Page 23 - 南京医科大学学报自然科学版

第42卷第3期 南京医科大学学报（自然科学版）
2022年3月 Journal of Nanjing Medical University（Natural Sciences） ·325 ·

·基础研究·

MiR⁃484通过靶向MAPK8抑制人前体脂肪细胞的增殖与分化

仲逢钰，秦振英，李 婧，田 甜，牟雨虹，田慧琴，胡幼芳 *
南京医科大学第一附属医院儿童保健科，江苏 南京 210029

［摘 要］ 目的：探讨miRNA⁃484在肥胖发生中的作用及其临床意义。方法：利用RT⁃qPCR 、CCK⁃8法、油红O染色及甘油三
酯定量检测研究miR⁃484对人脂肪细胞增殖及成脂分化的作用。运用Targetscan7.2对miR⁃484的下游靶基因进行预测分析，并使
用双荧光素酶实验验证miR⁃484与靶基因的结合，使用Western blot及RT⁃qPCR验证miR⁃484对靶基因的作用。结果：miR⁃484在
人脂肪细胞分化成熟过程中逐渐低表达。过表达miR⁃484抑制人前体脂肪细胞的增殖及分化，而沉默miR⁃484与过表达作用
相反。生物信息学预测发现MAPK8是miR⁃484的下游靶基因，且miR⁃484可抑制其mRNA及蛋白表达，同时过表达MAPK8可
部分挽救miR⁃484对人前体脂肪细胞增殖分化的抑制。结论：miR⁃484可以通过抑制MAPK8的表达从而抑制人前体脂肪细胞
的增殖与成脂分化。
［关键词］ miR⁃484；人前体脂肪细胞；增殖；成脂分化；肥胖

［中图分类号］ R589.2 ［文献标志码］ A ［文章编号］ 1007⁃4368（2022）03⁃325⁃08
doi：10.7655/NYDXBNS20220303

MiR⁃484 inhibits human pre⁃adipocyte differentiation and proliferation by targeting MAPK8

ZHONG Fengyu，QIN Zhenying，LI Jing，TIAN Tian，MU Yuhong，TIAN Huiqin，HU Youfang *
Department of Child Health Care，the First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University，Nanjing 210029，China

［Abstract］ Objective：This study aims to investigate the role of miR⁃484 in adipogenesis and its clinical potentiality. Methods：To
explore the function of miR⁃484 in human pre⁃adipocyte（HPA）differentiation and proliferation，RT⁃qPCR，CCK⁃8，red oil staining and
triglyceride content assays were conducted. Additionally，a dual⁃luciferase reporter assay demonstrated MAPK8，which predicted by
Targetscan7.2，was a direct target gene of miR⁃484 during preadipocyte differentiation，and the results were confirmed by RT⁃qPCR
and Western blot. Results：The miR⁃484 was down⁃regulated during HPA differentiation. The miR⁃484 inhibited the proliferation and
differentiation in HPA，and silencing miR⁃484 had the opposite effects. A dual⁃luciferase reporter assay demonstrated MAPK8 was a
direct target gene of miR⁃484. Additionally，over expression of MAPK8 could reserve the negative effect of miR⁃484 on differentiation
and proliferation of pre⁃adipocytes. Conclusion：MiR⁃484 could inhibit HPA differentiation and proliferation by targeting MAPK8.
［Key words］ miR⁃484；human pre⁃adipocyte；proliferation；adipogenic differentiation；obesity
［J Nanjing Med Univ，2022，42（03）：325⁃332］

世界卫生组织报道，自 1975 年以来，全球肥胖 代谢紊乱相关疾病的发生，如2型糖尿病、非酒精性
人数几乎增加了两倍，现共有 6 000 万 5 岁以下儿 脂肪肝和心血管疾病 ［2- 3］ 。脂肪组织不仅是储能器
童患上肥胖症，肥胖已成为一个严重的公共健康问 官，为人体的生命活动提供能量，也是人体重要的
［1］
题 。肥胖以脂肪大量堆积为特征，并可导致多种 内分泌器官，可分泌多种细胞因子，具有重要生理
功能 ［4- 5］ 。然而，由于能量摄入与消耗的不平衡，大
量能量以甘油三酯的形式储存，脂肪组织迅速膨
［基金项目］ 国家自然科学基金（81700707）；江苏省妇幼健
胀，脂肪组织的扩张将导致炎性细胞因子分泌增
康科研项目面上项目（F201804）
加，并减少瘦素和脂联素等抗炎蛋白的分泌，从而
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通信作者（Corresponding author），E⁃mail：13182823903@163.
com 导致代谢紊乱 ［6-7］ 。因此，深入研究脂肪组织的生成