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南京医科大学学报（自然科学版） 第41卷第7期
·970 · Journal of Nanjing Medical University（Natural Sciences） 2021年7月

·基础医学·

TLR/NF⁃κB 信号通路在甲基苯丙胺诱导的原代小胶质细胞炎

性反应中的作用

肖 逸 ，王胜婵 ，王易欣 ，臧松松 ，张 炜 1*
4
1，2
3
4
南京医科大学第一附属医院泌尿外科，江苏 南京 210029；南京医科大学附属逸夫医院泌尿外科，江苏 南京 211100；
1 2
4
3 南京医科大学附属老年医院泌尿外科，江苏 南京 210024；南京医科大学公共卫生学院卫生毒理系，江苏 南京
211166

［摘 要］ 目的：探讨Toll样受体（Toll like receptor，TLR）/核因子（nuclear factor，NF）⁃κB信号通路在甲基苯丙胺（methamphet⁃
amine，METH）引起原代小胶质细胞激活及炎性因子释放的作用。方法：分离培养原代小胶质细胞，免疫荧光法鉴定原代小胶
质细胞纯度。细胞予METH（300 μmol/L）染毒0 min、15 min、30 min、1 h、3 h、6 h、12 h和24 h，蛋白免疫印迹检测原代小胶质细
胞的激活情况及其NF⁃κB通路激活情况，real⁃time PCR检测炎性因子［肿瘤坏死因子⁃α（tumor necrosis factor⁃ α，TNF⁃α）、白介
素⁃1β（interleukin⁃1β，IL⁃1β）、白介素⁃6（interleukin⁃6，IL⁃6）］和TLR1~9、11 mRNA的表达。结果：分离出的原代小胶质细胞纯
度达到95%以上。METH暴露后原代小胶质细胞激活，其激活标志物IBA⁃1水平增高，NF⁃κB通路被激活，炎性因子（TNF⁃α、IL
⁃1β、IL⁃6）和 TLR2、4~5、7~9、11 的 mRNA 水平明显升高，TLR1 的 mRNA 水平明显降低，差异具有统计学意义（P < 0.05）。结
论：METH可通过调节TLR/NF⁃κB信号通路激活原代小胶质细胞并促进其释放炎性因子，因而TLR可作为METH神经炎性反
应干预的潜在靶点，具有一定的治疗意义。
［关键词］ 甲基苯丙胺；原代小胶质细胞；TLR/NF⁃κB信号通路
［中图分类号］ R114 ［文献标志码］ A ［文章编号］ 1007⁃4368（2021）07⁃970⁃06
doi：10.7655/NYDXBNS20210706

Role of TLR/NF ⁃ κB signaling pathway in methamphetamine ⁃ induced primary microglial
inflammation

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1，2
3
4
XIAO Yi ，WANG Shengchan ，WANG Yixin ，ZANG Songsong ，ZHANG Wei 1*
2
1 Department of Urology，the First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University，Nanjing 210029；Department of
Urology，Sir Run Run Hospital，Nanjing Medical University，Nanjing 211100；Department of Urology，Geriatric
3
Hospital of Nanjing Medical University，Nanjing 210024；Department of Toxicology，School of Public Health，
4
Nanjing Medical University，Nanjing 211166，China
［Abstract］ Objective：To investigate the role of Toll⁃like receptor（TLR）/NF⁃κB signaling pathway in methamphetamine（METH）⁃
induced primary microglial activation and inflammatory reaction. Methods：Primary microglial cells were isolated and cultured，then
the purity of primary microglia was detected by immunofluorescence. Cells were treated with METH（300 μmol/L）for 0 min，15 min，
30 min，1 h，3 h，6 h，12 h，and 24 h，and the activations of primary microglia and NF⁃κB pathway were detected by Western blot. The
inflammatory factors（TNF⁃α，IL⁃1β，and IL⁃6）and TLR1⁃9，11 mRNA levels were detected by real⁃time PCR. Results：The purity of
primary microglial cells was above 95%. After exposure to METH，the primary microglia activation marker IBA⁃1 was increased and
the NF⁃κB pathway was activated. In addition，the mRNA levels of inflammatory factors（TNF⁃α，IL⁃1β，IL⁃6）and TLR2，4⁃5，7⁃9，11
were significantly increased（P < 0.05），while the level of TLR1 mRNA was significantly reduced. Conclusion：METH can activate
primary microglial cells and promote the release of inflammatory factors by regulating the TLR/NF⁃κB signaling pathway. Therefore，
TLR can be potential targets for METH neuritis response intervention with certain therapeutic significance.
［Key words］ methamphetamine；primary microglia；TLR/NF⁃κB signaling pathway
［J Nanjing Med Univ，2021，41（07）：970⁃975］
［基金项目］ 国家自然科学基金（81673213）
∗
通信作者（Corresponding author），E⁃mail：jsphzhangwei@163.com