Page 43 - 南京医科大学学报自然科学版
P. 43

第43卷第11期                           南京医科大学学报（自然科学版）
                 2023年11月                   Journal of Nanjing Medical University（Natural Sciences）     ·1515 ·


               ·基础研究·

                tRF⁃011690对阿霉素诱导的足细胞自噬的影响



                赵唐明，王 娥，张琳琳，黄 婵，甘卫华                *
                南京医科大学第二附属医院儿肾科，江苏 南京                 210003




               ［摘   要］ 目的：探究tRNA衍生片段⁃011690（tRNA⁃derived fragment⁃011690，tRF⁃011690）在阿霉素（adriamycin，ADR）诱导的
                足细胞自噬中的作用及机制。方法：用 ADR（1 μg/mL）和 tRF⁃011690 mimic 干预足细胞，分为 Control 组、ADR 组、ADR+tRF⁃
                011690 mimic组和ADR+tRF⁃011690 NC组；RT⁃qPCR法检测各组tRF⁃011690、LC3和p62的mRNA表达水平；Western blot法测
                定各组LC3Ⅱ/Ⅰ和p62蛋白的表达量。用ADR（1 μg/mL）和雷帕霉素（Rapamycin）200 ng/mL干预足细胞，分为Control组、ADR
                组、ADR+Rapamycin组和Rapamycin组；RT⁃qPCR法检测各组tRF⁃011690表达水平，Western blot检测各组p⁃mTOR、LC3Ⅱ/Ⅰ和
                p62蛋白相对表达量。结果：同Control 组相比，ADR 组足细胞中tRF⁃011690表达水平下降，LC3和p62 mRNA 表达水平升高，
                LC3Ⅱ/Ⅰ和p62蛋白表达量显著增加（P < 0.05）；同ADR+tRF⁃011690 NC组相比，ADR+tRF⁃011690 mimic组tRF⁃011690表达水
                平显著上升（P < 0.05），LC3和p62 mRNA表达量显著降低，LC3Ⅱ/Ⅰ和p62蛋白表达量显著降低（P < 0.05）。同Control组相比，
                ADR 组 p⁃mTOR、LC3Ⅱ/Ⅰ和 p62 蛋白表达量均增加（P < 0.05）；同 ADR 组相比，ADR+Rapamycin 组 p⁃mTOR、LC3Ⅱ/Ⅰ和 p62
                蛋白表达量均降低，tRF⁃011690表达显著上升（P < 0.05）。结论：tRF⁃011690可能作为mTOR通路的下游效应分子抑制ADR诱
                导的足细胞自噬。
               ［关键词］ tRF⁃011690；足细胞；自噬；mTOR信号通路
               ［中图分类号］ R329                      ［文献标志码］ A                     ［文章编号］ 1007⁃4368（2023）11⁃1515⁃05
                doi：10.7655/NYDXBNS20231106



                    慢性肾脏病（chronic kidney disease，CKD）是指               tRNA 的衍生片段（transfer RNA⁃derived RNA
                肾脏结构或功能异常超过 3 个月的一类疾病，主要                          fragment，tRF）属于非编码小RNA家族，在细胞或组
                病理表现为肾小球硬化、肾小管萎缩和间质纤维                             织中由 RNA 核酸内切酶切割 tRNA 产生，根据切割
                化。CKD是一个全球性的重大公共卫生问题，发展                           位点的不同，可产生不同类型及功能的tRF 。已有
                                                                                                        ［6］
                为终末期肾病后只能依靠血液透析、腹膜透析及肾                            许多研究表明tRF在癌症、神经退行性疾病、心血管
                脏移植等维持生命，造成了严重的家庭和社会经济                            疾病等多类疾病中发挥作用，具有巨大的临床价值
                                                                                                     ［9］
                负担  ［1-3］ 。                                       和应用潜力      ［7-8］ 。在肾脏疾病中，Shi 等 研究发现
                    自噬是真核细胞将胞内物质降解并循环利用                           tRF 参与足细胞分化与损伤、肾小管细胞纤维化等
                的过程，其在细胞、组织和生物体稳态中起重要作                            病理过程。
                用，自噬相关基因突变与人类疾病之间存在明确的                                本课题组通过高通量测序在分化的足细胞中
                          ［4］
                病因学联系 。研究表明，肾脏中基础水平的自噬                            发现多条差异表达的tRF，其中表达下调的AS⁃tDR⁃
                对维持内环境稳态至关重要，但在炎症、饥饿及缺                            011690、tDR⁃003634和AS⁃tDR⁃13354被证实参与足
                氧等应激条件下，自噬失调可导致足细胞的损伤和                            细胞损伤，其中tRF⁃011690低表达最为显著，且目前
                缺失，从而进一步造成肾脏损害，急性肾损伤、肾脏                           尚未有研究探讨tRF⁃011690与足细胞损伤的关系及
                纤维化以及CKD中都涉及这一机制 。因此，对足细                          机制，因此本研究选择tRF⁃011690为研究对象。此
                                               ［5］
                胞自噬的深入研究具有重要临床意义。                                 外，KEGG（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes）
                                                                  分析显示mTOR信号通路与差异表达的tRF之间存
                                                                  在紧密联系      ［10］ 。有研究证实，mTOR 信号通路与肾
               ［基金项目］ 江苏省自然科学基金（BK20211385）；南京医科
                                                                  自噬相关    ［11］ ，因此，本研究通过探讨 tRF⁃011690 在
                大 学 第 二 附 属 医 院“789”卓 越 人 才 培 养 计 划（789ZYRC
                202080119、789ZYRC202090251）                       阿霉素（adriamycin，ADR）诱导的足细胞损伤中的
                ∗                                                 作用，以及 tRF⁃011690 与 mTOR 信号通路间的可能
                通信作者（Corresponding author），E⁃mail：weihuagan@njmu.edu.cn
   38   39   40   41   42   43   44   45   46   47   48