Page 42 - 南京医科大学自然版

第45卷第6期
·780 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2025年6月

织中 FBXO6 的表达情况，结果表明，患者肿瘤组织 48.31%；数据缺失的患者 83 例，占 25.54%。之后，
中FBXO6高表达，且随着胶质瘤分级的增加逐渐上 选用 U251、U373 和 U87 3 种胶质瘤细 胞 系 检 查
升（图 1A），并与患者的不良预后密切相关（图 FBXO6 的表达情况，实验结果显示，这 3 种细胞系
1B）。该数据库筛选了 2004—2016 年来自中国北 均表达 FBXO6 的 mRNA（图 1C、D）和蛋白（图 1E、
京、苏州等地多家医院的胶质瘤患者组织，包括首 F），以U87细胞最为显著，故后续拟选用U87细胞开
都医科大学附属北京天坛医院、苏州大学附属第二 展相应体外实验。
医院等。该数据库患者的纳入标准如下：①经过独 2.2 过表达FBXO6基因促进胶质瘤细胞增殖和侵袭
立委员会认证的神经病理学家进行中央病理学审 为了检查 FBXO6 基因表达对胶质瘤细胞增殖
查，确诊为胶质瘤，且依据2007年WHO分类标准进 和侵袭的作用，以 pIRES2⁃EGFP 质粒为载体，构建
行分级；②收集了年龄、性别、诊断、WHO分级、放化 了FBXO6过表达质粒（pIRES2⁃FBXO6）。将pIRES2⁃
疗及癫痫治疗状况等临床信息；③签署了书面知情 EGFP 和 pIRES2⁃FBXO6 转染至 U87 细胞，48 h 后检

同意书；④样本的RNA 完整性数值（RNA integrity 测 U87 细胞中 FBXO6 基因的表达水平。发现与
number，RIN）≥6.8。排除标准为：样本的 RIN 值< pIRES2⁃EGFP 转染组相比，pIRES2⁃FBXO6 转染组
6.8、临床信息不完整以及无法获取书面知情同意 FBXO6的mRNA（图2A、B）和蛋白（图2C、D）水平显

书。在符合标准被纳入的患者中，年龄从<18岁到≥ 著 增 加 。 此 外 ，与 pIRES2 ⁃ EGFP 转 染 组 相 比 ，
70 岁 不 等 ，其 中 40~49 岁 的 患 者 人 数 最 多 ，占 pIRES2⁃FBXO6 转染组细胞的增殖（图 2E）和侵袭
33.69%。从性别分布来看，男203例，占 62.46%；女 （图2F、G）明显增强。
122 例，占 37.54%。在肿瘤分级方面，涵盖了Ⅱ级、 2.3 沉默FBXO6基因抑制胶质瘤细胞增殖和侵袭
Ⅲ级和Ⅳ级，其中Ⅳ级患者人数最多，占 44.31%。 设计并合成针对FBXO6基因不同靶点的siRNA
另外，在这 325 例患者中，接受抗癫痫治疗的患 （siFBXO6⁃1、siFBXO6⁃2、siFBXO6⁃3）和对照 siRNA
者 85 例，占 26.15%；未接受治疗的患者 157 例，占 （siNC），将 siNC、siFBXO6⁃1、siFBXO6⁃2、siFBXO6⁃3

A B
P=0.000 75 High FBXO6 expression（n=111）
Low FBXO6 expression（n=111）
Gene expression of FBXO6 2 1 Survival probability 0.75
1.00
3

0.50

0 0.25 P < 0.000 1
WHO Ⅱ WHO Ⅲ WHO Ⅳ 0
（n=107） （n=79） （n=139） 0 1 000 2 000 3 000 4 000 5 000
Grade Time（d）
C D E F
U251 U373 U87 6 U251 U373 U87 8
** **
FBXO6 487 bp FBXO6 33 kDa
FBXO6 4 6
GAPDH 203 bp mRNA levels β⁃actin 42 kDa Relative FBXO6 protein levels 4 *
Relative 2 * 2

0 0
U251 U373 U87 U251 U373 U87
A：The expression of FBXO6 in the cancer tissues of glioma patients at WHO Ⅱ，Ⅲ and Ⅳ levels was shown by the GCCA database. B：The GCCA
database demonstrated the correlation between the expression of FBXO6 and the prognosis of glioma patients. C，D：The mRNA levels of FBXO6 in
three glioma cell lines were examined by RT⁃PCR（C：electrophoretic bands of RT⁃PCR；D：statistical chart）. E，F：The protein levels of FBXO6 in three
*
glioma cell lines were checked by Western blot（E：electrophoretic bands of Western blot；F：statistical chart）. Compared with the U251 group，P <
**
0.05，P < 0.01（n=3）.
图1 胶质瘤组织和细胞系中FBXO6的表达情况
Figure 1 FBXO6 expression in glioma tissues and cell lines