Page 13 - 南京医科大学学报自然科学版
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第43卷第11期 王 舒,江婧月,王 迪,等. 羟氯喹介导NF⁃κB/NLRP3通路抑制M1型巨噬细胞极化缓解
2023年11月 小鼠肠道炎症[J]. 南京医科大学学报(自然科学版),2023,43(11):1479-1486 ·1485 ·
HCQ+LPS/IFN⁃γ组
A B 3 *** *
对照组 LPS/IFN⁃γ组 2
p⁃NF⁃κB 65 kDa NF⁃κB蛋白磷酸化水平 1
NF⁃κB 65 kDa
p⁃STAT1 83 kDa 0
LPS/IFN⁃γ组
STAT1 83 kDa 对照组
IRF5 56 kDa HCQ+LPS/IFN⁃γ组
β⁃actin 42 kDa
C D 6 *** * E 2 ** *** F 3 ** *
HCQ+LPS/IFN⁃γ组
对照组 LPS/IFN⁃γ组 NLRP3蛋白表达水平 4 ASC蛋白表达水平 1 2
NLRP3 110 kDa 2 Caspase⁃1蛋白表达水平 1
Pro Caspase⁃1 45 kDa 0 0
HCQ+LPS/IFN⁃γ组
HCQ+LPS/IFN⁃γ组
Caspase1 45 kDa 对照组 对照组 0
LPS+IFN⁃γ组
ASC 25 kDa LPS+IFN⁃γ组 LPS+IFN⁃γ组 对照组
β⁃actin 42 kDa HCQ+LPS/IFN⁃γ组
G H 3
PDTC+LPS/IFN⁃γ组
对照组 LPS/IFN⁃γ组 2 * **
p⁃NF⁃κB 65 kDa NF⁃κB蛋白磷酸化水平 1
NF⁃κB 65 kDa 0
LPS+IFN⁃γ组
对照组
PDTC+LPS/IFN⁃γ组
PDTC+LPS/IFN⁃γ组
I J 3 * * K 2 L 2 * *
对照组 LPS/IFN⁃γ组 NLRP3蛋白水平 2 ASC蛋白水平 1 ** ** Caspase⁃1蛋白水平 1
NLRP3 110 kDa 1
Pro Caspase⁃1 45 kDa
0 0 0
对照组 对照组 对照组
LPS/IFN⁃γ组
PDTC+LPS/IFN⁃γ组
PDTC+LPS/IFN⁃γ组
Caspase1 45 kDa
ASC 25 kDa LPS/IFN⁃γ组 PDTC+LPS/IFN⁃γ组 LPS/IFN⁃γ组
β⁃actin 42 kDa
M 对照组 LPS/IFN⁃γ组 PDTC+LPS/IFN⁃γ组
10 4 10 4 10 4 100 *** ***
4.27% 84.40% 60.70% ( % )
10 3 10 3 10 3 80
CD86 10 2 10 2 10 2 M1型巨噬细胞 60
40
1 1 1 20
10 10 10 0
LPS/IFN⁃γ
10 0 10 0 10 0 对照组
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 PDTC+LPS/IFN⁃γ组
F4/80
A、B:Western blot 检测各组巨噬细胞中 p⁃NF⁃κB、NF⁃κB、p⁃STAT1、STAT1 以及 IRF5 蛋白表达水平(A)及 NF⁃κB 蛋白磷酸化水平(B);
C~F:通过 Western blot 检测各组巨噬细胞中 NLRP3、Pro⁃Caspase⁃1、Caspase⁃1 以及 ASC 蛋白表达水平(C)及半定量分析(D~F);G、H:Western
blot检测各组巨噬细胞中p⁃NF⁃κB蛋白表达水平(G)及半定量分析(H);I~L:Western blot检测各组巨噬细胞中NLRP3、Pro⁃Caspase⁃1、Caspase⁃1以
及ASC蛋白表达水平(I)及半定量分析(J~L);M:流式细胞术检测各组中M1型巨噬细胞比例;两组比较,P < 0.05,P < 0.01, P < 0.001(n=3)。
***
*
**
图4 HCQ体外通过调节NF⁃κB/NLRP3信号通路抑制M1型巨噬细胞极化
Figure 4 HCQ suppresses M1 macrophage polarization through inhibiting the NF⁃κB/NLRP3 pathway