Page 48 - 南京医科大学学报自然科学版

第42卷第8期
·1090 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2022年8月

A B C
4 * 2.5 * TSP⁃4 0 h 24 h 48 h 72 h 106 kDa
TSP⁃4 mRNA 相对表达水平 3 2 1 * * TSP⁃4蛋白相对表达水平 1.5 * * GAPDH 36 kDa
2.0
1.0

0 0.5 0
0 h 24 h 48 h 72 h 0 h 24 h 48 h 72 h
检测HG诱导0、24、48、72 h的足细胞中TSP⁃4的相对表达水平。A：通过qRT⁃PCR检测TSP⁃4的mRNA水平；B、C：通过蛋白质印迹（B）及
其代表性灰色条带（C）检测TSP⁃4的蛋白表达水平。与对照组比较，P＜0.05（n=3）。
*
图1 HG呈时间依赖性诱导足细胞中TSP⁃4的表达
Figure 1 Upregulation of TSP⁃4 in HG⁃induced podocytes

A B
1.0 * 1.5
nm ） 0.8 * 阳性细胞比例 1.0 * *
0.6
（ 450 0.4 （ % Hoechst） 0.5
D
0.2 EDU
0 0
Control HG HG+si⁃NC Control HG HG+si⁃NC
HG+si⁃TSP⁃4
HG+si⁃TSP⁃4

C
Control HG HG+si⁃NC HG+si⁃TSP⁃4

D E
80 Control
2.5 * * *
* （ % ） 60 HG
细胞凋亡率 1.5 细胞周期 40 * * HG+si⁃TSP⁃4
2.0
HG+si⁃NC
1.0
20
0.5
0
0 G1 S G2
Control HG HG+si⁃NC
HG+si⁃TSP⁃4
足细胞采用空白对照、HG诱导、HG诱导+ si⁃NC转染或HG诱导+ si⁃TSP⁃4转染处理。A：CCK⁃8法检测细胞活力；B、C：EdU阳性细胞比例
和代表性图像（×200），其中EdU染色的细胞为红色，Hoechst 33342染色的细胞为蓝色；D：通过流式细胞术检查细胞凋亡；E：通过流式细胞术
检查G1、S和G2期的细胞周期分布。两组比较，P＜0.05（n=3）。
*
图2 干扰TSP⁃4抑制HG诱导的足细胞凋亡
Figure 2 Knockdown of TSP⁃4 inhibits HG⁃induced apoptosis in podocytes

步检查了 TSP⁃4 在 HG 诱导的足细胞炎症反应中的 的炎症反应。

潜在作用。HG 上调足细胞中 IL⁃1β、TNF⁃α和 IL⁃6 2.5 STAT3激活TSP⁃4的转录
的表达水平，并且应用 si⁃TSP⁃4 后它们的表达水平 使用 JASPAR 预测 TSP⁃4 启动子区域中的潜在
降低（图 4）。因此，干扰TSP⁃4可有效抑制HG诱导 结合位点与STAT3结合（数据未显示）。STAT3是一