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第42卷第3期 仲逢钰，秦振英，李 婧，等. MiR⁃484通过靶向MAPK8抑制人前体脂肪细胞的增殖与分化［J］.
2022年3月 南京医科大学学报（自然科学版），2022，42（03）：325-332 ·331 ·

A B C
NC组 NC组
1.5 miR⁃484 mimic组 miR⁃484 mimic组
miR⁃484+MAPK8组 2.0 miR⁃484+MAPK8组
nm ） 1.0 ** 1.5 ## NC组
（ 450 D 0.5 # mRNA的相对表达量 1.0 ** ## * #

0.0 0.5 **
0 h 24 h 48 h 0.0
Cyclin D1 Cyclin D3 CDK4
D E mimic组
NC组
miR⁃484 mimic组
miR⁃484+MAPK8组 甘油三酯相对水平 1.5 ## miR⁃484
1.0
1.5
mRNA的相对表达量 1.0 ** ## ** ** ## 0.5 NC组 **
##

0.0
0.5
miR⁃484+MAPK8组
0.0
PPAR γ C/EBP α FABP 4 miR⁃484 mimic组 miR⁃484+MAPK8组

将HPA细胞分为3组，NC组、miR⁃484 mimic组和miR⁃484 +MAPK8组分别转染阴性对照空白质粒（NC）、miR⁃484 mimic和miR⁃484 mimic
+MAPK8 mimic。A：通过CCK⁃8实验检测各组细胞的增殖能力；B：通过RT⁃qPCR实验检测细胞周期相关基因Cyclin D1、Cyclin D3和CDK4的
mRNA相对表达量；C：人脂肪细胞油红O染色图（×200）；D：通过RT⁃qPCR实验检测脂肪分化相关基因PPAR γ、C/EBP α和FABP 4的mRNA相
对表达量；E：各组细胞甘油三酯含量测定。与NC组相比，P＜0.05，P＜0.01（n=3）；与miR⁃484 mimic组相比，P＜0.05，P＜0.01（n=3）。
#
**
*
##
图6 过表达MAPK8部分挽救miR⁃484对HPA增殖分化的抑制作用
Figure 6 Overexpression of MAPK8 partially rescued the function of miR⁃484 on HPA proliferation and differentiation
分 化 基 因 PPARγ、C/EBPα 和 FABP4 表 达 呈 负 相 其可以逆转过表达miR⁃484抑制HPA细胞增殖及分
关。PPARγ和 C/EBPα是脂肪分化过程中发挥核 化的作用。结合既往研究及本研究结果，MAPK8可
心作用的转录因子，FABP4 促进脂肪酸增溶、运输 能是miR⁃484的靶基因。
和新陈代谢。本研究进一步对 HPA 进行了油红 O 综上所述，本研究发现miR⁃484在HPA分化过程
染色和甘油三酯检测，发现 miR⁃484 与脂滴生成负 中低表达，并通过进一步的功能实验，证实了miR⁃484
相关。因此认为 miR⁃484 可以调控脂肪细胞的分 抑制 HPA 的增殖与分化，该作用可能是通过靶
化和增殖。 向 MAPK8 来实现。本研究也存在一些缺点，例如
本研究中也对miR⁃484抑制HPA增殖与分化的 miR⁃484 预测的相关靶基因较多，我们只关注了
机制进行了探讨。miRNA 是内源性小 RNA，通过 MAPK8，因为其属于胰岛素信号通路，且相关研究
与蛋白质编码基因的 mRNA 配对来指导其转录后 表明其与肥胖相关，后期仍需采取转录组学等手
抑制，从而发挥重要的基因调节作用。通过在线生 段进一步研究相关机制。因此，本研究结果提示
信分析发现MAPK8可能是miR⁃484的靶基因，并通 miR⁃484在肥胖中发挥关键作用，miR⁃484可能是肥

过双荧光素酶报告实验确认了 miR⁃484 与 MAPK8 胖诊断与治疗的一个靶点。
具有相应的结合位点，同时过表达 miR⁃484 可以抑 ［参考文献］
制MAPK8的表达。MAPK8 是蛋白丝裂激酶家族的
［1］ JIANG S Z，LU W，ZONG X F，et al. Obesity and hyper⁃
成员，充当多种生物化学信号的集成点，如胰岛素
tension［J］. Exp Ther Med，2016，12（4）：2395-2399
信号通路，并且涉及各种细胞过程，例如增殖、分
［2］ PICHÉ M E，TCHERNOF A，DESPRÉS J P. Obesity phe⁃
化、转录调控和发育 ［21-22］ 。Osawa 等 ［23］ 发现 MAPK8 notypes，diabetes，and cardiovascular diseases［J］. Circ
与胰岛素抵抗相关，MAPK8 活性在肥胖的胰岛素抵 Res，2020，126（11）：1477-1500
抗小鼠中增加，而敲除MAPK8的小鼠显示肥胖减少 ［3］ 赵晨曦，龚颖芸，潘瑞蓉，等. 总胆固醇与高密度脂蛋白
和胰岛素敏感性提高。本研究过表达MAPK8，发现 胆固醇比值与肝脏脂肪变的相关性研究［J］. 南京医科