Page 154 - 《南京医科大学学报（自然科学版）》2025年第9期
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第45卷第9期
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              细胞免疫反应。研究 采 用 杆 状 病 毒 系 统 构 建                     病毒感染小鼠后均未检测到病毒滴度，研究认为，Pre
              hMPV F 和流感病毒Matrix 1的VLP能够诱导小鼠特                   F的混合物与Post F相比未表现出明显优势 。
                                                                                                     ［36］
              异性体液和细胞免疫反应，具有一定保护作用 。另                                多数研究中的F为Pre和Post的混合物，为获得
                                                      ［35］
              有研究将人免疫缺陷病毒（human immunodeficiency                完全的 hMPV Post F 三聚体，55 ℃加热 F，使所有蛋
              virus，HIV）的 Gag 蛋白与 hMPV F 融合构建 VLP，在             白转化为Post。热处理蛋白免疫小鼠产生的血清能
              小鼠中，与 hMPV F 相比，hMPV⁃F⁃Gag VLP 的免疫                够有效中和毒株，而且增强免疫后产生了稳定的
              原性更强，中和抗体水平更高。基于 VLP 技术的                          IgG1 和 IgG2a/2b 水平，平衡的 Th1/Th2 免疫应答。
              hMPV 疫苗在动物模型研究中取得了一定进展，为                          竞争分析显示，抗体靶向 hMPV F 的 Site Ⅲ和Ⅳ              ［37］ 。
              疫苗的研发提供了新思路。                                      研究发现了 hMPV F 的新特征，这可能为疫苗的研
                  hMPV F 的大多数抗原位点同时存在于 Pre 和                    发提供新的重要信息。
              Post，稳定的 Post F 也是可行的抗原。Pilaev 等         ［36］ 构   4.3  hMPV重组载体疫苗
              建多个 hMPV Pre F 和 Post F 突变体（表 3），比较两                   重组载体疫苗是将编码病原体有效免疫原的
              种构象作为候选苗抗原的潜力。在小鼠模型中，铝                            基因插入载体基因组中，载体进入宿主细胞后，表

              佐 剂 组 只 有 T160N、A185P、A125C/I260C 和 454 ⁃         达大量抗原，诱导特异性T细胞反应，增强人体对疾
              HQWH⁃457诱导产生了中和抗体，且水平接近，使用                        病的免疫力。重组载体疫苗的研发对生物安全要

                                                      表3 构建的突变体
                                                Table 3 The mutations constructed

                    Mutant             Mutation strategy                        Conformation
                T160N                   Cavity filling                        Post conformation
                A161N                   Cavity filling       Likely in the Post state or a mixture of Pre and Post conformations
                A185P                 Potential stabilizing  Likely in the Post state or a mixture of Pre and Post conformations
                A125C/I260C      Incorporation of disulfide bridges  Predominant Pre and less⁃abundant Post conformations
                T127C/I260C      Incorporation of disulfide bridges  Likely in the predominant Pre conformation

                454⁃HQWH⁃457      Reduction of negative charges  Predominant Pre and less⁃abundant Post conformations

              求很高，通常选择非致病性或低致病性的病毒或细                            显著保护作用，小鼠肺组织病理变化轻，病毒滴度
              菌作为载体。hMPV 载体疫苗研究中涉及 PIV 和流                       低。综上，rFLU⁃hMPV/F⁃NS 是一种很有前景的
              感病毒等载体。                                           hMPV候选疫苗 。
                                                                              ［39］
                  Chan等  ［38］ 首先以hMPV A2型CAN97⁃83 F为抗           4.4  hMPV嵌合疫苗
              原骨架，进行密码子优化和引入提高Pre F稳定性的                              hMPV和RSV的主要抗原均为F，而且共享部分
              突变，然后，插入 F 和 HN 基因替换 hPIV3 相应基因                   抗原位点，有些抗体已鉴定具有交叉中和能力。将
              的 Bovine PIV3 载体，共获得 8 个重组子（表 4）。动                RSV F 的主要保护性位点移至 hMPV F 可产生携带
              物实验结果表明，重组子与野生型 hMPV 免疫仓鼠                         两种病毒抗原位点的嵌合蛋白，同时诱导针对两种
              的中和抗体水平差异无统计学意义；攻毒实验中，                            病毒的免疫反应。McLellan 等         ［40］ 设计了多个RSV F
              重组子免疫动物的鼻甲中未检测到感染性 hMPV，                          取代 hMPV F site φ的蛋白，经亲和力和表达水平比
              但对肺部感染，突变体 3、6 和 7 无明显保护作用，                       较，筛选获得Chimera 1嵌合蛋白。然后优化Chime⁃
              其余突变体引发的保护作用明显。减毒且安全的                             ra 1 的氨基酸，构建 RSV F 和 hMPV F 间盐桥，提高
              B/hPIV3⁃hMPV F 系列载体疫苗有可能成为潜在的                     表达水平，并保持 Pre 表位的完整性。其次，参考
              候选疫苗 。                                            hMPV 重组蛋白抗原设计原则优化突变方案（表
                      ［38］
                  有研究以流感病毒为载体，将 hMPV F 基因插                      5），进一步提高蛋白表达水平和热稳定性。获得
              入NS1基因，构建重组子rFLU⁃hMPV/F⁃NS。动物实                    的 DS⁃CavEsP 与 D25（RSV Pre F 特异性抗体）的亲
              验中，初次免疫和加强免疫 rFLU⁃hMPV/F⁃NS 均可                    和力和 RSV Pre F PRDM 相当，与 MPE8（hMPV/RSV
              诱导高水平抗体和细胞因子。rFLU⁃hMPV/F⁃NS 有                     交叉反应抗体）的亲和力和 DS⁃CavEs2 相当，与
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