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第41卷第1期             许传先，凌卫明，张岳春，等. 姜黄素对冈田酸损伤的HT⁃22细胞的保护作用［J］.
                  2021年1月                     南京医科大学学报（自然科学版），2021，41（01）：041-048                       · 47  ·


                磷酸化后，微管稳定性下降而出现神经原纤维缠                             κB）的活性，激活 NF⁃κB 信号转导通路后可以促进
                结。AD 患者因 Tau 蛋白过磷酸化而出现相关症                         下游基因的表达，发挥抗炎效应              ［22-24］ 。本研究中，与
                状。OA 是蛋白磷酸酶 2A 的抑制剂，可诱导细胞和                        OA组相比，姜黄素作用OA损伤的HT⁃22细胞后，促
                动物体内 Tau 过度磷酸化及神经元死亡，从而提供                         进细胞活性，降低其凋亡率，减弱OA损伤导致的氧
                研究AD的理想模型         ［15-16］ 。本研究用不同浓度的OA            化应激反应，减弱细胞内活性氧生成，同时Bcl⁃2表达
                处理HT⁃22细胞，结果细胞凋亡率增加，细胞内ROS                        量增高、Cleaved⁃caspase⁃3蛋白表达量降低，表明姜
                量增加，细胞内p⁃Tau蛋白表达量异常增多。p⁃Tau                       黄素对OA损伤的HT⁃22细胞起到一定的保护作用。
                蛋白表达量增多是AD典型的分子生物学表现，我们                               目前，Tau蛋白过磷酸化被公认为对AD的发生
                认为，HT⁃22细胞经OA处理后p⁃Tau表达量的显著增                      有重要意义，过度磷酸化的 Tau 蛋白可降低微管稳
                加可以作为一种模型研究AD病理特征的改变。                             定性，损害神经元功能          ［25-26］ 。在AD模型小鼠中，Tau
                    Aβ是一种淀粉样蛋白沉积，是 AD 患者脑内细                       蛋白水平明显高于正常对照小鼠，并且过度磷酸化
                胞外老年斑的主要组成部分             ［17］ ，病理证实，AD 患者         Tau蛋白在其发病机制中起主要作用 。研究表明，
                                                                                                  ［27］
                Aβ主要沉积于脑部相关细胞的外部，同时动物实验                           OA 诱导 HT⁃22 细胞后，t⁃Tau、p⁃Tau 蛋白表达量增
                后的病理检查也证实 AD 模拟动物的 Aβ也同样沉                         高，而姜黄素作用OA损伤的细胞后，t⁃Tau、p⁃Tau蛋
                积于相关细胞外        ［18］ 。Aβ沉积与相关细胞的凋亡进                白表达量降低，说明姜黄素的应用可抑制 OA 诱导
                                         ［19］
                程及细胞凋亡后的变化有关 。                                    的HT⁃22细胞内总Tau蛋白的表达及其过磷酸化，姜
                    有研究显示，OA 作用于 PC12 等细胞进行 AD                    黄素对OA损伤的HT⁃22细胞有保护作用。
                造模后细胞内Aβ表达量上升             ［20］ ，也有文献表明，AD             总之，本研究结果表明，OA 诱导 HT⁃22 细胞后
                模型细胞内虽然有Aβ的增加，但其表达量因条件不                           细胞内 ROS 含量增高，细胞早期凋亡细胞增加，凋
                同而具有摆动性        ［19-21］ 。由于本研究用 OA 处理 HT⁃          亡相关蛋白表达量变化明显，细胞内t⁃Tau、p⁃Tau蛋
                22细胞后，有更加直观的细胞内p⁃Tau、t⁃Tau表达量                     白量增高，而应用姜黄素后可以有效改善 OA 损伤
                变化作为造模指标测定，而Aβ沉积部位主要位于细                           后HT⁃22细胞的状态，促进细胞增殖，降低损伤蛋白
                胞外并且其生成过程有阶段性，对后续实验可能会                            的表达量，对细胞起到明显的保护作用。姜黄素作为
                造成干扰，所以本研究未将细胞内Aβ表达量增加作                           一种抗氧化剂，所具有的抗AD作用，可作为AD治疗
                为AD造模成功的另一个观测指标，未检测OA应用                           的新思路，提示有必要对抗氧化剂在AD发生发展中
                前后细胞内Aβ表达量的变化。                                    的作用进行更深入的研究。
                    不同浓度的OA（20、40、60、80、100 nmol/L）分别作           ［参考文献］
                用小鼠海马神经元 HT⁃22 细胞 24 h 后，细胞活力受
                                                                 ［1］ 蒋    衍，程灶火. ADAS⁃Cog 在我国老年人群中的结构
                到抑制，呈浓度依赖性下降，其中 80 nmol/L OA 处
                                                                       效度［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2020，40
                理组，细胞活力下降接近 IC50，我们选择 80 nmol/L
                                                                      （5）：732-736
                OA 作为后续实验的损伤浓度。ROS主要由线粒体                         ［2］ HAIDER L，ZRZAVY T，HAMETNER S，et al. The
                在能量代谢过程中产生，线粒体损伤等多种途径可                                 topograpy of demyelination and neurodegeneration in the
                引起细胞内 ROS 蓄积。氧化应激反应可使 ROS 量                            multiple sclerosis brain［J］. Brain，2016，139（Pt 3）：807-
                增多，如果组织细胞内ROS量升高超过机体清除能                                815
                力，ROS 的产生和清除将处于失衡状态，可导致细                         ［3］ GRUNDKE⁃IQBAL I，IQBAL K，QUINLAN M，et al. Mi⁃
                胞死亡。流式细胞仪检测结果显示 OA 诱导后，细                               crotubule ⁃ associated protein tau. A component of Al⁃
                                                                       zheimer paired helical filaments［J］. J Biol Chem，1986，
                胞内 ROS 异常增高，细胞发生早期凋亡，并且早期
                                                                       261（13）：6084-6089
                凋亡率随OA浓度的增加呈明显上升的趋势。免疫
                                                                 ［4］ JENSEN J R，CISEK K，FUNK K E，et al. Research to⁃
                印迹实验证明了此结论，OA 诱导 HT⁃22 细胞后，抗
                                                                       wards tau imaging［J］. J Alzheimers Dis，2011，26（Suppl
                凋亡蛋白 Bcl⁃2 表达量下降，凋亡蛋白 Cleaved⁃cas⁃
                                                                       3）：147-157
                pase⁃3表达量明显增高。                                   ［5］ 张书刚，胡      梅，周其冈，等. 姜黄素对血管性痴呆大鼠
                    慢性炎症反应是 AD 的重要发病机制之一，姜                             学习记忆的影响［J］. 南京医科大学学报（自然科学
                黄素可抑制主要炎症介质，包括环氧合酶⁃1、环氧合                               版），2006，26（4）：246-248

                酶⁃2、干扰素⁃C 以及抑制调节转录因子（AP⁃1、NF⁃                    ［6］ LI J，HAN Y，LI M，et al. Curcumin promotes proliferation
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