Page 50 - 南京医科大学自然科学版第1期

第41卷第1期
· 44 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2021年1月

A 对照组 40 nmol/L 60 nmol/L 80 nmol/L
500
400 400
600 400
300 300
300
count 400 M1 count M1 count M1 count M1
25.6% 200 91.0% 200 98.2% 200 99.3%
200
100 100 100
0 0 0 0
0 10 2 10 3 10 4 10 5 0 10 2 10 3 10 4 10 5 0 10 2 10 3 10 4 10 5 0 10 2 10 3 10 4 10 5
FITC⁃A：：FITC⁃A FITC⁃A：：FITC⁃A FITC⁃A：：FITC⁃A FITC⁃A：：FITC⁃A
B
150
DCF荧光强度 （ % of control） 100 * * *

50

0
对照组 40 60 80
OA（nmol/L）
A：流式细胞仪检测细胞内ROS实验结果；B：ROS水平定量分析。与对照组比较，P < 0.001（n=3）。
*
图3 OA对HT⁃22细胞内活性氧水平的影响
Figure 3 Effect of OA on the level of reactive oxygen species in HT⁃22 cells

照组相比，凋亡蛋白 Cleaved⁃caspase⁃3 表达量明显 2.2 姜黄素对OA损伤的HT⁃22细胞的影响
上升，抗凋亡蛋白Bcl⁃2表达量降低，差异有统计学 2.2.1 姜黄素对OA损伤的HT⁃22细胞活力的影响
意义（图4）。这一改变与流式细胞仪检测细胞凋亡 MTT结果显示，与对照组相比，Cur组对细胞活
实验结果相符。 力无明显影响，差异无统计学意义。与对照组相

用不同浓度 OA 作用 HT⁃22 细胞后，经 Western 比，OA组和OA+Cur组细胞活力明显降低，且OA组
blot检测，被诱导后的HT⁃22细胞出现类似于AD的 细胞活力低于 OA+Cur 组细胞，差异有统计学意义
t⁃Tau、p⁃Tau蛋白表达量明显升高（图4），说明OA处 （图5）。说明姜黄素可以减轻OA损伤所造成的HT⁃

理HT⁃22细胞后模拟了AD的病理特征。根据MTT 22细胞活力降低。
实验及流式细胞仪检测，OA作用HT⁃22细胞的IC50接 2.2.2 姜黄素对OA损伤HT⁃22细胞凋亡的影响

近80 nmol/L，后续实验将使用80 nmol/L的OA对HT⁃ Annexin V⁃FITC/PI双染色荧光显微镜观察结果
22细胞进行诱导。 显示，与对照组相比，Cur组细胞无明显变化，OA组

A B
OA（nmol/L） 2.0 1.5
Bcl⁃2蛋白相对表达 1.0 ** cleaved⁃caspase⁃3 蛋白相对表达
对照组 20 40 80 1.5
Bcl⁃2 26 kDa 1.0 * **

cleaved⁃caspase⁃3 17 kDa 0.5 ** 0.5
t⁃Tau 80 kDa 0.0 0.0
对照组 20 40 80 对照组 20 40 80
OA（nmol/L） OA（nmol/L）
p⁃Tau 78 kDa
1.0 0.4 **
t⁃Tau蛋白相对表达 0.6 p⁃Tau蛋白相对表达 0.2
β⁃actin 42 kDa 0.8 ** ** ** 0.3 * *

0.4
0.1
0.2
0.0 0.0
对照组 20 40 80 对照组 20 40 80
OA（nmol/L） OA（nmol/L）
A：Western blot实验结果；B：蛋白表达定量分析。与对照组比较，P < 0.05，P < 0.001（n=3）。
**
*
图4 OA对HT⁃22细胞Bcl⁃2、cleaved⁃caspase⁃3、t⁃Tau、p⁃Tau蛋白表达量的影响
Figure 4 Effect of OA on the expression levels of Bcl⁃2，cleaved⁃caspase⁃3，t⁃Tau，p⁃Tau protein in HT⁃22 cells