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第42卷第7期          边苏苏，陈玉凤，张雯晴，等. PLOD2对卵巢癌奥沙利铂化疗耐药的影响及机制研究［J］.
                  2022年7月                   南京医科大学学报（自然科学版），2022，42（7）：903-912，1000                     ·911 ·


                A      1.5                 shControl   B    1.5   **            OEControl
                     mRNA相对表达量  1.0  *  ***  shPLOD2       mRNA相对表达量  1.0  **   OEPLOD2



                                                            0.5
                       0.5
                        0
                           BCRP     MRP1                     0   BCRP     MRP1

                 C                               D                             E
                          shControl  shPLOD2             shControl  shPLOD2
                                                                                    2.0           *     shControl
                                                                                  蛋白相对表达量  0.5
                     BCRP                 72 kDa   MRP1                 190 kDa     1.5  ***            shPLOD2

                    GAPDH                 37 kDa  GAPDH                 37 kDa       0
                                                                                         BCRP    MRP1
                F                                F                             H
                          OEControl  OEPLOD2            OEControl  OEPLOD2
                                                                                    0.8   **            OEControl
                                                                                  蛋白相对表达量  0.4
                     BCRP                 72 kDa   MRP1                 190 kDa     0.6           ***   OEPLOD2

                    GAPDH                                               37 kDa      0.2
                                          37 kDa  GAPDH                              0
                                                                                         BCRP    MRP1

                   A：qRT⁃PCR检测结果表明在干扰PLOD2后BCRP和MRP1 mRNA表达水平明显下调；B：qRT⁃PCR检测结果表明在过表达PLOD2后BCRP
                和 MRP1 mRNA 表达水平明显上调；C、D：免疫印迹实验检测结果表明在干扰 PLOD2 后 BCRP、MRP1 蛋白表达水平的变化；E：直方图定量
                分析；F、G：免疫印迹实验检测结果表明在过表达 PLOD2 后 BCRP、MRP1 蛋白表达水平的变化；H：直方图定量分析。两组比较，P < 0.05，
                                                                                                         *
                 P < 0.01， P < 0.001，n=3。
                **     ***
                                  图8 PLOD2对奥沙利铂作用下的卵巢癌细胞BCRP、MRP1表达水平的影响
                      Figure 8 Effects of PLOD2 on BCRP，MRP1 expresssions of ovarian cancer cells under oxaliplatin treatment


                达相关   ［14］ 。除此之外，PLOD2可能通过促进EMT相                  细胞比OEControl细胞集落形成能力增强，细胞凋亡
                关蛋白的表达，激活 FAK⁃PI3K/AKT 以及 MAPK 信                  率降低。这些结果表明，PLOD2对在奥沙利铂作用
                号通路诱导奥希替尼耐药            ［15］ 。但是关于 PLOD2 在         下的卵巢癌细胞有促进增殖和抑制凋亡的作用。
                卵巢癌奥沙利铂耐药中的作用，目前知之甚少。                             值得注意的是，在无奥沙利铂作用条件下，shPLOD2
                    本文选择卵巢癌 PLOD2 高表达细胞株 A2780                    组与shControl 组克隆形成能力、凋亡率无统计学差
                和低表达细胞株OV1063，通过慢病毒转染shPLOD2                      异，这一点在 OEPLOD2 和 OEControl 细胞株上也得
                和 OEPLOD2 质粒，探讨 PLOD2 对卵巢癌奥沙利铂                    到了验证。通过将 shPLOD2 细胞和 shControl 细胞
                化疗耐药的影响及机制。结果显示，干扰组细胞中                            接种到裸鼠皮下，发现在奥沙利铂处理条件下，
                PLOD2的mRNA 和蛋白表达显著下降，而过表达组                        shPLOD2 组 的 肿 瘤 体 积 和 瘤 重 均 小 于 shControl
                PLOD2的mRNA 和蛋白表达显著升高，表明已成功                        组。上述研究结果提示，PLOD2可增强奥沙利铂诱
                构建了卵巢癌干扰和过表达的稳转株 shPLOD2⁃                         导的卵巢癌细胞的耐药性。据已有报道，PLOD2可
                A2780和OEPLOD2⁃OV1063。                             促进结肠癌的增殖          ［16］ ，但对非小细胞肺癌和胶质
                    CCK⁃8 实验证实，在奥沙利铂相同浓度作用条                       瘤、肉瘤的增殖没有影响           ［6，17-18］ ，同时对胃癌的凋亡

                件下，shPLOD2 组细胞增殖抑制率高于 shControl                   也没有影响     ［14］ ，这说明PLOD2在不同的肿瘤中所发
                组，IC50较 shControl 组下降；OEPLOD2 组细胞增殖               挥的作用是有差异的。
                抑制率低于OEControl组，IC50较OEControl升高。后                    ATP 结合盒转运蛋白，主要成员为 ABCB1P 糖
                续实验根据两种细胞株的 IC50，选取 1.25 μmol/L 为                 蛋白（P⁃glycoprotein，P⁃gp）、ABCC1（MRP1）、ABCG2
                                                                         ［19］
                奥沙利铂实验浓度。克隆形成和细胞凋亡实验证                            （BCRP） 。三者被认为是肿瘤化疗耐药性的重要
                实，在奥沙利铂处理条件下，shPLOD2细胞比shCon⁃                     调控因子，其导致耐药性的增强主要是通过药物泵
                trol细胞集落形成减少，细胞凋亡率增高；OEPLOD2                      出细胞膜，使得细胞内化疗药物浓度降低而实现
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