n=3).
图3 MDA⁃MB⁃231乳腺癌细胞中RBM7负调节AKAP12的表达
Figure 3 RBM7 negatively regulated the expression of AKAP12 in breast cancer cell MDA⁃MB⁃231
达的相关性。将RIP实验获得的RNA进行琼脂糖凝 A
MDA⁃MB⁃231
胶电泳实验,结果显示加RBM7抗体复合物的实验组 Input IgG RBM7
中有AKAP12的表达,而加IgG抗体复合物的对照组 AKAP12 -197 kDa
中无AKAP12的表达。作为阴性对照,RBM7不能与
β⁃actin结合(图4A)。同时将RIP实验获得的RNA进 β⁃actin -295 kDa
一步行qRT⁃PCR实验,结果显示在实验组、空白对照
B 400
组和阴性对照组之中,实验组(RBM7)AKAP12 的 *
RNA表达水平较阴性对照组(IgG)明显增高,差异有 300
统计学意义(P < 0.05,图4B)。这些研究结果表明在 Fold enrichment of AKAP12 200
人源性乳腺癌细胞MDA⁃MB⁃231中RBM7能直接结 100
合AKAP12的mRNA,从而调节AKAP12的表达。 0 IgG RBM7
2.6 RBM7调节乳腺癌组织中AKAP12的表达 MDA⁃MB⁃231
IHC 分析发现人乳腺癌组织中,RBM7 高表达 A:MDA⁃MB⁃231 cell lysates were collected and immunoprecipitat⁃
ed with RBM7 antibody or control IgG followed by RT⁃PCR to detect
组中的AKAP12表达相比RBM7低表达组中的表达
AKAP12 mRNA levels. B:MDA⁃MB⁃231 cell lysates were collected and
更低(图 5)。进一步分析乳腺癌组织中 RBM7 与 immunoprecipitated with RBM7 antibody or control IgG followed by qRT⁃
AKAP12的表达情况,以及临床病理资料的关系,发 PCR to detect AKAP12 mRNA levels. P < 0.05(n=3).
*
现AKAP12低表达的乳腺癌组织中RBM7高表达的 图4 RBM7结合AKAP12 mRNA调节AKAP12表达
Figure 4 RBM7 binded to AKAP12 mRNA to regulate
例数较多;AKAP12 高表达的乳腺癌组织中 RBM7
AKAP12 expression
低表达的例数较多,且差异有统计学意义(P < 0.05,
表 1)。其中,有 2 例(8.3%)临床病理数据缺失,已
3 讨 论
在分析中予以排除。所有这些都表明,在乳腺癌组
织中,RBM7显著负调节AKAP12的表达。 RBP 在真核转录组的转录后调控过程中起至

