Page 28 - 南京医科大学学报自然科学版

第42卷第2期
·174 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2022年2月

Control 将细胞周期阻滞在 G2/M 期，使其不能进入下一个
SFN（12.5 μmol/L）
120 ** ** 细胞阶段。
SFN（25.0 μmol/L） **
* **
100 2.4 SFN对LLC细胞内ROS表达的影响
（ % ） 80 量，它可以穿过细胞膜并被细胞内的酯酶水解生成
DCFH⁃DA 探针用于特异性鉴定细胞内 ROS 含
相对增殖能力 60 DCFH，而细胞内的ROS可以将无荧光标记的DCFH

40
DCF的荧光强度就可以检测ROS的水平。LLC细胞
20 转变为有荧光标记的 DCF。所以，通过检测细胞内
0 计数培养24 h后，分别用12.5 μmol/L和25.0 μmol/L
6 h 24 h 48 h 72 h
两组比较，P＜0.05，P＜0.01。 的SFN作用LLC细胞24 h后，流式细胞术检测发现，
*
**
图1 SFN对LLC细胞增殖的影响 当用 12.5 μmol/L 和 25.0 μmol/L 的 SFN 处理 LLC 细
Figure 1 The effect of SFN on the LLC cell proliferation 胞24 h后，细胞内ROS的表达水平显著增高（图5）。
后，CyclinB、CyclinD、CDK1、CDK4 和 CDK6 基因的 2.5 SFN对ERK磷酸化的影响
表达量下降（P < 0.01，图4），说明SFN处理细胞后， 为进一步研究 SFN 促进乳腺癌细胞迁移和侵

A B
Control SFN（12.5 μmol/L） SFN（25.0 μmol/L） Control
10 4 10 4 10 4
Q1 6.86% Q1 6.54% Q1 56.1% SFN（12.5 μmol/L）
2.49% 1.90% 2.39% SFN（25.0 μmol/L）
10 3 10 3 10 3 ***
80
h 2 2 2 （ % ） 100
24 10 10 10 60 **
10 1 10 1 10 1 细胞凋亡比率 40 *
Q4
Q4 0.25% 0 90.9% 0.70% Q4 1.12% 20
40.4%
0 90.4%
Annexin V 10 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 0 24 h 48 h
4
4
4
10
10
10
Q1
1.79% 6.01% Q1 15.3% Q1 73.8%
6.52%
5.36%
10 3 10 3 10 3
h 2 2 2
48 10 10 10
10 1 10 1 10 1
Q4 Q4 Q4
92.0% 0.24% 77.2% 0.92% 19.5% 1.32%
10 0 10 0 10 0
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4
7⁃AAD
A：流式细胞术检测SFN对LLC细胞的凋亡情况；B：统计分析结果。两组比较，P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001（n=3）。
**
****
*
图2 SFN对LLC细胞凋亡的影响
Figure 2 The effect of SFN on the apoptosis of LLC cell line
120
G2/M 袭能力的分子机制，通过Western blot检测对照组和
S
100
G0/G1 SFN 处理组中的 ERK 的磷酸化水平变化。结果显
（ % ） 80 示，随着 SFN 浓度的增高，细胞内 Nrf2 的蛋白表达
细胞周期比 60 水平显著增高，ERK 磷酸化水平逐渐增强（P <
0.01）；用25.0 μmol/L处理LLC细胞4 h后，Nrf2的蛋
40
白表达水平和 ERK 磷酸化水平表达显著高于对照
20
组，差异有统计学意义（P < 0.05，图6）。
0 2.6 SFN对小鼠体内肿瘤生长的影响
Control SFN（12.5 μmol/L）SFN（25.0 μmol/L）
图3 SFN对LLC细胞周期阻滞的影响 小鼠成瘤实验结果发现，给药10 d后，SFN组小鼠
Figure 3 Effect of SFN on the cell cycle of LLC cells 的肿瘤体积与对照组相比明显减小（P < 0.05，图7）。