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第42卷第7期
               ·930 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2022年7月


                                                                刺激胰岛内皮细胞释放生长因子，激活β细胞中的
              3 讨    论
                                                                PI3K/AKT 信号以增加其增殖          ［16］ 。表皮生长因子通
                  妊娠是一个逐渐发生生理性胰岛素抵抗的过                           过 PI3K/AKT 和 MAPK 通路激活存活蛋白 survivin，
              程，正常情况下胰岛β细胞通过代偿性增殖来维持                            抑制β细胞凋亡       ［17］ 。这些过程和通路异常可能导致
              孕期的糖代谢平衡，而 IUGR 个体在胚胎期和新生                         IUGR小鼠孕期发生胰岛功能障碍。
              儿早期胰岛发育和功能出现损害，成年后是否能应                                 本研究发现 lncRNA Neat1、FTX 在小鼠怀孕后
              对妊娠这一代谢压力测试不得而知，目前关于                              表达量改变，并可能分别通过 MAPK 途径、PI3K/
              IUGR 孕期的 IUGR 小鼠研究未见报道。本研究首                       AKT途径影响小鼠孕期胰岛细胞增殖及功能，提示
              次对 IUGR 孕鼠胰岛转录组进行高通量测序分析，                         lncRNA 的表达在妊娠期这个特殊的时间段受到严
              为深入探究其发病机制提供理论基础。                                 格的调控。既往研究发现Neat1可以通过调节细胞
                  越来越多的报道显示 lncRNA 影响胰岛细胞的                      的增殖及凋亡，导致疾病的发生，如肿瘤、白血病及
              发育和功能、糖尿病的发生发展和 IUGR 的发病过                         糖尿病肾病      ［18］ 。研究证实，lncRNA Neat1 在宫内
              程。研究发现，lncRNA paupar 通过调控 pax6 促进                 发育迟缓模型的绒毛滋养细胞中表达上调                      ［19］ ，提
              了胰岛α细胞的发育和功能             ［10］ ；lncRNA hottip 通过   示 Neat1 与特发性 IUGR 胎儿的胎盘功能障碍有
              调节 p38⁃MAPK 通路改善糖尿病视网膜病变                ［11］ ；本   关，而 Neat1 在 IUGR 孕鼠胰岛发育、胰岛结构及功

              课题组前期研究表明，lncRNA TUG1 参与了 IUGR                    能维持中的作用及机制尚未见报道。lncRNA FTX
              致 2 型糖尿病胰岛功能损伤的过程                  ［1］ 。此外，       参与多种疾病的发生、发展，如lncRNA FTX 通过调
              lncRNA 在小鼠妊娠期不同阶段动态表达，其中                          节 miR⁃192⁃5p/EIF5A2 轴促进直肠癌的进展            ［20］ ，通
              lncRNA Gm16308（lnc03）促进小鼠妊娠期胰岛β细                  过海绵化 miRNA⁃22 调节 pten/PI3K/AKT 信号通路
              胞增殖   ［12］ ，而 lncRNA 表达谱的改变可诱发妊娠期                 而减少新生小鼠心肌细胞肥大                ［21］ ，但 FTX 在胰岛
              糖尿病   ［13］ ，Zhang 等 ［14］ 证明了 lncRNA MALAT1 在妊     中尚未被研究。本研究在 IUGR 孕鼠和正常孕鼠
              娠期糖尿病孕妇组血清中的表达水平高于正常孕                             胰岛中检测lncRNA Neat1和FTX 的表达水平，差异
              妇组。                                               有统计学意义。不同糖浓度刺激 min6 细胞后，发
                  本课题组前期实验结果显示：小鼠孕期存在胰                          现二者的表达受糖浓度影响，lncRNA这一特点可能
              岛增殖，但IUGR雌鼠孕期较正常小鼠孕期胰岛β细                          在IUGR孕鼠发生糖耐量异常过程中发挥作用。测
              胞增殖能力减弱，胰岛大小及数量增加较少，出现                            序结果还发现 lncRNA FTX 与其靶 mRNA 均为 trans
              糖耐量异常，为进一步探讨其发病原因，本研究对                            作用，lncRNA Neat1 与 Frmd8（mRNA）为 cis 作用，
              IUGR 孕鼠胰岛进行全转录组测序及分析，结果提                          余为 trans 作用，结合 lncRNA 和 mRNA 的互作分析
              示，差异lncRNA的靶mRNA、差异mRNA的GO分析                      （图 4A、5A、6A）可见，同一种 lncRNA 可以通过不
              中 BP 集中于细胞及组织过程、生物调节、代谢及应                         同的互作方式调控不同 mRNA 的表达，而同一种
              激过程，CC集中在细胞及器官、胞膜等过程，MF集中                         lncRNA 和同一种 mRNA 之间可以存在不同的互作
              于整合、催化活性、转运活性、分子功能调节等，这些                          方式，这是因为不同的作用方式在lncRNA和mRNA
              基因均可对IUGR妊娠期胰岛功能产生影响，如能量                          核苷酸链上所在的位置和区域不同。
              代谢、β细胞周期调节及胰岛素胞吐过程等变化。                                 文献表明，lncRNA 可能通过充当 miRNA 海绵
              KEGG 富集分析显示差异 lncRNA 的靶 mRNA、差异                   并调节 mRNA 转录后沉默而起到基因调节剂的作
              mRNA主要集中在代谢通路、癌症通路、次生代谢产                          用 ，本课题组正在实验验证测序结果中的互作关
                                                                  ［3］
              物的生物合成、PI3K⁃AKT通路及MAPK通路。这表                       系，若干扰或过表达 lncRNA 后，其靶 mRNA 的表达
              明 IUGR 孕鼠和正常孕鼠在合成代谢、分解代谢以                         量随之发生相应的变化，接下来再深入探讨其中是
              及癌症的发生发展方面存在差异。                                   否涉及lncRNA⁃miRNA⁃mRNA这一“海绵”作用。
                  PI3K/AKT、MAPK 通路在维持胰岛β细胞增殖                         本研究通过对IUGR孕鼠胰岛RNA进行高通量
              和存活方面起着关键作用。文献报道，催乳素受体                            测序，筛选出了 IUGR 孕鼠和正常孕鼠差异表达的
              和 PI3K（AKT、mTOR、p70S6K）通路、MAPK（MEK、               lncRNA 及 mRNA，并对差异 lncRNA 的靶 mRNA 进
              ERK1/2）通路参与大鼠妊娠期胰岛质量的增加和葡                         行GO、KEGG分析，为研究IUGR小鼠妊娠期发生胰
              萄糖敏感性的增强         ［15］ 。妊娠期胎盘生长因子可能                岛功能障碍提供了理论基础。在此基础上，进一步
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