Page 18 - 南京医科大学学报自然科学版
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第43卷第1期
· 12 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年1月
A SMMC7721 SK⁃HEP1
NC1 KD⁃YAP NC1 KD⁃YAP
迁移
侵袭
SMMC7721 SK⁃HEP1
NC1 KD⁃EEF1A2 NC1 KD⁃EEF1A2
迁移
侵袭
B
1.2 ** ** ** *
1.2 * * * NC1 NC1
* KD⁃YAP 1.0 KD⁃EEF1A2
1.0
相对细胞比例 0.8 相对细胞比例 0.8
0.6
0.6
0.4
0.4
0.2
0 0.2 0
迁移 侵袭 迁移 侵袭 迁移 侵袭 迁移 侵袭
SMMC7721 SK⁃HEP1 SMMC7721 SK⁃HEP1
A、B:Transwell 实验检测 YAP 和 EEF1A2 干扰表达对肝癌细胞 SMMC7721 和 SK⁃HEP1 迁移和侵袭的影响(× 200),NC1 为干扰表达对照
组,KD⁃YAP为YAP干扰表达组,KD⁃EEF1A2为EEF1A2干扰表达组。两组比较,P < 0.05,P < 0.01,n=3。
*
**
图2 干扰YAP和EEF1A2表达对肝癌细胞迁移和侵袭的影响
Figure 2 Effect of YAP and EEF1A2 knockdown on the migration and invasion of HCC cells
控细胞迁移、细胞运动和细胞增殖(图 3B),其中包 EEF1A2为0.521±0.150vs.1.001±0.083和1.482±0.182
括 EEF1A2 以及与 EMT 相关的 SNAIL 和 CDH1 等。 vs. 1.053 ± 0.093;E ⁃ cadherin 为 1.651 ± 0.192 vs.
为了证实YAP对EEF1A2、SNAIL和CDH1表达的影 1.002 ± 0.113 和 0.522 ± 0.202 vs. 1.113±0.103;Snail
响 ,我 们 首 先 采 用 RT ⁃ qPCR 验 证 了 YAP 对 为 0.581 ± 0.173 vs. 1.013±0.103 和 1.723±0.282 vs.
SMMC7721 细胞中 EEF1A2、Snail(SNAIL 的表达产 1.016 ± 0.073,P < 0.05);其次,应用建立的 YAP 干
物)和E⁃cadherin(E⁃CAD,CDH1的表达产物)mRNA 扰和过表达的 SMMC⁃7721 和 SK⁃HEP1 肝癌细胞
水平的影响,检测结果与RNA⁃seq结果相一致,YAP 模型,通过 Western blot 方法检测了 YAP 干扰和过
干扰表达可以下调 EEF1A2 和 Snail 的 mRNA 水平, 表达对细胞中 EEF1A2、Snail 以及 E⁃CAD 蛋白表
上调 E⁃CAD 的 mRNA 水平(图 3C,YAP 干扰和过表 达水平的影响,检测结果与 RT⁃qPCR 验证结果相
达 的 SMMC7721 细 胞 与 各 自 对 照 组 细 胞 中 一致,干扰 YAP 表达可以下调 EEF1A2 和 Snail,上
EEF1A2、E⁃cadherin 和 Snail 的 mRNA 相对表达量: 调 E⁃CAD,而 YAP 过表达则可以上调 EEF1A2 和