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第45卷第12期        石   靓,奚佩雯,吴 靓,等. RBM7在乳腺癌细胞MDA⁃MB⁃231中的表达及其对AKAP12表达
                 2025年12月                的影响[J]. 南京医科大学学报(自然科学版),2025,45(12):1766-1774                  ·1771 ·


               (P < 0.05,图 3A~C);干 扰 RBM7 后 ,AKAP12 的             表达。
                RNA 和蛋白表达水平明显升高,差异有统计学意                           2.5  RBM7直接结合AKAP12的mRNA
                义(P < 0.05,图 3D~F)。提示在人源性乳腺癌细胞                        基于上述所描述的RBM7与AKAP12表达的相
                MDA⁃MB⁃231 中 RBM7 可显著负调节 AKAP12 的                 关性,本研究通过RIP实验明确RBM7与AKAP12表

                     A   mRNA  1.5  *              B          MDA⁃MB⁃231           C    protein  1.5  *
                       Relative expression  of AKAP12  1.0  AKAP12        -191 kDa    Relative expression  of AKAP12  1.0
                                                              NC
                                                                    RBM7

                                                                                         0.5
                          0.5
                                                      β⁃actin
                                                                          -43 kDa
                           0                                                              0
                                NC    RBM7                                                     NC    RBM7
                     D             *               E                               F
                          6 4 mRNA  *                       SCR  Sh⁃1  Sh⁃2              6 4 protein  *  *
                                                             MDA⁃MB⁃231
                       Relative expression  of AKAP12  2  AKAP12          -191 kDa    Relative expression  of AKAP12  2

                                                      β⁃actin
                                                                          -43 kDa
                          0                                                              0
                             SCR  Sh⁃1  Sh⁃2                                                SCR  Sh⁃1  Sh⁃2
                   A:The overexpression of RBM7 regulated RNA expression of AKAP12 in breast cancer cell MDA⁃MB⁃231 via qRT⁃PCR. B,C:The overexpresion
                of RBM7 regulated protein expression of AKAP12 in breast cancer cell MDA⁃MB⁃231 via Western blot. D:The knockdown of RBM7 regulated RNA
                expression of AKAP12 in breast cancer cell MDA⁃MB⁃231 via qRT⁃PCR. E,F:The knockdown of RBM7 regulated protein expression of AKAP12 in
                                                *
                breast cancer cell MDA⁃MB⁃231 via Western blot. P < 0.05(n=3).
                                       图3 MDA⁃MB⁃231乳腺癌细胞中RBM7负调节AKAP12的表达
                          Figure 3 RBM7 negatively regulated the expression of AKAP12 in breast cancer cell MDA⁃MB⁃231

                达的相关性。将RIP实验获得的RNA进行琼脂糖凝                                  A
                                                                                     MDA⁃MB⁃231
                胶电泳实验,结果显示加RBM7抗体复合物的实验组                                           Input  IgG  RBM7
                中有AKAP12的表达,而加IgG抗体复合物的对照组                                  AKAP12               -197 kDa
                中无AKAP12的表达。作为阴性对照,RBM7不能与
                β⁃actin结合(图4A)。同时将RIP实验获得的RNA进                               β⁃actin             -295 kDa
                一步行qRT⁃PCR实验,结果显示在实验组、空白对照
                                                                          B        400
                组和阴性对照组之中,实验组(RBM7)AKAP12 的                                                  *
                RNA表达水平较阴性对照组(IgG)明显增高,差异有                                         300
                统计学意义(P < 0.05,图4B)。这些研究结果表明在                                   Fold enrichment of  AKAP12  200
                人源性乳腺癌细胞MDA⁃MB⁃231中RBM7能直接结                                        100
                合AKAP12的mRNA,从而调节AKAP12的表达。                                         0    IgG   RBM7
                2.6  RBM7调节乳腺癌组织中AKAP12的表达                                               MDA⁃MB⁃231
                    IHC 分析发现人乳腺癌组织中,RBM7 高表达                         A:MDA⁃MB⁃231 cell lysates were collected and immunoprecipitat⁃
                                                                  ed with RBM7 antibody or control IgG followed by RT⁃PCR to detect
                组中的AKAP12表达相比RBM7低表达组中的表达
                                                                  AKAP12 mRNA levels. B:MDA⁃MB⁃231 cell lysates were collected and
                更低(图 5)。进一步分析乳腺癌组织中 RBM7 与                        immunoprecipitated with RBM7 antibody or control IgG followed by qRT⁃
                AKAP12的表达情况,以及临床病理资料的关系,发                         PCR to detect AKAP12 mRNA levels. P < 0.05(n=3).
                                                                                          *
                现AKAP12低表达的乳腺癌组织中RBM7高表达的                            图4 RBM7结合AKAP12 mRNA调节AKAP12表达
                                                                  Figure 4  RBM7 binded to AKAP12 mRNA to regulate
                例数较多;AKAP12 高表达的乳腺癌组织中 RBM7
                                                                           AKAP12 expression
                低表达的例数较多,且差异有统计学意义(P < 0.05,
                表 1)。其中,有 2 例(8.3%)临床病理数据缺失,已
                                                                  3 讨 论
                在分析中予以排除。所有这些都表明,在乳腺癌组
                织中,RBM7显著负调节AKAP12的表达。                                RBP 在真核转录组的转录后调控过程中起至
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