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第43卷第11期          王  舒,江婧月,王 迪,等. 羟氯喹介导NF⁃κB/NLRP3通路抑制M1型巨噬细胞极化缓解
                 2023年11月             小鼠肠道炎症[J]. 南京医科大学学报(自然科学版),2023,43(11):1479-1486                  ·1485 ·


                                                       HCQ+LPS/IFN⁃γ组
                                     A                              B    3    ***  *
                                              对照组  LPS/IFN⁃γ组            2

                                       p⁃NF⁃κB            65 kDa        NF⁃κB蛋白磷酸化水平  1
                                        NF⁃κB             65 kDa
                                       p⁃STAT1            83 kDa         0
                                                                           LPS/IFN⁃γ组
                                        STAT1             83 kDa          对照组
                                         IRF5             56 kDa           HCQ+LPS/IFN⁃γ组
                                        β⁃actin           42 kDa
                C                                D   6    ***  *      E    2     **  ***     F   3    **   *
                                    HCQ+LPS/IFN⁃γ组
                           对照组  LPS/IFN⁃γ组          NLRP3蛋白表达水平  4        ASC蛋白表达水平  1           2

                    NLRP3             110 kDa        2                                          Caspase⁃1蛋白表达水平  1
                Pro Caspase⁃1         45 kDa         0                     0
                                                       HCQ+LPS/IFN⁃γ组
                                                                             HCQ+LPS/IFN⁃γ组
                   Caspase1           45 kDa          对照组                   对照组                  0
                                                                                                  LPS+IFN⁃γ组
                      ASC             25 kDa           LPS+IFN⁃γ组           LPS+IFN⁃γ组            对照组
                    β⁃actin           42 kDa                                                       HCQ+LPS/IFN⁃γ组
                                    G                               H   3
                                                       PDTC+LPS/IFN⁃γ组
                                              对照组  LPS/IFN⁃γ组           2     *   **

                                      p⁃NF⁃κB            65 kDa         NF⁃κB蛋白磷酸化水平  1
                                        NF⁃κB            65 kDa         0
                                                                          LPS+IFN⁃γ组
                                                                         对照组
                                                                          PDTC+LPS/IFN⁃γ组


                                    PDTC+LPS/IFN⁃γ组
                I                                 J   3     *   *      K   2                 L   2     *   *
                           对照组  LPS/IFN⁃γ组           NLRP3蛋白水平  2         ASC蛋白水平  1  **  **    Caspase⁃1蛋白水平  1

                    NLRP3             110 kDa         1
                Pro Caspase⁃1         45 kDa
                                                      0                    0                     0
                                                       对照组                  对照组                   对照组
                                                                             LPS/IFN⁃γ组
                                                       PDTC+LPS/IFN⁃γ组
                                                                                                  PDTC+LPS/IFN⁃γ组
                   Caspase1           45 kDa
                      ASC             25 kDa           LPS/IFN⁃γ组            PDTC+LPS/IFN⁃γ组      LPS/IFN⁃γ组
                    β⁃actin           42 kDa
                  M            对照组                  LPS/IFN⁃γ组          PDTC+LPS/IFN⁃γ组
                      10 4                  10 4                   10 4                      100    ***  ***
                                     4.27%                 84.40%                 60.70%     ( % )
                      10 3                  10 3                   10 3                       80
                    CD86  10 2              10 2                   10 2                      M1型巨噬细胞  60
                                                                                              40
                       1                      1                      1                        20
                      10                    10                     10                          0
                                                                                                  LPS/IFN⁃γ
                      10 0                  10 0                   10 0                         对照组
                       10 0  10 1  10 2  10 3  10 4  10 0  10 1  10 2  10 3  10 4  10 0  10 1  10 2  10 3  10 4  PDTC+LPS/IFN⁃γ组
                                                     F4/80
                   A、B:Western blot 检测各组巨噬细胞中 p⁃NF⁃κB、NF⁃κB、p⁃STAT1、STAT1 以及 IRF5 蛋白表达水平(A)及 NF⁃κB 蛋白磷酸化水平(B);
                C~F:通过 Western blot 检测各组巨噬细胞中 NLRP3、Pro⁃Caspase⁃1、Caspase⁃1 以及 ASC 蛋白表达水平(C)及半定量分析(D~F);G、H:Western
                blot检测各组巨噬细胞中p⁃NF⁃κB蛋白表达水平(G)及半定量分析(H);I~L:Western blot检测各组巨噬细胞中NLRP3、Pro⁃Caspase⁃1、Caspase⁃1以
                及ASC蛋白表达水平(I)及半定量分析(J~L);M:流式细胞术检测各组中M1型巨噬细胞比例;两组比较,P < 0.05,P < 0.01, P < 0.001(n=3)。
                                                                                                 ***
                                                                                    *
                                                                                           **
                                   图4  HCQ体外通过调节NF⁃κB/NLRP3信号通路抑制M1型巨噬细胞极化
                        Figure 4  HCQ suppresses M1 macrophage polarization through inhibiting the NF⁃κB/NLRP3 pathway
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