Page 43 - 南京医科大学学报自然科学版

第42卷第7期 张潇月，郑 月，蒋 厅，等. ALCAT1缺失在KRAS诱导肺腺癌中的作用及机制研究［J］.
2022年7月 南京医科大学学报（自然科学版），2022，42（7）：932-940，972 ·939 ·

A B
2.0
* **
/Akt 1.5
CoCl2 （μmol/L） - - - - + + + +
Jenu（μmol/L） 0 2.5 5 10 0 2.5 5 10 （ T308 ） **
p⁃Akt（T308） 60 kDa 1.0
60 kDa p⁃Akt
Akt 0.5
β⁃actin 45 kDa
0
Jenu 0 10 0 10
- - + +
CoCl2
C D
80 20
** ** ** **
**
（ Fluro/μg protein） 40 （ mmol/L） 10
**
15
60

ROS 20 乳酸 5

0 0
Jenu 0 10 0 10 Jenu 0 10 0 10
- - + + - - + +
CoCl2 CoCl2
E F
1.5
**
**
** **
- + + + + + 1.0
CoCl2 （μmol/L）
Mito Q（μmol/L） - - 1 5 - - HIF1α/β⁃actin
- - - - 3 10
Jenu（μmol/L） 0.5
120 kDa
HIF1α
β⁃actin 45 kDa 0
- + + + + +
CoCl2
Mito Q - - 1 5 - -
Jenu - - - - 3 10
A：Western blot 检测蛋白 Akt（T308）磷酸化水平；B：通过 Image J 软件对 p⁃Akt（T308）、Akt 进行灰度分析；C：检测 A549 细胞中 ROS 水
平；D：检测 A549 细胞中乳酸产生；E：Western blot 检测 HIF1α蛋白表达；F：通过 Image J 软件对 HIF1α进行灰度分析。两组比较，P < 0.05，
*
P < 0.01（n=3）。
**
图5 抑制ALCAT1通过阻止ROS产生抑制HIF1α表达，减少糖酵解代谢，影响Akt磷酸化水平
Figure 5 Inhibition of ALCAT1 attenuated HIF1α expression by preventing ROS production，reduced glycolytic metabo⁃
lism，affected Akt phosphorylation levels

性 ［10］ 。本研究使用 CoCl2处理 A549 细胞诱导缺氧， 导的肺腺癌中的调节机制，本研究使用 Mito Q 有效
激活HIF1α，模拟实体肿瘤的缺氧微环境，不同浓度 清除线粒体ROS的产生，可以显著降低HIF1α表达，
的Jenu抑制ALCAT1表达，发现A549细胞在缺氧的 同时发现抑制 ALCAT1 也显著降低 HIF1α表达，提
条件下，ROS的产生水平增加，ALCAT1抑制显著降 示 ALCAT1 抑制剂与抗氧化剂有同样抑制效果，通
低缺氧条件下 ROS 的产生。并发现在缺氧条件下 过抑制 ROS 水平降低 HIF1α表达。本研究发现在

抑制ALCAT1减少糖酵解产物乳酸生成，改善A549 A549细胞中缺氧导致Akt 磷酸化水平增加，而抑制
细胞异常的代谢。为了进一步研究ROS在KRAS诱 ALCAT1显著降低Akt磷酸化，但并未发现抑制ROS