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第42卷第6期 钱祝银，余建和，程 志，等. 消融联合化疗和单纯化疗在Ⅳ期胰腺癌治疗中的临床和实验研究［J］.
2022年6月 南京医科大学学报（自然科学版），2022，42（06）：849-853 ·851 ·

ICCH：术中超声引导下将直径为 2.6 mm 消融 1.2.4 细胞活力检测
探针精准穿刺至瘤体的最远端，通过液氮制冷效 MIA PaCa⁃2 人胰腺癌细胞使用 1.2.3 相同方
应，将靶区组织冷冻至-196 ℃左右，冷冻时间 6~ 法接种于 Boyden 小室的上室，冷冻组细胞液氮冷
10 min，通过酒精蒸气的热效应，复温至80 ℃，视为 冻 3 min，对照组细胞正常培养，迅速加入或更换新
1个周期；再重复1次上述治疗，共2个周期，分段充 鲜的含 10%胎牛血清的培养液，置于 37 ℃ 5% CO2
分复温8 min，超声监测冰球融化，拔出探针。 细胞培养箱中常规培养 48 h。随后，使用 CCK⁃8 检
术后胰瘘、胃排空延迟、术后出血等并发症的诊 测试剂盒（苏州美仑生物）检测细胞活力。弃去
断和分级按国际胰腺外科小组（ISGPS）的定义 ［4-6］ ， 原培养基，加入含有 10% CCK⁃8 增强液的培养
并检测糖类抗原 19⁃9（carbohydrate antigen 19⁃9， 基，继续培养 4 h 后，分光光度计测定 450 nm 下吸
CA19⁃9）、总 胆 红 素（total bilirubin，TB）、白 蛋 白 光度。
（albumin，ALB）、血糖等相关指标。 1.3 统计学方法
1.2.3 胰腺癌细胞渗透性实验 使用SPSS 23.0进行统计学分析，正态分布的定
MIA PaCa⁃2 人胰腺癌细胞用含有 10%胎牛血 量资料用均数±标准差（x ± s）表示，组间比较采用方

清和青霉素/链霉素抗性的 DMEM 培养液在 37 ℃ 差分析；非正态分布的定量资料用中位数（四分位
5% CO2细胞培养箱中常规培养。胰腺癌细胞经消 数）［M（P25，P75 ）］表示，组间比较采用 Mann⁃Whitney
化、离心后，弃去原培养液，细胞接种于8.0 μm孔径 U检验。使用GraphPad Prism 9绘制生存曲线，组间
的Boyden小室，小室膜分为上下两室，中间有1层基 比较采用 Log⁃Rank（Mantel⁃Cox）检验。P < 0.05 为
质胶包被的聚乙烯膜。在小室的下室加入含 10% 差异有统计学意义。
胎牛血清的培养液500 μL，而在上室中加入细胞混
2 结 果
悬液 200 μL，避免产生气泡，然后继续放于培养箱
培养过夜。冷冻组细胞，弃去Boyden小室中的培养 2.1 Ⅳ期胰腺癌患者化疗与消融的临床指标评价
液，迅速加入液氮于上室以冷冻细胞，待液氮完全 检测结果显示，消融组治疗后TB显著低于化疗组
挥发后，加入含10%胎牛血清的培养液；同时，弃去 ［14.3（8.9，18.7）μmol/L vs. 105.9（19.1，248.0）μmol/L，
对照组Boyden小室中的培养液，更换新鲜的含10% Z=- 3.106，P=0.002］，而 ALB 显 著 高 于 化 疗 组
胎牛血清的培养液。两组细胞均继续培养2 h，弃去 ［33.6（30.7，63.8）μmol/L vs. 29.7（27.1，31.1）μmol/L，
Boyden小室中的培养液，加入相同体积的磷酸盐缓 Z=-2.718，P=0.007］。两组CA19⁃9在治疗前后差异
冲液（PBS），在上室中加入 0.1%结晶紫。分别于加 无统计学意义；消融组治疗前后的白细胞数和中性
入结晶紫后 1、3、5 min 收集下室液体，检测 590 nm 粒细胞百分比均低于化疗组（P < 0.05）；消融组治疗
下吸光度值。 前血小板数高于化疗组（P < 0.05，表1）。
表1 化疗组与消融组Ⅳ期胰腺癌患者治疗前后相关指标比较
Table 1 The comparision of the indexes of patients with stage Ⅳ pancreatic cancer between chemotherapy and ablation
group before and after treatment ［M（P25，P75 ）］
化疗组（n=13） 消融组（n=14）
指标
治疗前 治疗后 P值 治疗前 治疗后 P值
CA19⁃9（U/mL） 1 000.0（717.1，4 931.3） 1 759.5（107.2，4 704.3） 1.000 232.3（19.9，994.7） 237.9（12.6，777.4） 0.734
白细胞（×10 个/L） 15.31（10.11，19.73） 15.26（9.66，21.81） 0.898 6.81（5.31，7.78） * 8.72（5.94，10.94） # 0.225
9
中性粒细胞（%） 76.99（70.21，80.00） 81.00（76.12，87.00） 0.174 60.96（57.66，63.39） * 72.64（63.43，80.03） # 0.013
红细胞（×10 个/L） 3.54（3.06，3.95） 2.73（2.50，2.99） 0.003 3.20（2.82，3.50） 2.86（2.15，3.52） 0.386
12
血红蛋白（g/L） 95.77（83.00，103.00） 87.77（72.00，97.00） 0.174 97.67（87.25，109.50） 100.83（93.75，115.25） 0.470
血小板（×10 个/L） 133.38（105.00，147.00） 130.85（102.00，151.00） 0.778 165.25（144.25，201.00） 162.25（136.25，190.75） 0.954
9
*
尿素（mmol/L） 6.97（3.67，8.7.00） 7.10（3.82，9.26） 0.939 6.61（4.27，7.73） 6.69（3.99，7.89） 0.908
钾（mmol/L） 3.96（3.66，4.11） 4.00（3.83，4.08） 0.758 3.85（3.68，4.06） 3.85（3.68，3.98） 0.840
丙氨酸氨基转移酶（U/mL） 16.24（9.80，15.70） 16.30（10.50，16.15） 0.959 16.38（9.24，21.27） 17.17（9.75，22.60） 1.000
天冬氨酸氨基转移酶（U/mL） 27.73（15.20，37.80） 27.56（13.40，36.11） 0.939 18.89（13.03，24.73） 19.33（13.58，25.18） 0.885
与化疗组治疗前比较，P < 0.05；与化疗组治疗后比较，P < 0.05。
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