Page 43 - 南京医科大学学报自然科学版

第41卷第7期 肖 逸，王胜婵，王易欣，等. TLR/NF⁃κB信号通路在甲基苯丙胺诱导的原代小胶质细胞炎性
2021年7月 反应中的作用［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2021，41（07）：970-975 ·973 ·

达到高峰，差异有统计学意义（P < 0.05），提示 和11的mRNA表达均显著上升，差异具有统计学意
METH明显激活原代小胶质细胞。 义（图 4），而 TLR3 和 TLR6 的 mRNA 水平无明显变
2.3 METH对小胶质细胞炎性因子表达的影响 化。
在300 μmol/L的METH分别处理原代小胶质细 2.5 METH对NF⁃κB通路激活的影响
胞 12 h、24 h 后，使用 real⁃time PCR 检测炎性因子 转录因子NF⁃κB 是TLR 信号的下游，参与调节
TNF⁃α、IL⁃1β和 IL⁃6 的 mRNA 表达。如图 3 所示， 炎性因子转录和表达 。300 μmol/L 的 METH 处理
［6］
TNF⁃α、IL⁃1β和 IL⁃6 mRNA 在 METH孵育24 h 后表 原代小胶质细胞15 min、30 min、1 h、3 h、6 h、12 h和

达均显著上升，差异具有统计学意义（P < 0.05，P < 24 h后，在15 min时NF⁃κB的磷酸化水平开始升高，
0.001，P < 0.01）。 在 30 min 时达到高峰，与对照组比较，差异具有统

2.4 METH 对小胶质细胞 TLR 家族 mRNA 水平的 计学意义，随后下降，但仍高于对照组（图5）。
影响
3 讨 论
文献报道，TLR 家族参与小胶质细胞的炎性反
应作用。用300 μmol/L的METH与原代小胶质细胞 METH 属于苯丙胺类物质，是一种新型毒品。
孵育24 h，检测TLR 1~9、11的mRNA表达情况。结 因为制造工艺简单，价格低廉，METH的滥用日益严
果 显 示 ，与 对 照 组 相 比 ，METH 处 理 后 TLR1 的 重，给全世界带来严重的公共卫生问题 。动物和
［1］
mRNA在原代小胶质细胞表达下降，TLR2、4~5、7~9 人群实验都显示，METH 滥用可导致严重的神经系
mRNA相对表达量 1.5 * mRNA相对表达量 2 mRNA相对表达量 3 2 **
3
***
4
2.0
1.0

TNF⁃α 0.5 0 IL⁃1β 1 0 IL⁃6 1 0
对照组 12 h 24 h 对照组 12 h 24 h 对照组 12 h 24 h
与对照组相比，P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001（n=3）。
*
**
***
图3 METH对小胶质细胞炎症因子表达的改变
Figure 3 Effects of METH on the expression of inflammatory factors in microglia
1.5 2.5 1.5
**
mRNA 相对表达量 1.0 * TLR2 mRNA 相对表达量 1.5 TLR3 mRNA 相对表达量 1.0
2.0
TLR1 0.5 1.0 0.5
0.5
0 0 0
对照组 24 h 对照组 24 h 对照组 24 h
1.5 6 1.5
* ***
TLR4 mRNA 相对表达量 1.0 TLR5 mRNA 相对表达量 4 2 TLR6 mRNA 相对表达量 1.0

0.5
0.5
0 0 0
对照组 24 h 对照组 24 h 对照组 24 h
1.5 * 2.0 ** 2.0 ** 2.5 **
TLR7 mRNA 相对表达量 1.0 TLR8 mRNA 相对表达量 1.0 TLR9 mRNA 相对表达量 1.0 mRNA TLR11 相对表达量 1.5
2.0
1.5
1.5
1.0
0.5
0 0.5 0 0.5 0 0.5 0
对照组 24 h 对照组 24 h 对照组 24 h 对照组 24 h
与对照组相比，P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001（n=3）。
**
*
***
图4 METH对原代小胶质细胞TLR1~9、11的mRNA水平的影响
Figure 4 Effects of METH on mRNA expression of TLR 1⁃9 and TLR11