Page 20 - 南京医科大学学报自然科学版
P. 20

第43卷第11期
               ·1492 ·                           南 京    医 科 大 学 学         报                        2023年11月


                    A                                           之间的细胞信号级联和细胞通讯,导致肝脏癌细胞
                         1.5   siNC
                               siSTAT1         *                转移性生长,并且诱导胰腺癌细胞的上皮⁃间充质
                        mRNA相对表达水平  1.0                         究表明,Axl 是针对耐药性和免疫抑制的重要分子
                                  **
                                                                转化,从而促进癌细胞在体内侵袭和扩散
                                                                                                          。研
                                                                                                       [15]
                                                                    [14]
                                                                靶标 。
                         0.5
                                                                     转录因子是控制细胞基因组表达的一类必不
                                                                                                           [5]
                          0                                     可少的蛋白质,已成为癌症研究和治疗的热点 。
                                 STAT1        Gas6
                                                                STAT家族成员被受体相关激酶磷酸化,形成同源或
                    B          pENTER
                                                                异源二聚体,这些二聚体在细胞核中作为转录激活
                               pENTER⁃STAT1
                       1 000      **                            因子介导多种基因的表达             [16] 。STAT1 属于 STAT 家
                      mRNA相对表达水平  600 3 2      *                素⁃α、干扰素⁃γ和白介素⁃6 等,在对病毒、真菌和分
                         800
                                                                族成员之一,该蛋白可被多种配体激活,包括干扰
                                                                枝杆菌病原体的免疫反应中起重要作用
                                                                                                   [17-18]
                                                                                                       。STAT1
                                                                通常被认为是肿瘤抑制因子,但有研究认为它也可

                          0 1                                   以促进肿瘤发生        [19] ,其在胃癌、结直肠癌中起致癌
                                                                                                           [21]
                                                                    [20]
                                 STAT1        Gas6              作用 ,并且与胃癌的免疫浸润和预后不良相关                        。
                 A:采用 qRT⁃PCR 检测 HEK⁃293T 转染 siRNA 后 STAT1 与 Gas6  由此可见,研究STAT1对探究相关疾病的分子机制
              的mRNA 水平;B:采用qRT⁃PCR 检测HEK⁃293T转染过表达质粒后           具有重要意义。
              STAT1与Gas6 的mRNA水平。两组比较,P<0.05,P<0.01(n=3)。
                                          *
                                                 **
                                                                     本研究显示 STAT1 作为转录因子可与癌症相
                  图5 STAT1在mRNA水平调控人Gas6基因表达
              Figure 5  STAT1 regulates the human Gas6 gene at  关基因 Gas6 启动子结合而在转录水平正向调控
                        mRNA level                              Gas6的表达,为后续研究提供了新的思路和方向。
               A                         B                     C                          D
                                                  siNC                                            pENTER
                       siNC siSTAT1          1.5                      pENTER pSTAT1
                                            蛋白相对表达量                                           6
                 STAT1            87 kDa          siSTAT1  *      STAT1            87 kDa     10  pSTAT1
                                                   *
                                                                                                   **
                  Gas6            75 kDa     1.0                   Gas6            75 kDa     8
                GAPDH             36 kDa     0.5                 GAPDH             36 kDa    蛋白相对表达量  4
                                              0                                               2           *
                                                 STAT1  Gas6
                                                                                              0
                                                                                                 STAT1  Gas6
                 A、B:Western blot检测HEK⁃293T转染siRNA后STAT1与Gas6 的蛋白水平(A)及定量分析结果(B);C、D:Western blot检测HEK⁃293T转染
              过表达质粒后STAT1与Gas6 的蛋白水平(C)及定量分析结果(D)。两组比较,P<0.05,P<0.01(n=3)。
                                                                   *
                                                                          **
                                            图6 STAT1在蛋白水平调控人Gas6基因表达
                                    Figure 6 STAT1 regulates the human Gas6 gene at the protein level


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