Page 70 - 南京医科大学自然版

第45卷第8期
·1126 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2025年8月

2.2 Tyro3的缺失加重LPS诱导的小鼠脓毒症表现 别腹腔注射生理盐水或 LPS（10 mg/kg），持续观察
为探究 Tyro3 在 LPS 诱导的小鼠脓毒症中的作 96 h。每隔 12 h 记录 1 次小鼠的生存情况，并在注
用，本研究采用 Tyro3 基因敲除小鼠（Tyro3 ）进行 射后 6 h 和 12 h 进行临床评分，以评估小鼠的活力
-/-
实验。如图 2A 所示，Tyro3 小鼠肝脏组织中未见 状态。实验结果显示，LPS造模后，小鼠的活力和生
-/-
Tyro3 蛋白的表达，证实小鼠的肝脏 Tyro3 被成功敲 存率均显著降低，其中Tyro3 小鼠的下降趋势更为
-/-
除。实验选用 8 周龄雄性 Tyro3 和 Tyro3 小鼠，分 明显（图2B、C）。
+/+
-/-
A 200 *** B C 1.5 ***
mRNA levels 150 Ctrl LPS 1.0

Relative Tyro3 100 GAPDH - 97 kDa Tyro3/GAPDH 0.5
Tyro3
- 37 kDa
50
0
Control Sepsis 0 Ctrl LPS

A：Comparative transcriptomic profiling of Tyro3 expression in whole blood samples from survivors of sepsis and matched healthy controls using the
GSE54514 GEO database（Control：n=18；Sepsis：n=26）. B，C：Western blot analysis was performed to determine the expression levels of Tyro3 in liver
+/+
tissues of Tyro3 mice following intraperitoneal injection with either normal saline（Ctrl）or LPS（10 mg/kg）. Representative immunoblot image（B）and
densitometric quantification（C）are shown. *** P < 0.001（n=6）.
图1 Tyro3在脓毒血症患者外周血及LPS诱导的脓毒血症小鼠肝脏中表达降低
Figure 1 The expression levels of Tyro3 were downregulated in peripheral blood of sepsis patients and in the liver of
LPS⁃induced septic mice

A B C 10 Tyro3 +/+
Tyro3 -/-
Tyro3 +/+
100 8 * **
（%） 80 Tyro3 -/-
Tyro3 +/+ Tyro3 -/- 60 Clinical score 6
Tyro3 -97 kDa Survival rate 40 4
GAPDH -37 kDa 20 *
0 2
24 48 72 96
Time（h） 0
0 h 6 h 12 h
LPS
-/-
Tyro3 +/+ and Tyro3 mice were intraperitoneally injected with either saline or LPS（10 mg/kg）for 96 h. A：Identification of Tyro3 knockout mice.
-/-
-/-
B：The survival rates of Tyro3 +/+ and Tyro3 mice within 96 h post⁃LPS challenge. C：The clinical scores of Tyro3 +/+ and Tyro3 mice at 0，6，and 12 h
* **
post⁃LPS challenge. P < 0.05，P < 0.01（n=8）.
图2 Tyro3的缺失加重LPS诱导的小鼠脓毒症表现
Figure 2 Tyro3 deficiency exacerbated the manifestations of LPS⁃induced sepsis in mice
2.3 Tyro3的缺失加重LPS诱导的小鼠全身性炎症 同时采集小鼠抗凝全血，离心分离血浆，采用ELISA
将8周龄雄性Tyro3 和Tyro3 小鼠随机分为两 法检测血浆中炎症因子 IL⁃6 和 TNF⁃α的水平，结果
+/+
-/-
组，分别腹腔注射生理盐水或LPS（10 mg/kg）。注射 显示，LPS 处理后，两组小鼠的 IL⁃6 和 TNF⁃α水平
12 h 后，提取小鼠肝脏组织 RNA，通过 RT⁃qPCR 检 均显著升高，且 Tyro3 小鼠的升高幅度明显大于
-/-
测炎症因子IL⁃6、TNF⁃α和IL⁃1β的mRNA 相对表达 Tyro3 小鼠，这与RT⁃qPCR检测结果一致（图3D、E）。
+/+
水平，并用管家基因GAPDH进行归一化处理。结果 2.4 Tyro3的缺失加重LPS诱导的小鼠急性肝损伤
显示，LPS处理后，Tyro3 和Tyro3 小鼠肝脏中IL⁃6、 将8周龄雄性Tyro3 和Tyro3 小鼠随机分为两
+/+
-/-
+/+
-/-
TNF⁃α和IL⁃1β的mRNA水平均显著增加；且Tyro3 -/- 组，分别腹腔注射生理盐水或LPS（10 mg/kg）。12 h
小鼠的增加幅度显著大于 Tyro3 小鼠（图 3A~C）， 后处死小鼠，收取肝脏织，立即用4%多聚甲醛固定
+/+
说明 Tyro3 的缺失可以加重 LPS 诱导的肝脏炎症。 24 h，随后进行石蜡包埋并制备切片。HE染色结果