Page 108 - 南京医科大学学报自然科学版

第42卷第3期
·410 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2022年3月

DDD、o，p’⁃DDD、p，p’⁃DDE、o，p’⁃DDE）的 GC⁃MS/ 表1 DDT化合物的相对保留时间、特征离子和检出限
Table 1 The relative retention time，ion ratios and detec⁃
MS检测方法，根据m/z相对丰度和特征峰确定DDT
的特征离子，并记录各 DDT 保留时间，以及检出限 tion limits of DDT compounds
（表 1）。根据 DDT 保留时间确定其特征峰（图 保留时间 特征离子 检出限
DDT a
1A）。标准品处理后采用外标法定量，并根据峰面 （min） （m/z） （ng/mL）
o，p’⁃DDE 10.24 246，176，248 0.001 83
积和浓度绘制各物质的标准曲线，结果显示，校正
p，p’⁃DDE 10.53 318，176，248 0.001 56
曲线相关系数均在0.99以上，线性良好，灵敏度高，
o，p’⁃DDD 10.63 199，163，165 0.000 25
满足准确定量的要求（图1B）。DDT的加标回收率和
p，p’⁃DDD 10.94 235，165，199 0.001 36
相对标准偏差如表2所示，实验样品回收率在80%~
o，p’⁃DDT 10.99 235，165，199 0.002 88
110%之间，相对标准偏差<15%，说明本实验方法符 p，p’⁃DDT 11.14 235，165，199 0.002 34
合要求。 a：指DDT及其代谢产物。

2.2 评价CYP2B6对p，p’⁃DDT的代谢活性
运用体外代谢实验评价 CYP2B6 代谢 p，p’⁃ 程计算代谢酶活性，反应速度呈现浓度依赖性，通过非
DDT 能力，采用 80 nmol 的重组酶 CYP2B6 与 p，p’⁃ 线性回归计算得到动力学参数Km为15.12 μmol/L，每
DDT（0~600 μmol/L）孵育30 min，根据米氏动力学方 纳摩尔P450 酶的 Vmax为 12.8 nmol/min，内在清除率

A p，p’⁃DDE p，p’⁃DDD
100
95
90
85 o，p’⁃DDE
80
75
70
65
相对丰度 55 o，p’⁃DDD
60
50
45
40
35
30
25 p，p’⁃DDT
20
15 o，p’⁃DDT
10
5
0
10.0 10.2 10.4 10.6 10.8 11.0 11.2 11.4 11.6 11.8 12.0
时间（min）
B
Y=35 743+214 222×X Y=53 644.8+474 155×X Y=24 513.9+124 556×X
2
2
2
R =0.999 8 R =0.999 9 R =0.999 3
5 000 000 12 000 000 3 000 000
10 000 000 2 500 000
4 000 000 8 000 000
峰面积 3 000 000 峰面积 6 000 000 峰面积 2 000 000
1 500 000
2 000 000
4 000 000 1 000 000
1 000 000 2 000 000 500 000
0 0 0
0 5 10 15 20 25 0 5 10 15 20 25 0 5 10 15 20 25
p，p’⁃DDE（ng/mL） o，p’⁃DDE（ng/mL） o，p’⁃DDD（ng/mL）
Y=360 977+1.434 54e+006×X Y=196 067+1.538 18e+006×X Y=272 881+1.506 51e+006×X
2
2
2
35 000 000 R =0.999 5 40 000 000 R =0.999 9 40 000 000 R =0.999 8
35 000 000 35 000 000
30 000 000
30 000 000 30 000 000
25 000 000
峰面积 20 000 000 峰面积 25 000 000 峰面积 25 000 000
20 000 000
20 000 000
15 000 000
10 000 000 15 000 000 15 000 000
10 000 000
10 000 000
5 000 000 5 000 000 5 000 000
0 0 0
0 5 10 15 20 25 0 5 10 15 20 25 0 5 10 15 20 25
p，p’⁃DDD（ng/mL） o，p’⁃DDT（ng/mL） p，p’⁃DDT（ng/mL）
A：6种DDT的特征图谱；B：6种DDT的标准曲线。
图1 6种DDT的特征图谱和标准曲线
Figure 1 The representative standard curve and mass spectrum of 6 kinds of DDT