Page 19 - 南京医科大学学报自然科学版

第42卷第5期 俞 灏，周子皓，张南南，等. Bmal1调控T型钙离子通道对慢性心衰室性心律失常昼夜节律的影响［J］.
2022年5月 南京医科大学学报（自然科学版），2022，42（05）：611-618 ·615 ·

组小鼠（CHF+MIB）在 CT0+CT12 两时间点 VA 的总 2.4 CHF小鼠心脏TTCC及Bmal1表达具有昼夜节律
发生率明显下降（P＜0.05，图 4B）。在 3 组小鼠中， 收取 48 h CHF 小鼠左心室组织标本，使用
CT0 时间点 VA 的发生率均高于 CT12，在 CHF 组小 Western blot 及 qRT⁃PCR 检测心肌组织 TTCC（α1G，
鼠中有统计学差异（P＜0.05，图4B），提示在慢性心 α1H）及Bmal1节律表达情况。在48 h内，JKT cycle
衰小鼠中，VA 发生率有昼夜差异。以上结果表明， 分析提示 CHF 组小鼠的 TTCC（α1G，α1H）及 Bmal1
在CHF小鼠中，VA发生率明显增加，且存在昼夜节 蛋白表达均有节律性变化（P＜0.05，图5B~D），其周
律差异，使用MIB后VA发生率明显减少。 期及相位一致，周期为24，相位为0。JKT cycle分析

A B
$
标准刺激程序 100 * CT0
（ % ） 80 CT12
60
VA发生率 40 *#

20
0
心 室 颤 动
CON CHF CHF+MIB

室性心动过速

A：程序性电刺激典型图片；B：各组 VA 发生率统计图，CHF 小鼠 VA 发生率明显增加，且有昼夜差异，使用 MIB 后，总 VA 发生率（CT0+
CT12）较CHF组明显降低。与CON中相同时间点比较，P < 0.05；与CHF中CT0组比较，P < 0.05；CHF（CT0+CT12）与CHF+MIB（CT0+CT12）
#
*
比较，P < 0.05（n=10）。
$
图4 CON组、CHF组及CHF+MIB组VA发生率及节律变化的比较
Figure 4 Comparison of VA incidence and rhythm changes between CON group，CHF group and CHF＋MIB group
qRT ⁃ PCR 结 果 提 示 ，TTCC（α1G，α1H）及 Bmal1 1H）通道重新高表达且呈昼夜节律性变化。使用
mRNA 亦有节律性变化（P＜0.05，图5E~G），其周期 PES 诱导 CHF 小鼠 VA 发作，提示 VA 发生率与
一致，均为 24，但相位不同，TTCC 为 20，Bmal1 为 TTCC（α1G，α1H）重新高表达有关，使用 TTCC 阻滞
0。因Bmal1作为转录因子，调控下游转录可能存在 剂可减少 CHF 小鼠 VA 的发作。本研究第一次发
延迟，所以TTCC表达的节律性可能与Bmal1节律表 现，Bmal1 作为转录因子可直接结合在 TTCC（α1G，
达有关。 α1H）启动子区域的E⁃box位点，启动TTCC转录。
2.5 Bmal1直接参与调控T型钙离子通道转录 慢性心力衰竭是各种心脏疾病的严重表现或
ChIP 结果显示，Bmal1 与α1G、α1H 和阳性参照 晚期阶段，死亡率和再住院率居高不下，给患者、家
组（PP）启动子区域结合的富集指数相对于阴性参 庭及社会造成了严重的经济负担 ［15］ 。国内一项对
照组（PN）明显增加，具有统计学差异（P＜0.05，图 10 714 例住院心衰患者的调查数据显示，1980、
6B~C）。同时使用 IgG 作为阴性对照，排除启动子 1990、2000 年心衰患者住院期间死亡率分别为
区域的非特异性结合。以上结果提示，Bmal1 可通 15.4%、12.3%和6.2%，心衰患者死亡原因依次为泵衰
［16］
过与 TTCC 启动子区域的 E⁃box 位点结合从而调控 竭（59%）、心律失常（13%）和心脏性猝死（13%） 。
其转录。 因此，VA/SCD 是心力衰竭病人死亡的主要原因之
一 ［3，15-16］ 。在本研究中，和正常对照组（CON）相比，
3 讨 论
CHF 小鼠心脏呈心衰表现（心肌细胞体积增大，纤
本研究主要发现，在CHF小鼠中，TTCC（α1G，α 维化增多，EF 值降低），程序性电刺激后 CHF 小鼠