Page 11 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第11期 王 舒，江婧月，王 迪，等. 羟氯喹介导NF⁃κB/NLRP3通路抑制M1型巨噬细胞极化缓解
2023年11月 小鼠肠道炎症［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（11）：1479-1486 ·1483 ·

A 4
1 000 10
8.63
800 10 3
600
SSC CD11b 10 2
400
10 1
200 50.3
0 10 0 0 1 2 3 4
0 200 400 600 800 1 000 10 10 10 10 10
FSC CD45
对照组 DSS组 DSS+HCQ组
10 4 10 4 10 4
7.03% 12.10% 8.30% （ % ）
10 3 10 3 10 3 15 ** *
CD86 10 2 10 2 10 2 10

10 1 10 1 10 1 M1型巨噬细胞比例 5
10 0 10 0 10 0 0
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 对照组 DSS组 DSS+HCQ组
F4/80
B
20 *** ** 5 4 *** 25 *** ***
IL⁃1β相对表达量 15 5 IL⁃12相对表达量 3 2 IL⁃23相对表达量 15
20
10
10

0 1 0 5 0
对照组 DSS组 DSS+HCQ组 对照组 DSS组 DSS+HCQ组 对照组 DSS组 DSS+HCQ组
10 8 *** 5 4 *** *** 2.5 *** ***
IL⁃6相对表达量 6 4 TNF⁃α相对表达量 3 2 iNOS相对表达量 1.5
2.0

1.0

0 2 1 0 0.5 0
对照组 DSS组 DSS+HCQ组 对照组 DSS组 DSS+HCQ组 对照组 DSS组 DSS+HCQ组
A：提取对照组、DSS组、DSS+HCQ组小鼠结肠LPMC，流式细胞术检测各组M1型巨噬细胞比例；B：PCR检测对照组、DSS组、DSS+HCQ组小鼠
结肠LPMC中M1型巨噬细胞相关炎性标志物（IL⁃1β、IL⁃6、IL⁃12、TNF⁃α、IL⁃23及iNOS）表达；两组比较，P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001（n=6）。
*
**
***
图2 HCQ抑制肠炎模型鼠结肠中M1型巨噬细胞极化及其相关炎性标志物表达
Figure 2 HCQ reduces M1 proportion and expression of M1⁃related inflammatory mediators in colitis model mice
2.4 HCQ 通过 NF⁃κB/NLRP3 信号通路抑制 M1 型 达水平（图 4G~L），并且 PDTC 可显著抑制 M1 型巨
巨噬细胞极化 噬细胞极化（图4M），与 HCQ对M1型巨噬细胞极化
首先检测参与调控M1型巨噬细胞极化通路的 的抑制作用相同。
p⁃NF⁃κB、p⁃STAT1以及IRF5蛋白表达水平，发现在
3 讨 论
LPS/IFN⁃γ处理组中 NF⁃κB 的蛋白磷酸化水平明显
升高，而 HCQ 处理后可显著抑制 NF⁃κB 蛋白磷酸 本研究在 DSS 诱导小鼠结肠炎模型上，明确了
化，但HCQ对p⁃STAT1以及IRF5蛋白表达水平无明 HCQ 可减轻肠道炎症，并发现可以降低小鼠结肠
显影响（图4A、B）。其次，检测各组中NF⁃κB下游通 M1 型巨噬细胞比例。细胞实验中诱导分化小鼠
路炎性小体相关基因的表达，结果提示HCQ可显著 BMDM，发现HCQ通过NF⁃κB/NLRP3信号通路抑制
抑制 LPS/IFN⁃γ对 NLRP3、Caspase⁃1 以及 ASC 蛋白 M1型巨噬细胞极化及其炎性因子的释放。

的上调（图 4C~F）。最后，利用 NF⁃κB 抑制剂 PDTC UC是一种慢性非特异性消化道炎症性疾病，研
［16］
作为对照，结果发现，PDTC 可显著抑制 p⁃NF⁃κB 及 究发现M1型巨噬细胞极化与肠道炎症有关 。本研
其下游相关基因NLRP3、Caspase⁃1以及ASC蛋白表 究也证实，DSS结肠炎模型鼠肠道固有肌层中M1型