Page 26 - 南京医科大学学报自然科学版

第42卷第3期
·328 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2022年3月

A B
1.5 20 *
miR⁃484的相对表达量 1.0 * * miR⁃484的相对表达量 15

10
0.5

0 5 0
第0天 第4天 第8天 第15天 对照组 mimic NC组 miR⁃484 mimic组
A：将HPA 进行分化，取分化第0、4、8、15天的脂肪细胞，通过RT⁃qPCR 实验检测miR⁃484在HPA 分化过程中的相对表达量，与第0天相
比，P＜0.05（n=3）；B：将HPA细胞分为3组，miR⁃484 mimic组、mimic NC组分别转染miR⁃484 mimic及阴性对照空白质粒，对照组不转染，通过
*
RT⁃qPCR实验检测各组miR⁃484表达量，与对照组相比，P＜0.05（n=3）。
*
图1 miR⁃484在HPA分化过程中的表达及其过表达验证
Figure 1 Relative expression of miR⁃484 in HPA and overexpression validation of miR⁃484

HPA中过表达miR⁃484后，对分化第15天的成熟人 mimic NC组相比，miR⁃484 mimic组的甘油三酯含量
脂肪细胞进行油红O染色，镜下观察发现，与对照组 减少（P < 0.05，图2E）。这表明过表达miR⁃484可以
及 mimic NC 组相比，miR⁃484 mimic 组脂肪细胞脂 抑制HPA向成熟脂肪细胞分化。
滴数量及体积明显减少（图2C），也对脂肪分化相关 2.3 沉默miR⁃484促进HPA的增殖分化
基因 PPAR γ、C/EBP α和 FABP4 的 mRNA 相对表达 为了进一步了解沉默miR⁃484对脂肪生成的作
量进行了检测，RT⁃qPCR 实验发现 miR⁃484 mimic 用，将miR⁃484 inhibitor及miR⁃484 inhibitor NC分别
组的脂肪分化相关基因表达量均减少（P < 0.05，图 转染至HPA中。CCK⁃8实验检测转染后0 h、24 h及
2D）。同时，甘油三酯定量测定发现与对照组及 48 h HPA的增殖能力发现，与对照组及inhibitor NC

A 对照组 B C
1.5 对照组
mimic NC组 ** 1.5 mimic NC组
nm ） 1.0 miR⁃484 mimic组 miR⁃484 mimic组
（ 450 D 0.5 * mRNA的相对表达量 1.0 ** ** 对照组

0 0.5 **
0 h 24 h 48 h 0
Cyclin D1 Cyclin D3 CDK4

D E
对照组 mimic NC组
mimic NC组
1.5
mRNA的相对表达量 1.0 ** ** 甘油三酯相对水平 1.5 **
miR⁃484 mimic组
1.0
0.5
0.5
**
miR⁃484 mimic组
0
PPARγ C/EBPα FABP4 0 对照组 mimic NC组 mimic组
miR⁃484

将HPA细胞分为3组，miR⁃484 mimic组、mimic NC组分别转染miR⁃484 mimic及阴性对照空白质粒，对照组不转染。A：通过CCK⁃8实验
检测各组细胞的增殖能力；B：通过RT⁃qPCR实验检测细胞周期相关基因Cyclin D1、Cyclin D3和CDK4的mRNA相对表达量；C：人脂肪细胞油
红O染色图（×200）；D：通过RT⁃qPCR实验检测脂肪分化相关基因PPAR γ、C/EBP α和FABP 4的mRNA相对表达量；E：各组细胞甘油三酯含量
的测定。与对照组及mimic NC组相比，P＜0.05，P＜0.01（n=3）。
**
*
图2 miR⁃484抑制HPA的增殖分化
Figure 2 miR⁃484 inhibits HPA proliferation and differentiation