Page 74 - 南京医科大学学报自然科学版

第42卷第8期
·1116 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2022年8月

的生物学功能，分别进行了CCK⁃8细胞活力检测实 测、干预、预防和控制对 PE 的发生和发展具有重
验（图 2B）、克隆形成实验（图 2C）及 EdU 实验（图 要意义 ［16］ ，普遍的国际共识是早期预防和早期干预
2D）。结果发现，与 si⁃NC 组相比，细胞增殖能力因 是管理 PE 的主要手段 ［17］ ，这就需要能有效预测 PE
circ_0005579 低表达而大大增加，差异均有统计学 发生的方法。因此，迫切需要进行研究来阐明PE的
意义（P＜0.05）。 发病机制，目前研究认为胎盘滋养层细胞侵入母体
2.4 hsa_circ_0005579 调控 HTR⁃8/SVneo 细胞的 蜕膜和子宫螺旋动脉重构功能障碍是 PE 的可能原
迁移及侵袭能力 因 ［18］ ，因此，为了探讨子痫前期的发病机制，研究PE
Transwell 实验（图 3A）结果显示，与 si⁃NC 组相 和非PE胎盘中的差异表达因子至关重要。
比，迁移和侵袭的 HTR⁃8/SVneo 细胞的数量可通过 环状 RNA 是一类新的由共价闭合环形成的内
hsa_circ_000559 的下调而增加。此外伤口愈合实 源性非编码RNA，已被证明能调节细胞功能并参与
验（图 3B）显示处理 16 h 后，沉默的 circ_0005579 可 调控多种疾病的进展 ［19］ 。近年来，越来越来的证据
促进 HTR⁃8/SVneo细胞的迁移速率。通过检测细胞 表明，环状 RNA 在 PE 的发展中起着至关重要的作
迁移标志物MMP2和MMP9的蛋白表达水平（图3C）， 用 ［20］ ，研究人员发现敲除 circLRRK1 能显著促进
发现干扰circ_0005579表达后，与对照组相比，MMP2、 HTR⁃8/SVneo细胞的增殖、迁移及侵袭能力 ［21］ ，体外
MMP9蛋白表达水平显著提高。以上结果均表明沉 细胞实验提示迁移标志物 MMP2、MMP9 蛋白表达
默circ_0005579对HTR⁃8/SVneo细胞的迁移和侵袭 水平升高，而 MMP2、MMP9 可以通过降解胎盘基底
能力起着促进作用，差异有统计学意义（P＜0.05）。 板和蜕膜中的胶原蛋白 ［22］ ，使滋养层细胞的侵入能
力增强，保证子宫螺旋动脉重构正常完成。然而，
3 讨 论
仍然有大量的环状RNA在PE中的潜在功能尚未被
PE是一种妊娠特异性疾病，严重影响母亲及其 很好地探究。
后代的短期或长期健康 ［15］ 。妊娠早期的有效预 本研究源于课题组前期通过高通量测序筛选

A B C
1.5 2.5 si⁃NC 150
*
hsa_circ_0005579 相对表达量 1.0 nm ） 2.0 *** si⁃NC 克隆数 100
si⁃circRNA
***
1.5
（ 450
1.0
50
0.5
D
0 0.5 0 0 20 48 72 0 si⁃NC si⁃circRNA
si⁃circ_0005579#3
si⁃NC
si⁃circ_0005579#2
si⁃circ_0005579#1 时间（h） si⁃circRNA

D
DAPI EdU Merge 80
**
（ % ） 60
细胞增殖率 20
si⁃NC 40

si⁃circRNA 0 si⁃NC si⁃circRNA

A：hsa_circ_0005579 沉默后 HTR ⁃ 8/SVneo 细胞中 hsa_circ_0005579 的 mRNA 表达水平；B：hsa_circ_0005579 沉默后的细胞活力；C：
*
hsa_circ_0005579 沉默后单个细胞的增殖能力；D：hsa_circ_0005579 沉默后细胞的 DNA 合成和细胞增殖能力（×200）。与 si⁃NC 组比较，P <
0.05，P < 0.01， P < 0.001。
***
**
图2 沉默hsa_circ_0005579促进HTR⁃8/SVneo细胞的增殖能力
Figure 2 Silencing hsa_circ_0005579 promotes the proliferation of HTR⁃8/SVneo cells