Page 37 - 南京医科大学学报自然科学版

第42卷第4期 吴汉章，陈 铖，谢彩蝶，等. miR⁃192⁃5p通过靶向Notch3减轻顺铂所致的肾小管上皮细胞
2022年4月 凋亡［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2022，42（4）：484-490 ·487 ·

A 空白对照组 顺铂组
Q1 Q2 4 Q1 Q2
4
10 1.72% 1.76% 10 0.667% 2.58% 15
**
10 3 10 3 （ % ）
FL3⁃H∷PI 10 2 FL3⁃H∷PI 10 2 细胞凋亡率 10

10 1 10 1 5
Q4 Q3 Q4 Q3
10 0 94.7% 1.86% 10 0 89.7% 7.03% 0
3
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 10 4 空白对照组 顺铂组
FL1⁃H∷Annexin V⁃FITC FL1⁃H∷Annexin V⁃FITC
空白对照组 顺铂组
Notch3蛋白相对相对表达量 2 Cleaved⁃caspase3蛋白相对表达量 1.0
B
Notch3 280 kDa 4 3 *** 2.0 *
1.5
36 kDa
GAPDH
17 kDa 1 0.5
Cleaved⁃caspase3
GAPDH 36 kDa 0 空白对照组 顺铂组 0 空白对照组 顺铂组
mRNA相对表达量 2
C 3 ***

Notch3 1

0
空白对照组 顺铂组
A：各组细胞凋亡率比较（流式细胞术）；B：各组Notch3、cleaved⁃caspase3蛋白表达水平比较（Western 印迹）；C：各组Notch3 mRNA表达水
平（实时定量 PCR）；顺铂处理组（20 μmol/L，24 h）；与空白对照组比较，P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001（n=3）。
*
**
***
图1 顺铂处理后HK⁃2细胞Notch3及cleaved⁃caspase 3表达情况
Figure 1 The expression of Notch3 and cleaved⁃caspase3 in HK⁃2 cells after cisplatin treatment

A Human NOTCH3 ENST00000263388，，2 3’’UTR length：：1646 ENST00000263388.2
45

0.1k 0.2k 0.3k 0.4k 0.5k 0.6k 0.7k 0.8k 0.9k 1k 1.1k 1.2k 1.3k 1.4k 1.5k
Conscrvcd sitcs for miRNA familics broadly conscrved among vcrtchratcs
miR⁃7⁃5p miR⁃150⁃5p
miR⁃1⁃3p/206
Poorly conserved sites of miRNA families broadly conserved among vertebrates miR⁃141⁃3p/200a⁃3p miR⁃24⁃3p miR⁃219⁃5p miR⁃1
miR⁃192⁃5p/215⁃5p miR⁃27⁃3p miR⁃34⁃5p/449⁃5p miR⁃129⁃3p miR⁃125⁃5p miR⁃1⁃3p/2p
miR⁃214⁃5p
miR⁃31⁃5p
Conserved sites for miRNA families conserved among mammals
miR⁃340⁃5p miR⁃381⁃3p
miR⁃136⁃5p
B C 1.5
total elements 1.0
预测 下调 11 miR⁃ 26a⁃1⁃3p、miR⁃ 151a⁃3p、 miR⁃192⁃5p相对表达量
miR⁃4510、miR⁃194⁃5p、miR⁃206、 **
525 11 65 0.5
miR⁃ 4482⁃3p、miR⁃ 26a⁃ 2⁃3p、
miR⁃660⁃5p、miR⁃582⁃3p、miR⁃
192⁃5p、miR⁃194⁃3p 0
空白对照组 顺铂组
A：Notch3预测图示（Targetscan平台）；B：潜在靶向Notch3的miRNA的筛选；C：顺铂（20 μmol/L，24 h）处理肾小管上皮细胞后miR⁃192⁃5p
的表达检测（实时定量PCR）。与空白对照组比较，P < 0.01（n=3）。
**
图2 靶向Notch3的潜在miRNA的预测和检测
Figure 2 Gene prediction and verification of possible miRNAs targeting to Notch3