Page 70 - 南京医科大学自然版

第45卷第4期
·506 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2025年4月

Relative ATX expression 1.0 Concentration of LPA （μmol/mL）
A B 2.0 C 3 Control ***
AREG 1.5 *** AREG
Control 6 h 12 h 24 h 48 h 2 ** * **
ATX 98 kDa 0.5 1

GAPDH 36 kDa 0 Control 6 h 12 h 24 h 48 h 0 0 6 12 18 24 30 36 42 48
AREG Time（h）
D E 2.0 ** F 4 *** **

Control LPA expression 1.5 3
LPAR3 40 kDa Relative 1.0 Concentration of LPA （μmol/L） 2
LPAR3 0 0
GAPDH 36 kDa 0.5 1
Control LPA Control AREG AREG+
PF⁃8380
G H I
AREG+
2.0 *** ** 2.5 *** **
Control AREG PF⁃8380 2.0
Relative ATX expression 1.0 Relative LPAR3 expression
ATX 98 kDa 1.5 1.5
LPAR3 40 kDa 0.5 1.0
0.5
GAPDH 36 kDa 0 0
Control AREG AREG+ Control AREG AREG+
PF⁃8380 PF⁃8380
A，B：Fibroblasts were treated with or without AREG（100 ng/mL）for 6，12，24，and 48 h，protein levels of ATX at different time points were detected
by Western blot. C：LPA levels in the supernatant of fibroblasts were detected by ELISA. D，E：The expression of LPAR3 in fibroblasts after treating
with LPA was detected by Western blot. F：Expression levels of LPA of fibroblasts were quantified by ELISA. G-I：AREG in the presence or absence of
PF⁃8380（ATX inhibitor，1 μmol/L）for 48 h（G），protein levels of ATX（H），and LPAR3（I）in fibroblasts were measured by Western blot. P < 0.05，
*
** ***
P < 0.01，and P < 0.001（n=3）.
图6 AREG促进人肠成纤维细胞分泌LPA
Figure 6 AREG promoted the secretion of LPA by human intestinal fibroblasts

活化生成的肌成纤维细胞是 ECM 的主要来源 ［21］ 。 达，但 LPAR1、LPAR2 和 LPAR3 的表达未见明显差
在CD中，持续存在或反复发生的慢性炎症导致各类 异。此外，利用 CD 患者肠道手术标本再次证实了
调节介质的产生增加，使肠道内的上皮细胞、成纤维 LPAR3在合并肠纤维化的CD患者的狭窄部位高表
细胞或内皮细胞转化为肠肌成纤维细胞 ［22］ 。本课题 达。同时与未合并肠狭窄的 CD 患者相比，合并肠
组先前研究发现 Th17 细胞来源的 AREG 促进人肠 狭窄的CD患者血浆中LPA水平显著升高。
道成纤维细胞增殖、活化、迁移和ECM的产生 ［11］ ，但 LPAR3 是 LPA 的特异性受体之一，LPA 是一种
具体机制尚未明确。 由血小板、脂肪细胞和成纤维细胞分泌的生物活性
［6］
AREG是表皮生长因子家族的主要配体之一 ， 甘油磷脂，它能与细胞膜上的LAPR3等特异性受体
成纤维细胞、T细胞、内皮细胞和巨噬细胞等多种细 结合，以调节细胞功能 ［24］ ，包括促进细胞增殖、抑制
［7-8］ ［25］
胞均可分泌AREG 。AREG参与细胞增殖、凋亡、 细胞凋亡和增强细胞迁移等 。既往研究发现在
分化等多种病理生理过程，组织修复、炎症和免疫 炎症性肠病中，LPA调节肠道炎症及免疫反应，LPA
［23］
中起着重要作用 。为探究其调节CD相关肠纤维化 通过诱导单核细胞转化为巨噬细胞并促进M1表型
的潜在机制，本研究以AREG刺激人肠成纤维细胞后 来调节固有免疫 ［26］ 。此外LPA具有趋化效应，诱导
收集处理组及对照组细胞进行了转录组测序，分析 淋巴细胞迁移 ［27］ 。LPA参与了多种器官纤维化疾病

相关数据后在两组的差异表达基因中发现 LPAR3 的发生及发展。例如，LPA 促进特发性肺纤维化的
在 AREG 处理组中表达增高。此后通过 qRT⁃PCR 纤维化形成，并且 LPAR1/3 的阻断可以改善特发性
进一步检测了 LPAR3 及其余纤维化中研究较为广 纤维化，是其潜在的治疗靶点 ［18］ 。此外，LPA还调节
泛的LPA受体在AREG处理组及对照组中的表达水 肝脏脂肪细胞功能和肝脏纤维化的发生及发展 ［28］ ，
平，发现AREG上调了人肠成纤维细胞中LPAR3的表 以及肾小管间质纤维化 ［20］ 。但关于其在肠道纤维