Page 96 - 南京医科大学学报自然科学版
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第41卷第6期
               ·874 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2021年6月


                             -
                                  +
              patients with HER2 /KI67 predicted better chemotherapy efficacy and prognosis. Conclusion：In patients with HER2 ⁃ negative
                                                                                                         -
              invasive breast cancer，the high expression of Ki67 indicates a better effect of chemotherapy，while the patients with HER2 /Ki67  +
              predict a better survival time.
             ［Key words］ invasive breast cancer；HER2；Ki67；Nanostring nCounter；chemotherapy effect；prognostic
                                                                         ［J Nanjing Med Univ，2021，41（06）：873⁃878，898］




                  乳腺癌一直是欧美国家女性恶性肿瘤死亡的                           trogen receptor，ER）、孕激素受体（progesterone recep⁃
              第一大原因 。浸润性乳腺癌是指癌细胞已穿破乳                            tor，PR）、HER2、Ki67表达、肿瘤大小、淋巴结转移、
                        ［1］
              腺导管或小叶腺泡的基底膜并侵入间质的一种恶                             远处转移、TNM分析、蒽环类药物化疗相关信息以及
              性肿瘤。浸润性乳腺癌绝大多数为腺癌，起源于乳腺                           生存预后情况等，随访截至2017年12月。临床查体
              实质上皮细胞，特别是乳腺末梢导管小叶单位 。                            和乳腺超声检查评价疗效标准参照 RECIST2000（实
                                                         ［2］
              蒽环类药物在浸润性乳腺癌的治疗中具有重要地                             体瘤客观疗效评定标准） ：完全缓解（complete remis⁃
                                                                                     ［8］
              位 ，但是近年来大量文献提示部分蒽环类药物出                            sion，CR）：所有目标病灶完全消失并保持 4 周以上；
                ［3］
              现选择性不高的情况 。因此，找出有效的分子生                            部分缓解（partial remission，PR）：治疗后目标病灶长
                                 ［3］
              物学标志物将有助于临床个体化治疗的精准选择。                            径之和缩小 30%以上并保持 4 周以上；疾病进展

                  人类 表皮生长因子受体 2（human epidermal                 （disease progression，PD）：治疗后目标病灶长径之和
              growth factor receptor⁃2，HER2），为表皮生长因子受           增加 20%以上或出现新病灶；疾病稳定（diseuse sta⁃
              体家族成员之一。HER2高表达的肿瘤表现出较强                           bility，SD）：治疗后目标病灶长径之和缩小不超过
              的转移能力和浸润能力，化疗敏感性也较低                    ［4-5］ 。目   30%或增加不超过 20%并保持4周以上。客观有效=
              前在乳腺癌、卵巢癌、胃肠道癌和肺癌中都发现了                            CR+PR；客观无效=PD+SD。本研究方案经马鞍山市
                            ［6］
              HER2 表达异常 。现有的检测方法主要有免疫组                          中心医院伦理委员会批准（2019⁃0653）。患者基本信
              化（immunohistochemistry，IHC）、荧光原位杂交技术              息见表1。
             （fluorescence in situ hybridization，FISH）等，而 FISH  1.2  方法
              是目前检测HER2基因扩增水平的金标准 。                             1.2.1 数据库分析
                                                   ［7］
                   本研究拟采用数据库预测 HER2 mRNA 在浸                          在线数据库基因表达图谱关联分析（the online
              润性乳腺癌中的表达情况，并与Ki67 mRNA表达水                        database gene expression profiling interactive analysis，
              平进行关联性分析；Nanostring nCounter技术检测53                GEPIA）是一个新开发的互动网站，使用一套标准程
              例浸润性乳腺癌福尔马林固定的石蜡样本（forma⁃                         序分析来自 TCGA 和 GTEx data（http：//gepia.cancer
              lin fixed paraffin sample，FFPE）组织标本中 HER2         pku.cn/detail.php）的 9 736 个肿瘤和 8 587 个正常样
              mRNA 的表达情况，并与蒽环类化疗药物的疗效进                          本的 mRNA 测序数据。本文利用 GEPIA 数据库生
              行关联性分析；进一步通过 222 例浸润性乳腺癌临                         成点图和箱线图。
              床病理资料，寻找有效的分子生物学标志物，以期                            1.2.2 Nanostring nCounter样本制备
              有助于对临床个体化治疗。                                           对53例乳腺癌组织及癌旁对照组织的FFPE进
                                                                行 Nanostring nCounter 多基因分析。根据 HE 染色
              1  材料和方法
                                                                切片，手工切除蜡块中的非肿瘤成分。根据石蜡组
              1.1  材料                                           织的高纯度 RNA 提取试剂盒（厦门艾德公司）的操
                  收集马鞍山市中心医院病理科 2013 年 1 月—                     作说明进行 RNA 抽提，并进行杂交、纯化和计数。
              2015年12月手术或穿刺获得的53例浸润性乳腺癌                         采 用 nCounter GX Human Kinase Kit（NanoString
              石蜡标本。患者均为女性，有完整的临床病理资                             Technologies 公司，美国）进行基因表达分析。数字
              料，患者均仅进行蒽环类药物化疗。同时收集马鞍                            化成像分析仪进行mRNA 分子计数，本次实验计数
              山市中心医院病理科 2008 年 1 月—2012 年 12 月浸                 方式以视野（fields of view，FOV）来表示，并采用
              润性乳腺癌的组织蜡块 222 例，具有完整的临床病                         280FOV 进行计数。按照操作说明和实验要求进行

              理信息，包括绝经情况、肿瘤部位、雌激素受体（es⁃                         实验操作和结果分析。样品加样量为100 ng，选取3
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