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第45卷第6期
               ·778 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2025年6月


              proliferation，and invasion. Results：FBXO6 is highly expressed in glioma tissue，and its expression level is positively correlated with
              the degree of malignancy. It is also closely associated with the poor prognosis of patients. All three glioma cell lines，namely U251，
              U373，and U87，expressed FBXO6，with U87 cells showing the most significant expression. The proliferation and invasion of U87 cells
              were significantly enhanced after FBXO6 overexpression，while these were significantly weakened after FBXO6 silencing. The Akt1
              inhibitor could significantly down⁃regulate the expression of FBXO6 in U87 cells，whereas the ERK1/2 and JNK inhibitors had no
              significant effect on FBXO6 expression. The Akt1 inhibitor could significantly reduce the proliferation and invasion of U87 cells，and
              FBXO6 overexpression could antagonize the above effects. Conclusion：Activation of Akt1 in glioma cells up⁃regulates the expression
              of the FBXO6 gene，promoting cell proliferation and invasion.
             ［Key words］ glioma；FBXO6；Akt1；proliferation；invasion
                                                                            ［J Nanjing Med Univ，2025，45（06）：777⁃785］




                  胶质瘤指起源于神经胶质细胞的肿瘤，是中枢                          如卵巢癌细胞中Akt1活化增强，可以诱导上皮⁃间质
              神经系统中最常见的原发性肿瘤，占原发性脑肿瘤                            转化（epithelial⁃mesenchymal transition，EMT）相关蛋
                    ［1］
              的60% ，占恶性脑肿瘤的70% 。根据其病理类型                         白的表达，增强细胞的增殖和侵袭 。JNK在肿瘤的
                                         ［2］
                                                                                              ［12］
              和恶性程度，胶质瘤可分为Ⅰ~Ⅳ级，其中Ⅳ级的恶                           发展中也起到重要作用，JNK活化后可以诱导基质金
              性程度最高。胶质瘤具有显著的增殖和侵袭生长                             属蛋白酶 15（matrix metallopeptidase 15，MMP15）的
              能力，通常呈浸润性生长，常侵犯几个脑叶，并侵犯深                          表达，增加宫颈癌细胞的增殖和侵袭能力                   ［13］ 。在胰
                                                  ［3］
              部结构，还可经胼胝体波及对侧大脑半球 。临床上                           腺导管腺癌中层黏连蛋白 γ2 链（laminin subunit
              治疗胶质瘤的方法主要包括手术、放疗、化疗、肿瘤                           gamma⁃2，LAMC2）高表达能够激活 ERK1/2 的磷酸
                                     ［4］
              电场治疗及其他综合治疗 。然而，由于其恶性程                            化，促进肿瘤的发生和转移            ［14］ 。但有关Akt1、JNK和
              度高，且易转移复发，胶质瘤患者的预后普遍较                             ERK1/2活化是否能够上调胶质瘤细胞中FBXO6的
              差。因此，迫切需要找到有效的分子靶点，实现延                            表达进而影响胶质瘤细胞的增殖和侵袭，目前尚不
              长患者生存期以及改善预后的目标。                                  可知。本研究拟开展相关实验检测胶质瘤癌组织
                  F⁃box蛋白（F⁃box protein，FBXO）是一类广泛存             及胶质瘤细胞系中 FBXO6 的表达情况及其对胶质
              在于真核生物中含有F⁃box结构域的蛋白家族。目                          瘤细胞增殖和侵袭的调控作用，并分别使用 Akt1、
              前已发现有 70 个左右家族成员，分为 FBXL、FBXO                     JNK和ERK1/2的抑制剂处理细胞，观察其对FBXO6
              和 FBXW 3 个亚家族，可调控细胞周期、增殖及凋                        的调控作用，筛选激活FBXO6的上游调控通路。
              亡，在肿瘤的发生发展中起重要作用 。FBXO6 是
                                               ［5］
                                                                1  材料和方法
                                                         ［6］
              FBXO亚家族的一个成员，在多种细胞中广泛表达 。
              研究发现，FBXO6 可以促进肿瘤细胞的增殖和侵                          1.1  材料
              袭。如 FBXO6 通过其 FBA 结构域识别并靶向核糖                           总 ERK1/2（t ⁃ ERK1/2）、磷 酸 化 ERK1/2（p ⁃
              核酸酶 T2（ribonuclease T2，RNASET2）蛋白，促进蛋             ERK1/2）、总 JNK（t⁃JNK）、磷酸化 JNK（p⁃JNK）、总
              白酶体依赖性破坏，进而调节卵巢癌细胞增殖、侵                            Akt1（t⁃Akt1）、磷酸化 Akt1（p⁃Akt1，Ser473）抗体
                      ［7］
              袭和迁移 。在胃癌细胞中 FBXO6 高表达可以调                        （Cell Signaling Technology 公司，美国）。FBXO6 抗
              控细胞周期，促进胃癌细胞的增殖反应 。但是，                            体、β⁃actin 抗体以及 HRP 标记抗兔和抗小鼠二抗
                                                  ［8］
              FBXO6 在胶质瘤中是否表达及其对胶质瘤细胞增                         （ABclonal 公司，美国）。CCK⁃8 试剂盒、Perifosine
              殖和侵袭的作用尚不可知。                                     （Akt1抑制剂）、U0126（ERK1/2抑制剂）和SP600125
                  信号分子活化是真核细胞的重要调控方式，可                         （JNK 抑制剂）（MCE 公司，美国）。人胶质瘤细胞系
              广泛参与细胞的多种生物学行为。其中，丝氨酸/苏                          （U251、U373 和 U87）购自上海细胞库。胎牛血清
              氨酸蛋白激酶（Akt serine/threonine kinase 1，Akt1）、      （fetal bovine serum，FBS）（Wisent 公 司 ，美 国 ）。
              c⁃Jun 氨基末端激酶（c⁃Jun N⁃terminal kinases，JNK）        DMEM 培养基（Gibco 公司，美国）。Transwell 小室

              和细胞外信号调节激酶1/2（extracellular signal⁃regu⁃         （Corning 公司，美国），Lipofectamine 2000（Thermo
              lated kinases 1/2，ERK1/2）的活化都可以通过上调一              Fisher Scientific 公司，美国）。2×Taq Plus Master
              些靶基因的表达来促进肿瘤细胞的增殖和侵袭                     ［9-11］ 。  Mix、HiScript Ⅱ Q Select RT SuperMix for qPCR（南
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