Page 19 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第1期 田 祯，庄皓冉，江楚雯，等. YAP通过调控EEF1A2的表达促进肝癌细胞的迁移和侵袭［J］.
2023年1月 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（01）：008-016 · 13 ·

A B 脉管系统发育 P值
KD⁃YAP vs. NC1 神经元发育 0.001 6
低氧应答反应 0.001 2
负调控有机体代谢 0.000 8
心血管系统发育 0.000 4
细胞迁移调控
负调控细胞增殖
3 528 432 392
细胞运动调控
细胞内物质运输调控
细胞外基质组装
组织发育
KD⁃TAZ vs. NC1 生物黏附
细胞黏附
循环系统发育
0 5 10 15 20
基因富集率（%）
C 2.2 * D
2.0 * * 丁丁丁丁丁丁 NC1 SMMC7721 SK⁃HEP1
mRNA相对表达量 1.4 * 丁丁丁丁丁丁 * * 丁丁丁丁丁丁 NC2 EEF1A2 NC1 KD⁃YAP NC2 OE⁃YAP NC1 KD⁃YAP NC2 OE⁃YAP 50 kDa
1.8
KD⁃YAP
丁丁丁丁丁丁
1.6
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁丁丁丁丁丁丁 OE⁃YAP
丁丁丁丁丁丁
1.2
丁丁丁丁丁丁丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
1.0
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
0.8
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
120 kDa
丁丁丁丁丁丁
E⁃CAD
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
0.6
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
0.4
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
0.2 丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁 Snail 29 kDa
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁
0 丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁 GAPDH 37 kDa
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
EEF1A2 E⁃CAD Snail
E
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
NC1 KD⁃YAP NC2 丁丁丁丁丁丁 OE⁃YAP NC1 KD⁃YAP NC2 丁丁丁丁丁丁 OE⁃YAP NC1 KD⁃YAP NC2 丁丁丁丁丁丁 OE⁃YAP
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
2.0 * 丁丁丁丁丁丁 * 丁丁丁丁丁丁 2.0 * * 2.0 * *
1.5
EEF1A2 蛋白相对表达量 1.5 * 丁丁丁丁丁丁 * 丁丁丁丁丁丁 E⁃CAD 蛋白相对表达量 1.0 * * Snail 蛋白相对表达量 1.5 * 丁丁丁丁丁丁 * 丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
1.0
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
1.0
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
0.5
丁丁丁丁丁丁
0.5
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
0 丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁 0 丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁 0.5 0 丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
SMMC7721 SK⁃HEP1 SMMC7721 SK⁃HEP1 SMMC7721 SK⁃HEP1
F G
SMMC7721 SK⁃HEP1
1.0
** NC1 KD⁃EEF1A2 NC2 OE⁃EEF1A2 NC1 KD⁃EEF1A2 NC2 OE⁃EEF1A2
0.8 E⁃CAD 120 kDa
相对富集量 0.6 Snail 29 kDa
0.4
0.2
0 GAPDH 37 kDa
IgG anti⁃YAP
H
3.0 2.0
* NC1 1.5 ** 丁丁丁丁丁丁 ** NC1
2.5
KD⁃EEF1A2
KD⁃EEF1A2
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
E⁃CAD 蛋白相对表达量 2.0 * ** ** 丁丁丁丁丁丁 NC2 Snail 蛋白相对表达量 1.0 ** 丁丁丁丁丁丁 ** 丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁 NC2
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁 OE⁃EEF1A2
丁丁丁丁丁丁 OE⁃EEF1A2
丁丁丁丁丁丁
1.5
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
1.0
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
0.5
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁 0.5 丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
0 丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁 0 丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
SMMC7721 SK⁃HEP1 SMMC7721 SK⁃HEP1
A：干扰YAP表达和干扰TAZ表达的SMMC⁃7721细胞中RNA⁃seq检测差异表达基因的韦恩图中显示有432个重叠基因；B：重叠基因功能
富集分析结果；C：RT⁃qPCR检测YAP干扰和过表达对SMMC7721细胞中EEF1A2和EMT标志物Snail与E⁃CAD mRNA表达水平的影响，GAPDH
为内参，两组比较，P < 0.05，n=4；D、E：Western blot检测YAP干扰和过表达对SMMC7721和SK⁃HEP1细胞中EEF1A2、Snail和E⁃CAD蛋白表达
*
水平的影响，GAPDH 为内参，两组比较，P < 0.05，n=3；F：CUT&RUN⁃qPCR 检测 SMMC7721 细胞中 EEF1A2 启动子的富集情况，两组比较，
*
P < 0.01，n=3；G、H：Western blot 检测 EEF1A2 干扰和过表达对 SMMC7721 和 SK⁃HEP1 细胞中 Snail 和 E⁃CAD 表达的影响，GAPDH 为内参，
**
**
P < 0.01，n=3。NC1为干扰表达对照组，NC2为过表达对照组，KD⁃YAP为YAP干扰表达组，OE⁃YAP为YAP过表达组，KD⁃EEF1A2为EEF1A2
干扰表达组，OE⁃EEF1A2为EEF1A2过表达组。
图3 YAP可以调控肝癌细胞中EEF1A2的表达
Figure 3 YAP regulated the expression of EEF1A2 in HCC cells