Page 62 - 《南京医科大学学报》自然科学版2026年第2期
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第46卷第2期
·218 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2026年2月
确性较高，据此计算的细胞平均荧光强度更具参考 initial draft of the article；GUAN Qiangdong participated in
价值。值得注意的是，即使是单克隆细胞株，不同株 experimental operations；DING Jingjing was responsible for data
系的转染效率与表达水平仍可能存在较大差异 ［27-28］ ， analysis and literature review；XIONG Jianping participated in
因此从中筛选最优株系十分必要。本方法在细胞 experimental design；WANG Li participated in experimental
operations；WU Wei was responsible for experimental design，
第 1 次消化并重新铺板后，软件基于相对准确的细
fund support and reviewing/revising the article.
胞数计算得到细胞平均荧光强度，用户进行择优筛
选，有效剔除了弱荧光细胞株，大幅提高了筛选效 ［参考文献］
率与可靠性。 ［1］ BAILEY C G，TAIT A S，SUNSTROM N A. High⁃through⁃
相比传统荧光显微镜，微孔板成像系统在筛选 put clonal selection of recombinant CHO cells using a
高表达荧光蛋白单克隆细胞株方面具有显著优势： dominant selectable and amplifiable metallothionein⁃GFP
①整板一次性成像，自动化完成整板96孔的图像采 fusion protein［J］. Biotechnol Bioeng，2002，80（6）：670-
集；②图像查看便捷，点击任意孔即可查看全孔明 676
场、荧光成像，避免错漏；③数据分析能力强，软件 ［2］ HUNT L，JORDAN M，DE JESUS M，et al. GFP⁃express⁃
ing mammalian cells for fast，sensitive，noninvasive cell
可自动分析每孔的细胞数量与平均荧光强度，灵敏
growth assessment in a kinetic mode［J］. Biotechnol Bioeng，
度高、重复性好，远胜于人眼观察。
1999，65（2）：201-205
综上所述，本研究成功建立了一套基于微孔板
［3］ 胡换仪，汪建中，刘昌锦，等. 绿色荧光蛋白的真核表达
成像系统筛选稳定转染后高表达荧光蛋白单克隆 及其单克隆抗体制备［J］. 中国畜牧兽医，2022，49（1）：
细胞株的方法。与专用于克隆观察的仪器相比，微 328-337
孔板成像系统在高校中更为普及，因而具备更高的 HU H Y，WANG J Z，LIU C J，et al. Eukaryotic expres⁃
实用性与推广价值。该方法充分结合成像与数据 sion of green fluorescent protein and preparation of its
分析功能，每一步操作目标明确、流程简洁，在显著 monoclonal antibody［J］. China Animal Husbandry &
节省人力的同时，确保最终筛选获得的细胞符合单 Veterinary Medicine，2022，49（1）：328-337
细胞来源、高荧光强度及正常增殖能力等多重要 ［4］ 穆业腾，郭 冲，胡楠楠，等. 免疫检查点TIGIT慢病毒
求。由于稳定转染后筛选的单克隆细胞株具有更 表达载体的构建和稳定表达 TIGIT 细胞系的建立［J］.
持久、更稳定的表达特性，本研究方法在相关科研 吉林大学学报（医学版），2022，48（5）：1341-1347
工作中具有广泛的应用前景。 MU Y T，GUO C，HU N N，et al. Construction of immune
checkpoint TIGIT lentivirus expression vector and estab⁃
致谢：
lishment of cell line stably expressing TIGIT［J］. Journal
感谢TECAN公司酶标应用工程师程立和南京科麟得科
of Jilin University（Medicine Edition），2022，48（5）：
学仪器有限公司技术支持李娟对本研究的技术指导。
1341-1347
Acknowledgements：
［5］ 鞠 境，冯娇娇，李 仲. 稳定表达小鼠 PNPLA7 的
We thank CHENG Li，Application Scientist at Tecan_China，
Huh7细胞系的构建［J］. 南京医科大学学报（自然科学
and LI Juan，Technical Support Specialist at Nanjing Cleande
版），2016，36（7）：863-867
Scientific Instrument Co.，Ltd.，for their valuable technical
JU J，Feng J J，LI Z. Establishment of Huh7 cell line stably
guidance throughout this study.
利益冲突声明： expressing murine PNPLA7 protein［J］. Journal of Nan⁃
全体作者声明没有利益冲突 jing Medical University（Natural Sciences），2016，36
Conflict of Interests： （7）：863-867
［6］ 李玲霞，张旭辉，令小东，等. 稳定表达小反刍兽疫病毒
The authors declare no conflict of interests.
作者贡献声明： N蛋白的THP⁃1细胞系的建立与应用［J］. 中国兽医科
沈链链负责实验设计、实验操作、提供基金支持、撰写初 学，2025，55（4）：456-462
稿；管强东参与实验操作；丁竞竞负责数据分析、查阅文献； LI L X，ZHANG X H，LING X D，et al. Establishment and
熊建平参与实验设计；王丽参与实验操作；吴炜负责实验设 application of THP ⁃ 1 cell line with stable expression N
计、提供基金支持、审阅、修订论文。 protein of peste des petits ruminants virus［J］. Chinese
Author’’s Contributions：： Veterinary Science，2025，55（4）：456-462
SHEN Lianlian was responsible for experimental design， ［7］ 李欣悦，金 月，蔡 秀. 重组人淋巴细胞激活基因 3
experimental operations and fund support，as well as writing the 慢病毒载体的构建及其在小鼠成纤维细胞中的稳定表
