Page 13 - 南京医科大学自然科学版第1期

第41卷第1期 张 敏，姚 俊，鲁雅洁，等. GPRASP2基因编辑猪胎儿成纤维细胞系的建立［J］.
2021年1月 南京医科大学学报（自然科学版），2021，41（01）：004-010 · 7 ·

Canis lupus dingo Canis lupus familiaris Vulpes vulpes
A

Mus pahari
100 Mustela putorius furo
Mus caroli
100
49
Mus musculus
100 Equus caballus
100
Rattus norvegicus
71
99
100 100 Pteropus alecto
Pan troglodytes
100
100 100
Homo sapiens 98 100 100 Myotis brandtii
100
Theropithecus grlada Bos mutus Sus scrofa catodon Physeter 100 leucas Urocitellus parryii
Nannospalax galili
Dephinapterus
B
人
猪
人
猪
人
猪
人
猪
人
猪
人
猪
人
猪
人
猪
人
猪
人
猪
人
猪 Arm2结构域
A：GPRASP2系统进化树。根代表所有分类的共同祖先，结点代表分类单元，分支数据代表自展值，表示可信度；B：人/猪GPRASP2氨基酸
同源性比较。红线为Arm2结构域。
图1 GPRASP2系统进化树和人/猪GPRASP2蛋白氨基酸同源性分析
Figure 1 GPRASP2 phylogenetic tree and homology analysis of human and porcine GPRASP2

表2 GPRASP2蛋白及其Arm2结构域的二级结构分析 GGAC GAAACACCGCCCAATGGTGGTCCGGCCTAGTTTTAGAGCTAG
Table 2 Analysis of the secondary structures of CDS上游
GPRASP2 protein and Arm2 domain （%）
GPRASP2蛋白 Arm2结构域 GGACGAAACACCGG AAACCC T TGC TCATAGCGGTTTTAGAGC TAG
比例
人 猪 人 猪 CDS下游
α螺旋 43.9 41.1 47.8 42.2
β折叠 19.0 17.4 36.1 35.2 图2 重组打靶质粒测序验证图
β转角 31.5 34.1 20.9 24.3 Figure 2 Sequencing of recombinant vectors

c.113_114delCT/c.113_114delCT ）中 可用于后续的体细胞核移植。
基因敲除PFF细胞系（GPRASP2
GPRASP2 蛋 白 的 表 达 情 况 。 如 图 ５ 所 示 ，在
3 讨 论
GPRASP2 基因敲除 PFF 细胞中未检测到 GPRASP2
蛋白表达，表明 GPRASP2 基因敲除 PFF 构建成功， 本课题组在中国1个X⁃连锁遗传性SHL大家系