Page 25 - 南京医科大学学报自然科学版
P. 25
第42卷第9期 王 莹,陈 晨,陈 刚. BMP⁃2缓释型PLGA微囊作为引导骨再生支架的初步研究[J].
2022年9月 南京医科大学学报(自然科学版),2022,42(09):1216-1222 ·1219 ·
A B C
×100 ×200
18
16
( % ) 12
14
10
比例 8 6
4
2
0
0.01 0.1 1 10 100 1 000 3 000
粒径(μm)
A:光学显微镜下观察包封0.1%亚甲蓝的PLGA微囊(×100);B:PLGA微囊粒度分析结果;C:SEM观察PLGA微囊。
图2 双通道微量注射泵制备的PLGA微囊表征
Figure 2 The characterizations of PLGA microspheres prepared by dual⁃channel micro⁃syringe pump
壁的PLGA微囊大小均一,表面光滑,粒径均值无明 过程中囊壁厚薄不同未见对微囊的降解速率产生
显差异,约为167.58 μm。 明显影响。
2.2 PLGA微囊囊壁厚度分析 2.4 PLGA微囊细胞相容性检测结果
荧光显微镜下两组囊壁厚度的 PLGA 微囊(图 图 5 可见细胞培养第 7 天时加入 PLGA 微囊的
3A 、B),图像处理软件Image J测量微球囊壁厚度统 实验组与对照组的细胞均能正常增殖,并且细胞可
计结果显示:A 型同轴针头制备的 PLGA 微囊囊壁 黏附到 PLGA 微囊表面;CCK⁃8 实验结果显示细胞
厚度为(23.82±7.10)μm;B型同轴针头制备的PLGA 从1、3、5、7 d都表现出增长趋势,且加入PLGA微囊
微囊的囊壁厚度为(35.31±5.55)μm,B 型针头制备 浸提液培养后细胞活力与对照组基本无差异(1、3、
的 PLGA 微囊囊壁厚度明显大于 A 型同轴针头,差 7 d时,P > 0.05)。
异具有统计学意义(P < 0.001,图3C、D)。 2.5 细胞趋化实验
2.3 PLGA微囊的降解 趋化实验结果显示(图6),与空白组相比,两组
两种厚度 PLGA 微囊均可在 60 d 左右基本降 载有 BMP⁃2 的微囊作用 24 h,诱导细胞迁移量明显
解,SEM观察其不同时间点的微囊形态变化,35 d后 增多,差异有统计学意义。而载有 BMP⁃2 的薄型
PLGA 微囊在 SEM 镜下基本丧失其原本特征(图 PLGA微囊24 h内诱导细胞迁移的量也明显多于厚
4A)。PLGA 微囊降解动力学变化(图 4B),随着时 型PLGA微囊,差异有统计学意义(P < 0.05)。
间的推移,PLGA微囊质量逐渐减少,最初20 d微囊
3 讨 论
降解速度较慢,20 d之后微囊降解速度加快,降解末
期 42 d 以后降解速度减慢直至降解完成。降解全 传统乳液挥发法制备的PLGA微囊多用作缓释
A C D
60 60
( 个 ) 40 ( 个 ) 40
微囊计数 微囊计数
B 20 20
0 0
10 15 20 25 30 35 40 20 25 30 35 40 45 50
微囊囊壁厚度(μm) 微囊囊壁厚度(μm)
A:薄型PLGA微囊(×100);B:厚型PLGA微囊(×100);C:薄型PLGA囊壁厚度统计结果,厚度为(23.82±7.10)μm;D:厚型PLGA囊壁厚度
统计结果,厚度为(35.31±5.55)μm。两组微囊囊壁厚度比较,P < 0.001(n=286)。
图3 不同囊壁厚度的PLGA微囊
Figure 3 PLGA microspheres with different shell thickness