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第42卷第9期          王   莹,陈 晨,陈 刚. BMP⁃2缓释型PLGA微囊作为引导骨再生支架的初步研究[J].
                  2022年9月                    南京医科大学学报(自然科学版),2022,42(09):1216-1222                      ·1219 ·


                A                       B                        C
                                                                            ×100                   ×200
                                          18
                                          16
                                          ( % )  12
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                                          比例  8 6
                                           4
                                           2
                                           0
                                           0.01  0.1  1  10  100  1 000 3 000
                                                   粒径(μm)
                         A:光学显微镜下观察包封0.1%亚甲蓝的PLGA微囊(×100);B:PLGA微囊粒度分析结果;C:SEM观察PLGA微囊。
                                             图2 双通道微量注射泵制备的PLGA微囊表征
                        Figure 2 The characterizations of PLGA microspheres prepared by dual⁃channel micro⁃syringe pump

                壁的PLGA微囊大小均一,表面光滑,粒径均值无明                          过程中囊壁厚薄不同未见对微囊的降解速率产生
                显差异,约为167.58 μm。                                  明显影响。
                2.2  PLGA微囊囊壁厚度分析                                 2.4  PLGA微囊细胞相容性检测结果
                    荧光显微镜下两组囊壁厚度的 PLGA 微囊(图                           图 5 可见细胞培养第 7 天时加入 PLGA 微囊的
                3A 、B),图像处理软件Image J测量微球囊壁厚度统                     实验组与对照组的细胞均能正常增殖,并且细胞可
                计结果显示:A 型同轴针头制备的 PLGA 微囊囊壁                        黏附到 PLGA 微囊表面;CCK⁃8 实验结果显示细胞
                厚度为(23.82±7.10)μm;B型同轴针头制备的PLGA                   从1、3、5、7 d都表现出增长趋势,且加入PLGA微囊
                微囊的囊壁厚度为(35.31±5.55)μm,B 型针头制备                    浸提液培养后细胞活力与对照组基本无差异(1、3、
                的 PLGA 微囊囊壁厚度明显大于 A 型同轴针头,差                       7 d时,P > 0.05)。
                异具有统计学意义(P < 0.001,图3C、D)。                        2.5  细胞趋化实验
                2.3  PLGA微囊的降解                                        趋化实验结果显示(图6),与空白组相比,两组
                    两种厚度 PLGA 微囊均可在 60 d 左右基本降                    载有 BMP⁃2 的微囊作用 24 h,诱导细胞迁移量明显
                解,SEM观察其不同时间点的微囊形态变化,35 d后                        增多,差异有统计学意义。而载有 BMP⁃2 的薄型
                PLGA 微囊在 SEM 镜下基本丧失其原本特征(图                        PLGA微囊24 h内诱导细胞迁移的量也明显多于厚
                4A)。PLGA 微囊降解动力学变化(图 4B),随着时                      型PLGA微囊,差异有统计学意义(P < 0.05)。
                间的推移,PLGA微囊质量逐渐减少,最初20 d微囊
                                                                  3  讨 论
                降解速度较慢,20 d之后微囊降解速度加快,降解末
                期 42 d 以后降解速度减慢直至降解完成。降解全                             传统乳液挥发法制备的PLGA微囊多用作缓释


                 A                          C                                D
                                               60                                60


                                              ( 个 )  40                         ( 个 )  40
                                              微囊计数                              微囊计数



                 B                             20                                20

                                                0                                 0
                                                 10  15  20  25   30  35  40          20  25  30  35  40  45  50
                                                        微囊囊壁厚度(μm)                        微囊囊壁厚度(μm)




                   A:薄型PLGA微囊(×100);B:厚型PLGA微囊(×100);C:薄型PLGA囊壁厚度统计结果,厚度为(23.82±7.10)μm;D:厚型PLGA囊壁厚度
                统计结果,厚度为(35.31±5.55)μm。两组微囊囊壁厚度比较,P < 0.001(n=286)。
                                                   图3 不同囊壁厚度的PLGA微囊
                                        Figure 3  PLGA microspheres with different shell thickness
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