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第42卷第7期 边苏苏，陈玉凤，张雯晴，等. PLOD2对卵巢癌奥沙利铂化疗耐药的影响及机制研究［J］.
2022年7月 南京医科大学学报（自然科学版），2022，42（7）：903-912，1000 ·907 ·

2.3 shPLOD2 质粒和OEPLOD2质粒的转染效率 E），OEPLOD2 组细胞的 PLOD2 蛋白表达水平较
慢病毒表达载体pPLK/GFP+Puro和pLenti⁃CMV⁃ OEControl组明显上调（P < 0.01，图3D、F）。
GFP⁃Puro 带有绿色荧光蛋白（GFP）基因，可以通过 2.5 CCK⁃8 法检测 PLOD2 干扰或过表达对奥沙利
观察绿色荧光来评估转染效率。shPLOD2 组和 铂作用下卵巢癌细胞增殖抑制的影响
shControl 组的荧光较空白对照组有显著升高，转染 结果显示，在奥沙利铂相同药物浓度作用条件
效率 > 90%（图 2A）。OEPLOD2 组和 OEControl 组 下，shPLOD2 组细胞较 shControl 组增殖抑制能力增
的荧光较空白对照组有显著升高，转染效率 > 90% 强（图 4A），半数抑制浓度 IC50 由（1.444 ± 0.149）
（图2B）。 μmol/L 下降至（0.536±0.026）μmol/L（P < 0.001）。
2.4 shPLOD2质粒的干扰效果和OEPLOD2质粒的 同时，OEPLOD2 组细胞较 OEControl 组增殖抑制能
过表达效果 力减弱（图 4B），IC50由（0.890 ± 0.048）μmol /L 升高
qRT ⁃ PCR 结 果 表 明 ，在 shPLOD2 细 胞 株 中 至（4.341 ± 0.289）μmol /L（P < 0.001）。
PLOD2 mRNA 表 达 水 平 较 shControl 组 明 显 下 降 2.6 克隆形成试验检测 PLOD2 干扰或过表达对奥

（P < 0.01，图 3A），OEPLOD2 细 胞 株 中 PLOD2 沙利铂作用下卵巢癌细胞增殖的影响
mRNA表达水平较OEControl 组明显升高（P < 0.01， 结果显示，在奥沙利铂处理条件下，shPLOD2
图 3B）。Western blot 检测各组细胞中 PLOD2 蛋白 细胞较 shControl 细胞集落形成明显减少，分别为
表达，结果显示，shPLOD2 组细胞的 PLOD2 蛋白表 （19±3）个和（41 ± 4）个（P < 0.01，图 5A），OEPLOD2
达水平较 shControl 组明显下调（P < 0.01，图 3C、 细胞较 OEControl 细胞集落形成明显增加，分别为

A
对照组 shControl组 shPLOD2组

明视野

荧光视野

B 对照组 OEControl组 OEPLOD2组

明视野

荧光视野

A：荧光显微镜下观察干扰及其对照组绿色荧光蛋白表达（×100）；B：荧光显微镜下观察过表达及其对照组绿色荧光蛋白表达（×100）。
图2 PLOD2干扰和过表达质粒的转染效率
Figure 2 Transfection efficiency of PLOD2 interference and overexpressed plasmids