Page 66 - 南京医科大学自然版

第45卷第4期
·502 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2025年4月

表达水平更高（图 2H）。随后通过 ELISA 法测定了 后，通过多重免疫荧光评估了LPAR3以及介导LPA
合并或不合并肠狭窄的 CD 患者血浆中 LPA 水平， 生成的关键酶自分泌运动因子（autotaxin，ATX）在
LPA 是一种由血小板、脂肪细胞和成纤维细胞分泌 CD 患者狭窄部位、非狭窄部位的分布情况，发现
的生物活性甘油磷脂，它能与细胞膜上的 LPAR3 在狭窄部位中，与α⁃SMA 相邻的 LAPR3 及 ATX 增
等特异性受体结合，以调节细胞功能，在许多器官 加（图 2J）。在这些结果表明，LPA 及其特异性受
纤维化疾病中起到重要作用，发现合并肠狭窄的 体 LPAR3 可能参与了 CD 相关肠纤维化的发生和
CD 患者其血浆中 LPA 水平显著升高（图 2I）。最 发展。

A Non⁃fibrosis Fibrosis B 2.5 **
2.0
Fibrosis score 1.5

1.0
0.5
0
72 μm 72 μm
Non⁃fibrosis Fibrosis
C 6 *** D 8 ** E 5 4 ***

Col1a1 relative expression 4 2 Col6a1 relative expression 6 4 2 Col6a3 relative expression 3 2

0 0 1 0
Non⁃fibrosis Fibrosis Non⁃fibrosis Fibrosis Non⁃fibrosis Fibrosis
F G H
2.0 ** 2.5 **
Non⁃fibrosis Fibrosis 2.0
Relative α⁃SMA expression 1.0 Relative
α⁃SMA 42 kDa 1.5 expression 1.5
LPAR3 40 kDa 0.5 1.0
GAPDH 36 kDa LPAR3 0.5
0 0
Non⁃fibrosis Fibrosis Non⁃fibrosis Fibrosis
J Non⁃fibrosis Fibrosis
I 5 **

Concentration of LPA （μmol/mL） 4 3 2 1 ATX/DAPI 100 μm 100 μm

0
Non⁃fibrosis Fibrosis α⁃SMA/LPAR3

20 μm
20 μm
A，B：Masson staining was performed on the colon tissues and the score of fibrosis index were evaluated（n=10，scale bar=20 μm）. C-E：Levels of
Col1a1（C），Col6a1（D），and Col6a3（E）in colonic tissues were measured by qRT⁃PCR（n=10）. F-H：Expression levels of α⁃SMA and LPAR3 were
detected by Western blot（n=3）. I：LPA levels in the plasma were detected by ELISA（n=10）. J：Expression levels of α⁃SMA，LPAR3，and ATX in
tissues were stained with immunofluorescence（α⁃SMA：green；LPAR3：red；ATX：yellow；DAPI：blue；scale bar=100 μm，20 μm，n=3）. The arrow
**
indicated that simultaneous expression of LPAR3 and ATX in fibroblasts. P < 0.01 and *** P < 0.001.
图2 CD合并肠纤维化患者体内LPA及LPAR3表达增加
Figure 2 An elevated levels of LPA and LPAR3 in CD patients with intestinal fibrosis

2.3 LPA通过LPAR3促进肠成纤维细胞迁移、增殖 中胶原蛋白等物质的过度沉积是肠道纤维化发生
及活化 发展的关键因素，因此，在体外细胞实验中进一步
人肠成纤维细胞的增殖和活化及细胞外基质 探究了 LPA 及 LPAR3 对人肠成纤维细胞的直接作