Page 22 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第10期
·1348 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年10月

想的机制进行反应。 结果如图 9，HeLa 细胞与 50 μmol/L 以下的 SiRho⁃
GABA⁃KYC孵育24 h后，细胞存活率超过90%，表明
SiRho⁃GABA⁃KYC对HeLa细胞的毒性很小，生物相
SiRho⁃GABA⁃KYC
容性好，细胞对10 μmol/L的探针是完全可以耐受的。

A 100
（ % ）
细胞活力 50
SiRho⁃GABA⁃KYC+HClO

B
0
0 5 10 20 30 50
SiRho⁃GABA⁃KYC⁃ON SiRho⁃GABA⁃KYC浓度（μmol/L）
图9 SiRho⁃GABA⁃KYC对HeLa细胞活力的影响
C Figure 9 Effect of SiRho⁃GABA⁃KYC on relative of cell
viability of HeLa cells
10 11 12 13 14 15 16
时间（min） 2.7 外源性次氯酸成像
为了考察探针对细胞中外源性HClO 的成像能
A：SiRho⁃GABA⁃KYC；B：SiRho⁃GABA⁃KYC+HClO；C：SiRho⁃
GABA⁃KYC⁃ON。 力，用不同浓度的 HClO 处理 HeLa 细胞（图 10）。
图8 HPLC分析结果 荧光强度随外源性 HClO 浓度升高而增强，加入
Figure 8 HPLC analysis
30 μmol/L HClO 孵育的荧光强度比对照组增强
2.6 细胞毒性 >2 倍，表明探针能够有效检测 HeLa 细胞的外源性
用 CCK⁃8 比色法进行探针的细胞毒性实验。 HClO，且与HClO呈浓度依赖性增强。

HClO浓度（μmol/L）
0 5 10 15 20 30
SiRho⁃GABA⁃KYC 4 3 ***

Hoechst 相对荧光强度 2 1 * *** *** ***

0
Merge 0 5 HClO浓度（μmol/L） 30
15
20
10
HeLa 细胞与 HClO（0~30 μmol/L）孵育 30 min，再与 SiRho⁃GABA⁃KYC（10 μmol/L）孵育 30 min 的荧光成像和荧光强度。与 0 μmol/L 组比
较，P < 0.05， P < 0.001，n=3。
***
*
图10 SiRho⁃GABA⁃KYC对细胞中外源性HClO的成像能力
Figure 10 Imaging ability of SiRho⁃GABA⁃KYC for exogenous HClO in cells

加。目前，HClO 荧光探针的研究取得了显著进展，
3 讨 论
虽然这些 HClO 探针在体外对 HClO 均有很好的灵
HClO 是氧化应激中非常重要的一类生物标志 敏度、选择性、稳定性，但没有靶向检测 MPO 的能
物，它的过量产生与多种疾病密切相关。脑卒中发 力。在此前提下，设计合成了 SiRho⁃GABA⁃KYC。
生后，MPO 表达量和催化活性上调，HClO 生成增 该探针对 HClO 响应较高，选择性好。细胞实验结