Page 46 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第11期
·1518 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年11月

A 1.5 * B 2.0 # C D 2.0 *
mTOR mRNA相对表达量 1.0 # tRF⁃011690相对表达量 1.5 * Control组 ADR组 ADR+Rapamycin组 Rapamycin组 p⁃mTOR蛋白相对表达量 1.5

1.0
1.0
0.5

43 kDa
β⁃actin
0 0.5 0 p⁃mTOR 289 kDa 0.5 0 #
ADR+Rapamycin组
ADR+Rapamycin组
ADR+Rapamycin组
Control组 ADR组 Rapamycin组 Control组 ADR组 Rapamycin组 Control组 ADR组 Rapamycin组
E F 2.5 * Control组

ADR+Rapamycin组
Control组 ADR组 ADR+Rapamycin组 Rapamycin组 2.0 * # 一一 一一 # 一一 一一 一一 一一 一一 一一 ADR组
Rapamycin组
1.5
LC3Ⅰ 16 kDa 蛋白相对表达量 1.0 一一 一一
LC3 Ⅱ 14 kDa 一一 一一 一一 一一
p62 62 kDa 0.5 一一 一一 一一 一一 一一 一一
一一 一一
0
β⁃actin 43 kDa LC3Ⅱ/Ⅰ 一一 一一 p62 一一 一一
一一 一一
A：mTOR mRNA 的相对表达量；B：tRF⁃011690 的相对表达量；C、D：p⁃mTOR 蛋白的相对表达量（C）及定量分析（D）；E、F：LC3Ⅱ/Ⅰ和
p62的蛋白相对表达量（E）及定量分析（F）。与Control组比较，P＜0.05；与ADR组比较，P＜0.05（n=3）。
*
#
图2 阻断mTOR信号通路对tRF⁃011690及足细胞自噬的影响
mimic组LC3和p62 mRNA表达明显降低，LC3Ⅱ/Ⅰ 诱导的足细胞自噬水平；进一步阻断mTOR 信号通
和 p62 蛋 白 表 达 也 明 显 降 低 ，表 明 过 表 达 tRF ⁃ 路后，足细胞自噬水平降低，tRF⁃11690 表达上调。
011690能够调节ADR诱导的足细胞自噬。 本研究的主要目的在于探索 tRF⁃011690 对 ADR 诱
mTOR信号通路是调节细胞自噬的重要通路， 导肾病小鼠足细胞自噬的影响，同时研究 tRF⁃
在营养缺乏、缺氧和药物治疗诱导的应激条件下， 011690 与 mTOR 信号通路间可能的作用方式，以便
mTOR通路对自噬的调控是细胞存活的关键机制 ［21］ 。 为CKD的治疗研究提供一个新的研究思路。
mTOR 可以分为 mTOR 复合物 1（mTORC1）和复合 ［参考文献］
物 2（mTORC2），其中 mTORC1 是细胞自噬的重要
［1］ KIDNEY DISEASE：IMPROVING GLOBAL OUTCOMES
调 节 器 ，Rapamycin 及 其 类 似 物 可 以 通 过 抑 制
（KDIGO）DIABETES WORK GROUP. KDIGO 2020
mTORC1 活性来阻断 mTOR 信号通路，进而抑制自
clinical practice guideline for diabetes management in
噬 ［22］ 。课题组前期通过 KEGG 分析筛选出多条与 chronic kidney disease［J］. Kidney Int，2020，98（4s）：
tRF相关的信号通路，在这些信号通路中，本研究显 S1-S115
示ADR干预足细胞后mTOR信号通路中的关键蛋白 ［2］ DIWAN V，BROWN L，GOBE G C. Adenine ⁃ induced
p⁃mTOR表达量显著升高，因此猜想tRF⁃011690是 chronic kidney disease in rats［J］. Nephrology，2018，23
（1）：5-11
否通过该信号通路影响足细胞自噬。用Rapamycin
阻断 mTOR 信号通路后通过测量 tRF⁃011690 的表 ［3］ GLASSOCK R J，WARNOCK D G，DELANAYE P. The
global burden of chronic kidney disease：estimates，varia⁃
达水平来探究这二者之间的联系。结果表明，阻断
bility and pitfalls［J］. Nat Rev Nephrol，2017，13（2）：
mTOR信号通路后，tRF⁃011690表达上调，足细胞自
104-114
噬被抑制，推测tRF⁃011690可能作为mTOR通路的
［4］ LEVINE B，KROEMER G. Biological functions of auto⁃
下游效应分子发挥抑制足细胞自噬的作用。
phagy genes：a disease perspective［J］. Cell，2019，176（1/
综上所述，本研究发现 ADR 干预足细胞后，自 2）：11-42
噬水平升高，mTOR 信号通路被激活，tRF⁃011690 ［5］ TANG C Y，LIVINGSTON M J，LIU Z W，et al. Autophagy
表达下调。过表达 tRF⁃011690 后，可以降低 ADR in kidney homeostasis and disease［J］. Nat Rev Nephrol，