Page 20 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第1期
· 14 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年1月

Snail，下调 E⁃CAD（图 3D、E）。上述实验结果表明， 2.3 YAP通过EEF1A2调控肝癌细胞的迁移和侵袭
YAP可以调控肝癌细胞中EEF1A2的表达。为了探 为了研究YAP是否可以通过促进EEF1A2表达
究 YAP 是否通过转录调控 EEF1A2 的表达，进一步 进一步调控肝癌细胞的迁移和侵袭，本研究分别在
开展了 CUT&RUN 结合 qPCR 实验，由图 3F 可见， 干扰 YAP 表达的 SMMC7721 和 SK⁃HEP1 细胞中联
EEF1A2基因的启动子序列可以被抗YAP的单克隆 合过表达 EEF1A2、在 YAP 过表达的 SMMC7721 和
抗体富集（细胞中 EEF1A2 启动子的 Anti⁃YAP 与 SK⁃HEP1 细胞中联合干扰 EEF1A2 表达后，利用
IgG的相对富集量为6.501 ± 1.250 vs. 1.001 ± 0.101， Transwell 细胞迁移和侵袭实验观察了细胞迁移和
P < 0.01），该结果证实 YAP 可以与 EEF1A2 基因的 侵袭能力的改变。Transwell 细胞迁移和侵袭实验
启动子序列结合，促进EEF1A2的表达。此外，本研 结果由图 4 可见，与干扰 YAP 表达细胞组相比，
究进一步采用 Western blot 方法检测了 EEF1A2 干 EEF1A2 过表达可以显著促进干扰 YAP 表达的

扰和过表达对 SMMC⁃7721 和 SK⁃HEP1 细胞中 EMT SMMC⁃7721和SK⁃HEP1细胞的迁移和侵袭（在干扰
相关的 Snail 和 E⁃CAD 表达的影响，结果显示干扰 YAP表达的细胞中过表达EEF1A2与干扰YAP表达
EEF1A2 可以下调细胞中 Snail、上调 E⁃CAD 的水 细胞组迁移和侵袭的相对细胞比例：SMMC7721 细
平，而 EEF1A2 过表达则可以上调细胞中 Snail、下 胞为 1.450 ± 0.181 vs. 1.002 ± 0.112 和 1.374 ± 0.224
调 E⁃CAD（图3G、H），该结果表明EEF1A2可以调控 vs. 1.004 ± 0.059；SK⁃HEP1 细胞为 1.411 ± 0.157 vs.
肝癌细胞的EMT进程。 1.003 ± 0.101 和 1.419 ± 0.224 vs. 1.001 ± 0.105；与

A
KD⁃YAP KD⁃YAP+OE⁃EEF1A2 OE⁃YAP OE⁃YAP+KD⁃EE1A2

SMMC7721

SK⁃HEP1

B C
KD⁃YAP KD⁃YAP+OE⁃EEF1A2 KD⁃YAP KD⁃YAP+OE⁃EEF1A2
丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁
OE⁃YAP 丁丁丁丁丁丁 OE⁃YAP+KD⁃EEF1A2 OE⁃YAP 丁丁丁丁丁丁 OE⁃YAP+KD⁃EEF1A2
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
2.0 * 2.0 *
* 1.8 *
1.8 * * 1.6 * *
迁移细胞相对比例 1.2 丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁 侵袭细胞相对比例 1.2 丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁
1.6
1.4
1.4
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
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丁丁丁丁丁丁
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丁丁丁丁丁丁
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丁丁丁丁丁丁
1.0
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丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
1.0
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丁丁丁丁丁丁
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丁丁丁丁丁丁
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0.8
0.8
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0.6
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0.4
0.4
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丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁 0.6 丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁
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丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
0.2 丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁 0.2 丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁
0 丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁 0 丁丁丁丁丁丁 丁丁丁丁丁丁
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丁丁丁丁丁丁
丁丁丁丁丁丁
SMMC7721 SK⁃HEP1 SMMC7721 SK⁃HEP1
A、B：Transwell细胞迁移实验检测结果（× 200），两组比较，P < 0.05，n=3；C：Transwell细胞侵袭实验检测的统计结果，两组比较，P < 0.05，
*
*
n=3。KD⁃YAP 为 YAP 干扰表达组，KD⁃YAP+OE⁃EEF1A2 为干扰 YAP 表达的细胞中联合过表达 EEF1A2 组，OE⁃YAP 为 YAP 过表达组，OE⁃
YAP+KD⁃EEF1A2为YAP过表达的细胞中联合干扰EEF1A2表达组。
图4 YAP通过EEF1A2调控肝癌细胞的迁移和侵袭
Figure 4 YAP regulated the migration and invasion of HCC cells through EEF1A2