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第42卷第2期            丁   骏,潘 洁,谢叶文,等. 莱菔硫烷对小鼠肺癌细胞凋亡的影响及机制研究[J].
                  2022年2月                     南京医科大学学报(自然科学版),2022,42(02):171-177                       ·175 ·


                      A                                          B
                               Control                                    Control
                               SFN(12.5 μmol/L)                           SFN(12.5 μmol/L)
                          1.6                                        1.8
                               SFN(25.0 μmol/L)                           SFN(25.0 μmol/L)
                          1.4                                        1.6
                                                                     1.4
                         基因的相对表达量  1.0  *      **    **             基因的相对表达量  1.2  *  *          **
                          1.2
                                                                     1.0
                          0.8
                                                                     0.8
                          0.6
                                                                     0.6
                          0.4
                                 **                         **       0.4           **     **            **
                          0.2                                        0.2
                                                                            **
                           0                                          0
                              CDK1  CyclinB  CDK4  CDK6  CyclinD          CDK1  CyclinB  CDK4  CDK6  CyclinD
                                    A:SFN处理细胞24 h;B:SFN处理细胞48 h。与对照组比较,P < 0.05,P < 0.01。
                                                                              *
                                                                                    **
                                               图4 SFN对细胞周期相关基因表达的影响
                                    Figure 4 The effect of SFN on the expression of cell cycle related genes
                3  讨 论

                    植物中存在的天然异硫氰酸酯可以显著降低                                                              Control
                肿瘤的发生率      [12-14] 。目前已经证明的具有抗肿瘤活
                性的异硫氰酸酯类化合物有多种,SFN 便是其中之
                                                                                              SFN(12.5 μmol/L)
                一 [15-17] 。研究表明,SFN 可以在肿瘤发生发展的各
                个阶段起到抑制作用,还可以通过线粒体通路、死
                                                                                              SFN(25.0 μmol/L)
                亡配体通路、内质网通路等多种不同的途径诱导肿
                瘤细胞凋亡。                                                 10 0     10 1    10 2     10 3     10 4
                    本研究从细胞及动物水平验证SFN对LLC细胞                                             FITC⁃A
                                                                         图5   SFN对LLC细胞中ROS水平的影响
                的影响,通过CCK⁃8 法检测SFN对LLC增殖率的影
                                                                  Figure 5  The effect of SFN on the ROS levels of LLC cell
                响,结果显示SFN能显著抑制LLC细胞的增殖,且这
                                                                           line
                种抑制作用呈SFN 浓度依赖性;用流式细胞术研究
                了 SFN 对 LLC 细胞周期和细胞凋亡的影响,发现随                      其次,处于 G0/G1 期的细胞比例明显下降,而 G2/M
                着SFN浓度的增加,LLC细胞晚期凋亡率逐渐增加;                         期 的 细 胞 比 例 明 显 上 升 ,细 胞 周 期 相 关 基 因

                A                                     C
                 SFN(mol/L)25.0012.50 6.25 3.00  0         3.0                       2.5
                                                                     ****                        *
                      Nrf2                  —100 kDa       2.5      **               2.0       *
                                                        p⁃ERK/ERK  的相对表达量  1.5       Nrf2的相对表达量
                     p⁃ERK                  —44 kDa        2.0  *** **               1.5
                      ERK                   —44 kDa        1.0                       1.0
                     β⁃actin                —42 kDa        0.5                       0.5
                                                            0                          0
                                                               0  3.00 6.25 12.50 25.00   0  3.00 6.25 12.50 25.00
                                                                   SFN(mol/L)                SFN(mol/L)
                B
                    时间(h)  4   2  1  0.5  0                1.8        *               1.8        **
                                                           1.6                        1.6      **
                      Nrf2                  —100 kDa       1.4                        1.4
                                                        p⁃ERK/ERK  的相对表达量  0.8       Nrf2的相对表达量  0.8
                     p⁃ERK                  —44 kDa        1.2                        1.2
                                                           1.0
                                                                                      1.0
                      ERK                   —44 kDa        0.6                        0.6
                     β⁃actin                —42 kDa        0.4                        0.4
                                                                                      0.2
                                                           0.2
                                                            0                          0
                                                               0  0.5  1  2   4           0  0.5  1  2  4
                                                                    时间(h)                       时间(h)
                   A:Western blot检测不同浓度SFN对Nrf2⁃ERK信号通路的影响;B:Western blot检测25.0 μmol/L的SFN作用不同时间对Nrf2⁃ERK信号通
                路的影响。两组比较,P < 0.05,P < 0.01, P < 0.001, P < 0.000 1(n=3)。
                                      **
                               *
                                             ***
                                                     ****
                                                图6 SFN对Nrf2⁃ERK蛋白表达的影响
                                       Figure 6  The effect of SFN on the Nrf2⁃ERK signaling pathway
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