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第41卷第11期
               ·1704 ·                           南 京    医 科 大 学 学         报                        2021年11月


              发现，在高表达ZEB2⁃AS1的肿瘤细胞中，EMT相关                       域结合来降解靶基因从而发挥作用。因此，ZEB2⁃
              标志物发生改变，包括上皮标志物 E⁃cadherin 的减                     AS1可以与miRNA相互结合，从而减少miRNA对靶
              少和间质标志物 N⁃cadherin、vimentin、fibronectin、          基因的降解作用，进而上调靶基因，影响肿瘤的发
              snail 的增多，表明 ZEB2⁃AS1 可以通过诱导 EMT 从                生和发展。在胰腺癌中，Gao 等             ［26］ 通过生物信息学
              而促进癌细胞的迁移和侵袭             ［19-21］ 。                分析预测与 ZEB2⁃AS1 具有互补碱基对的 miRNA，
              2.3  ZEB2⁃AS1与肿瘤代谢                                并通过荧光素酶报告基因最终确定了 miR⁃204 与
                  肿瘤细胞的能量代谢重编程通过调节能量代                           ZEB2⁃AS1相互结合。miRNA 是通过核糖核蛋白复
              谢促进细胞快速生长和增殖，在肿瘤进展中发挥着                            合物发挥其基因沉默功能，这种复合物称为RNA诱
              重要作用    ［22］ 。众所周知，正常细胞首先通过在细胞                    导 沉 默 复 合 物（RNA induced silencing complex，
              质中进行糖酵解，然后在有氧条件下进行线粒体氧                            RISC），其核心成分是Ago2。因此，作者通过RIP分
              化磷酸化获得能量。当缺氧时，细胞直接依靠糖酵                            析证实 Ago2 与 ZEB2⁃AS1、miR⁃204 在同一个 RISC
              解获得能量。然而，即使在有氧条件下，癌细胞也                            复合物中。接着作者通过应用 Targetscan 软件，确

              更倾向于从糖酵解获能，这种现象首先由 Warburg                        定 HMGB1 可能是 miR⁃204 的靶基因。将包含预测
              观察到   ［23-24］ ，因此被称为 Warburg 效应或有氧糖酵              的miR⁃204识别位点（野生型）或突变序列（突变型）
              解，它可以满足癌细胞的快速生长和增殖需求。随                            的HMGB1 mRNA的3′⁃UTR区亚克隆到荧光素酶报
              着 LncRNA 研 究 的 深 入 ，越 来 越 多 的 研 究 发 现             告质粒中，观察到 miR⁃204 在野生型质粒中降低了
              LncRNA可通过影响肿瘤细胞的代谢从而促进肿瘤                          荧光素酶活性，而在突变型质粒中的荧光素酶活性
              的生长。Li 等    ［25］ 发现ZEB2⁃AS1在结直肠癌组织和               没有变化。这些结果提示 HMGB1 是 miR⁃204 的靶
              细胞中相对高表达，功能实验表明 ZEB2⁃AS1 的过                       基因。综上所述，研究结果表明 ZEB2⁃AS1 可以通
              表达可以提高细胞的增殖速率和迁移能力，并减少                            过与 miR⁃204 相互结合从而上调促癌基因 HMGB1
              细胞凋亡。为了进一步探索 ZEB2⁃AS1 的作用机                        的表达，进而促进胰腺癌细胞增殖和侵袭                    ［26］ 。在胃
              理，通过核质分离实验检测了细胞质和细胞核中                             癌研究方面，ZEB2⁃AS1可以与miR⁃143⁃5p结合，正
              ZEB2⁃AS1 的表达。结果表明，ZEB2⁃AS1 主要位于                   向调控致癌转录因子 HIF⁃1α的表达从而促进胃癌
              细胞质中，提示它可能主要在转录后水平参与调控                            细胞的增殖与侵袭         ［27］ 。在结直肠癌中，ZEB2⁃AS1与
              结直肠癌的进程。接着作者应用生物信息学分析                             胞质衔接子 CRKL 的 mRNA 竞争性结合 miR⁃1205，
              预测miR⁃188最有可能和ZEB2⁃AS1相互结合，并通                     高表达的 ZEB2⁃AS1 解除了 miR⁃1205 对 CRKL 的抑
              过荧光素酶报告基因证实两者之间能相互结合。                             制作用从而促进结直肠癌的EMT 。除了以上几种
                                                                                             ［28］
              miRNA 通常是通过与靶基因的 3′⁃UTR 区域结合来                     miRNA，目前已被发现可以与 ZEB2⁃AS1 相结合的
              降解靶基因从而发挥作用。作者预测到TAB3可能                           miRNA包括miR⁃27b 、miR⁃143 、miR⁃122⁃5p 、
                                                                                   ［13］
                                                                                             ［15］
                                                                                                           ［16］
              是与 miR⁃188 结合的靶基因，并通过荧光素酶报告                       miR⁃6840⁃3p 、miR⁃574⁃3p ［18］ 和miR⁃188 。
                                                                           ［17］
                                                                                                    ［25］
              基因、功能实验和拯救实验证实了这一预测。为了                            3.2  ZEB2⁃AS1可与转录因子结合调控下游靶基因
              进一步研究 ZEB2⁃AS1 对糖酵解途径的影响，分别                       的转录
              过表达 ZEB2⁃AS1 和敲降 miR⁃188 后检测发现肿瘤                       位于细胞核中的LncRNA可以通过募集转录因
              细胞中葡萄糖和乳酸的生成明显增多，与此同时，                            子从而介导它们调控下游靶基因的转录。组蛋白
              糖酵解过程中的几个关键酶，包括 PDK1、PFK1 和                       甲基转移酶 EZH2 是 ZEB2⁃AS1 常见的结合转录因
              PKM2，表达量也随之发生改变。以上结果提示，过                          子，当EZH2在靶基因的上游启动子区域聚集时，可
              表达ZEB2⁃AS1可以通过与miR⁃188相互结合，从而                     以通过调节甲基化来沉默下游靶基因。在非小细
              使靶基因 TAB3 过表达，进而促进结直肠癌细胞的                         胞肺癌中，Chen 等      ［29］ 发现过表达 ZEB2⁃AS1 可以促
              糖酵解过程。                                            进非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移、侵袭，敲降ZEB2⁃
                                                                AS1 会导致肿瘤抑制因子 PTEN 在 mRNA 和蛋白水
              3  ZEB2⁃AS1影响肿瘤生物学行为的分子机制
                                                                平明显上调。为了研究ZEB2⁃AS1在非小细胞肺癌
              3.1  ZEB2⁃AS1可以作为ceRNA调控靶基因的功能                    中的具体作用机制，作者通过 RIP 实验证实 ZEB2⁃
                  LncRNA ZEB2⁃AS1 可以与 miRNA 形成互补碱               AS1 可以与 EZH2 相互结合，CHIP 分析显示过表达
              基对，此外，miRNA 可以通过与靶基因的 3′⁃UTR 区                    的ZEB2⁃AS1可以促进EZH2与PTEN启动子区域的
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