Page 30 - 南京医科大学学报自然科学版

第41卷第7期
·960 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2021年7月

A
WT KO
Q1 Q2 Q1 Q2 80
0 63.9% 0 66.8% （ % ） 60
CD3 - NK1.1 + IFN⁃γ + 40

IFN⁃γ Q4 36.1% Q4 33.2% 20
Q3
Q3
0
0
0
NK1.1 WT KO
3∶1 1∶1 1∶3
B
Q1 Q2 Q1 Q2 Q1 Q2 （ % ） 25 WT
0 16.0% 0 14.5% 0 10.5% 20 KO
CD3 - NK1.1 + CD107a + 10
WT 15
Q4 Q3 Q4 Q3 Q4 Q3 5
0 84.0% 0 85.5% 0 89.5%
0
3∶1 1∶1 1∶3
效靶比
Q1 Q2 Q1 Q2 Q1 Q2
0 17.5% 0 17.0% 0 12.7%
CD107a KO

Q3
Q3
Q3
0 Q4 82.5% Q4 83.0% Q4 87.3%
0
0
NK1.1
A：流式细胞术分析生理状态下miR⁃16/15a 小鼠和对照小鼠脾脏CD3 NK1.1 IFN⁃γ 细胞百分率（n=3）；B：将miR⁃16/15a 小鼠或对照小鼠
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脾脏细胞与MC38细胞按照效靶比3∶1、1∶1、1∶3的比例铺板，流式细胞术分析CD3 NK1.1 CD107a 细胞的百分率（n=3）。
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+
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图5 miR⁃16/15a 小鼠脾脏NK细胞IFN⁃γ产生和脱颗粒活性的检测
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Figure 5 IFN⁃γ production and degranulation activity of NK cells in the spleen of miR⁃16/15a mice
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面重要的活化性受体，那么 miR⁃16 是否参与调控 15a 小鼠皮下注射MC38细胞，miR⁃16/15a 小鼠结
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NK 细胞 NKG2D 的表达，以及其对 NK 细胞介导的 肠癌移植瘤的生长速度较野生小鼠明显降低，提示
抗肿瘤免疫活性的影响如何，这对了解miR⁃16在不 miR⁃16/15a 小鼠抗肿瘤活性增强。生理状态下，与
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同状态NK细胞的表达特点及其活性调节具有重要 NK1.1 NKG2D 细 胞 相 比 ，C57BL/6 小 鼠 NK1.1 +
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意义，值得进一步研究。NKG2D 不仅是 NK 细胞表 NKG2D 细胞 miR⁃16 表达明显下降，提示 miR⁃16 可
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面重要的活化性受体，也是 CD4 T、CD8 、NKT、ɣδT 能调节 NK 细胞 NKG2D 的表达。然而在荷瘤小鼠
以及部分巨噬细胞表面的活化性受体。当 NKG2D 中，miR⁃16 在小鼠脾脏 2 组 NK 细胞亚群间的表达
与其配体MHC Ⅰ类相关分子（MICA 或 MICB）结合 差异消失，提示对于荷瘤小鼠的NK细胞，miR⁃16对
后，激活NK 和CD8 T淋巴细胞，成为机体发挥抗肿 其NKG2D表达没有核心调控作用。另外，生理状态
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瘤和抗感染活性的关键免疫分子 ［5，12］ 。NKG2D + 的miR⁃16/15a 小鼠体内NK细胞百分率、活性和细
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CD8 T、NKG2D CD4 T细胞通常聚集肿瘤部位，发挥 胞毒性与对照小鼠无显著差异，与 NK 细胞特异性
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抗肿瘤作用 ［13］ ，而 miR⁃16/15a 能够影响 NKG2D + 缺乏 miR⁃16/15a 的报道相一致。以上结果均提示
+ ［11］
+ ［14］
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CD8 T 、NKG2D CD4 T 细胞的频率。提示 miR⁃ 尽管miR⁃16可能参与NK细胞NKG2D表达的调控，
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16/15a也可能通过影响CD4 T细胞、CD8 T细胞、NK 但对NK细胞的生物学活性无明显调节作用。
细胞等NKG2D的表达发挥抗肿瘤作用。 进一步分析发现，NK 细胞及 NK1.1 NKG2D 细
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为了进一步研究 miR⁃16/15a 的生物学功能，课 胞的百分率在荷瘤组织和脾脏内均无明显变化，说
题组从美国 Jackson 实验室引进了 miR⁃16/15a 基因 明NK细胞在miR⁃16/15a基因敲除小鼠体内的肿瘤
敲除小鼠。对比WT小鼠，miR⁃16/15a 小鼠的肝癌 监视作用改变不明显，可能是其他免疫细胞介导了
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（H22）移植瘤生长速度变慢 ［11］ 。课题组对 miR⁃16/ 抗肿瘤活性。课题组前期研究提示，miR⁃16/15a 小
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